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酸水解法測定脂肪操作方法
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本文由 上海恒遠ELISA試劑盒供應商 整理匯編
2018-11-16 10:02 3396閱讀次數(shù)
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酸水解法測定脂肪內(nèi)容摘要：酸水解法適用于各類食品中脂肪的測定，對固體、半固體、黏稠液體或液體食品，特別是加工后的混合食品，容易吸濕、結塊，不易烘干的食品，不能采用索氏提取法時，用此法效果較好。1．酸水解法原理強酸與樣品一同加熱進行水解，結合或包藏在組織里的脂肪可游離出來，然后用乙迷和石油醚提取脂肪，回收溶劑，除去溶劑后即為脂肪含量。2．儀器①100mL具塞刻度量筒。②烘箱。3．試劑①95％乙醇。②乙迷（不含過氧化物）。③石油醚（30~60℃沸程）。④濃鹽酸。4．測定步驟①樣品處理a．固體樣品：準確稱取約2．0g，置于50mL試管中，加8mL水，混勻后再加10mL濃鹽酸。b．液體樣品：準確稱取10.0g置于50mL試管中，加10mL，濃鹽酸。②水解：將試管放入70~80℃水浴中，每隔5～10min用玻璃棒攪拌一次，至樣品脂肪游離消化完全為止，時間約需40~50rain。水解過程中，如水分蒸發(fā)，應適當補加水，保持溶液總體積不變，以避免酸濃度升高。③提?。喝〕鲈嚬?，加入10mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移人100mL具塞量筒中，用25mL乙迷分次洗試管，洗液一并倒人量筒中。加塞振搖1rain，小心開塞放出氣體，再塞好，靜置12min，小心開塞，用石油醚一乙迷等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10~20min，待上部液體澄清，吸出上清液于已恒重的燒瓶內(nèi)，再加5mL石油醚一乙迷等量混合液于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙迷吸出，放人原燒瓶內(nèi)。④回收溶劑、烘干、稱重：回收燒瓶內(nèi)乙迷后，將燒瓶于水浴上蒸干后，置100~105℃烘箱中干燥2h，取出放進干燥器內(nèi)，冷卻30min后稱重，反復干燥冷卻操作至恒重。5.說明①測定的樣品需充分磨細，液體樣品需充分混合均勻，以使消化完全。②水解后加的乙醇可使蛋白質(zhì)沉淀，促進脂肪球聚合，同時溶解一些碳水化合物、有機酸等。后面用乙迷提取，因乙醇可溶于乙迷，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物殘留在水層，并使分層清晰。③揮干溶劑后，殘留物中若有黑色焦油狀雜質(zhì)，是分解物與水一同混入所致，會使測定值增大，造成誤差，可用等量的乙迷及石油醚溶解后過濾，再次進行揮干溶劑的操作。④因磷脂在酸水解條件下分解為脂肪酸和堿，故本法不宜用于測定含有大量磷脂的食品如魚類、貝類和蛋品。此法也不適于含糖高的食品，因糖類遇強酸易碳化而影響測定結果。
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酸水解法測定脂肪操作方法- 酸水解法測定脂肪內(nèi)容摘要：酸水解法適用于各類食品中脂肪的測定，對固體、半固體、黏稠液體或液體食品，特別是加工后的混合食品，容易吸濕、結塊，不易烘干的食品，不能采用索氏提取法時，用此法效果較好。1．酸水解法原理強酸與樣品一同加熱進行水解，結合或包藏在組織里的脂肪可游離出來，然后用乙迷和石油醚提取脂肪，回收溶劑，除去溶劑后即為脂肪含量。2．儀器①100mL具塞刻度量筒。②烘箱。3．試劑①95％乙醇。②乙迷（不含過氧化物）。③石油醚（30~60℃沸程）。④濃鹽酸。4．測定步驟①樣品處理a．固體樣品：準確稱取約2．0g，置于50mL試管中，加8mL水，混勻后再加10mL濃鹽酸。b．液體樣品：準確稱取10.0g置于50mL試管中，加10mL，濃鹽酸。②水解：將試管放入70~80℃水浴中，每隔5～10min用玻璃棒攪拌一次，至樣品脂肪游離消化完全為止，時間約需40~50rain。水解過程中，如水分蒸發(fā)，應適當補加水，保持溶液總體積不變，以避免酸濃度升高。③提取：取出試管，加入10mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移人100mL具塞量筒中，用25mL乙迷分次洗試管，洗液一并倒人量筒中。加塞振搖1rain，小心開塞放出氣體，再塞好，靜置12min，小心開塞，用石油醚一乙迷等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10~20min，待上部液體澄清，吸出上清液于已恒重的燒瓶內(nèi)，再加5mL石油醚一乙迷等量混合液于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙迷吸出，放人原燒瓶內(nèi)。④回收溶劑、烘干、稱重：回收燒瓶內(nèi)乙迷后，將燒瓶于水浴上蒸干后，置100~105℃烘箱中干燥2h，取出放進干燥器內(nèi)，冷卻30min后稱重，反復干燥冷卻操作至恒重。5.說明①測定的樣品需充分磨細，液體樣品需充分混合均勻，以使消化完全。②水解后加的乙醇可使蛋白質(zhì)沉淀，促進脂肪球聚合，同時溶解一些碳水化合物、有機酸等。后面用乙迷提取，因乙醇可溶于乙迷，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物殘留在水層，并使分層清晰。③揮干溶劑后，殘留物中若有黑色焦油狀雜質(zhì)，是分解物與水一同混入所致，會使測定值增大，造成誤差，可用等量的乙迷及石油醚溶解后過濾，再次進行揮干溶劑的操作。④因磷脂在酸水解條件下分解為脂肪酸和堿，故本法不宜用于測定含有大量磷脂的食品如魚類、貝類和蛋品。此法也不適于含糖高的食品，因糖類遇強酸易碳化而影響測定結果。[詳細]
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