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大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
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2013-12-10 00:00 183閱讀次數(shù)
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大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
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大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
操作手冊(cè)
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人胰島素原(PI)ELISA試劑盒
- 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-18 00:00
操作手冊(cè)
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胰島素原(PI)ELISA試劑盒說明書
- 胰島素原(PI)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液胰島素原(PI)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。胰島素原(PI)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽胰島素原(PI)ELISA試劑盒儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照胰島素原(PI)ELISA試劑盒中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。胰島素原(PI)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlFT4大鼠游離甲狀腺素規(guī)格:48T/96TF-TESTO大鼠游離睪酮規(guī)格:48T/96Tf-βCG大鼠游離β絨毛膜促性腺激素規(guī)格:48T/96THp-IgG大鼠幽門螺旋菌IgG規(guī)格:48T/96TINHBP大鼠YZ素結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TINH-B大鼠YZ素B規(guī)格:48T/96TOSM大鼠抑瘤素M規(guī)格:48T/96TAChE大鼠乙酰膽堿酯酶規(guī)格:48T/96TAChRab大鼠乙酰膽堿受體抗體規(guī)格:48T/96TAch大鼠乙酰膽堿規(guī)格:48T/96TALDH大鼠乙醛脫氫酶規(guī)格:48T/96TADH大鼠乙醇脫氫酶規(guī)格:48T/96TGlp-1大鼠胰高血糖素樣肽1規(guī)格:48T/96TAmylin大鼠胰淀素規(guī)格:48T/96TICA大鼠胰島細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TIAA大鼠胰島素自身抗體規(guī)格:48T/96TPI大鼠胰島素原規(guī)格:48T/96TIGFBP-4大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4規(guī)格:48T/96TIGFBP-3大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3規(guī)格:48T/96TIGFBP-2大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2規(guī)格:48T/96TIGFBP-1大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1規(guī)格:48T/96T[詳細(xì)]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
- 小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 23:04
報(bào)價(jià)單
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大鼠胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Proinsulin單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Proinsulin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠Proinsulin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,Proinsulin濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Proinsulin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Proinsulin含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Proinsulin檢測(cè)濃度小于14pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠Proinsulin。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒說明書
- 人胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Proinsulin單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Proinsulin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Proinsulin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,Proinsulin濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Proinsulin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Proinsulin含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Proinsulin檢測(cè)濃度小于14pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人Proinsulin。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠胰島素(Insulin)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠胰島素(Insulin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Insulin單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Insulin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠Insulin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,Insulin濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Insulin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Insulin含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Insulin檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠Insulin。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:11
安裝說明
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大鼠胰島素受體(ISR-)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素受體(ISR-)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
安裝說明
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大鼠胰島素(Insulin)ELISA試劑盒操作方法
- 大鼠胰島素(Insulin)ELISA試劑盒操作方法使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Insulin)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠胰島素(Insulin)水平。用純化的大鼠胰島素(Insulin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Insulin),再與HRP標(biāo)記的胰島素(Insulin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(Insulin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠胰島素(Insulin)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(40mU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒
- 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
期刊論文
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大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
安裝說明
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大鼠胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。大鼠胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測(cè)大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的含量。【檢測(cè)原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被大鼠胰島素(INS)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠胰島素(INS)濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計(jì)算樣本中大鼠胰島素(INS)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標(biāo)包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說明書1份5特殊稀釋液6mL11封板膜2張6酶標(biāo)試劑6mL12密封袋1個(gè)備注:標(biāo)準(zhǔn)品(1號(hào)→6號(hào))濃度依次為:16、8、4、2、1、0.5mU/L。【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先2加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對(duì)照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。Z終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)?!緲颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马?xiàng)】1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.5-16mU/L,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(0.5-16mU/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。9、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。3【操作程序總結(jié)】準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計(jì)算【檢測(cè)范圍】0.5mU/L-16mU/L【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存?!居行凇?個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠胰島素受體(Insulin R)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠胰島素受體(InsulinR)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠InsulinR單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的InsulinR與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠InsulinR,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,InsulinR濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中InsulinR濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):50ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成100ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入100ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)InsulinR含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的InsulinR檢測(cè)濃度小于0.1ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠InsulinR。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠(Rat)胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒
- 檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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胰島素ELISA試劑盒
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4胰島素ELISA試劑盒(德國(guó)DRG:EIA2935)1、前言說明DRG公司的胰島素酶免試劑盒可用于人血清和血漿中(加入了肝素或檸檬酸的血漿)胰島素的定量檢測(cè)。此檢測(cè)試劑盒僅供體外診斷用。胰島素是調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的主要激素,它由朗格漢氏小島的β細(xì)胞合成分泌,并以前胰島素的前體形式存在,前胰島素可加工形成C肽和胰島素。這兩種激素都以等量形式分泌到門脈循環(huán)中。成熟的胰島素分子由兩條多肽鏈組成,A鏈和B鏈(分別21個(gè)和30個(gè)氨基酸)。這兩條鏈通過鍵內(nèi)二硫鍵而連接到一起。胰島素的分泌主要受血漿葡萄糖濃度的影響,這種激素有一系列重要的代謝功能。它的主要功能是通過葡萄糖的運(yùn)送來控制外周組織中葡萄糖的攝取和利用。胰島素和其它低血糖激素的作用(如YZ肝糖原的異生和糖原分解)可被高血糖激素(胰高血糖素,腎上腺素,生長(zhǎng)激素和皮質(zhì)醇)的作用中和掉。在胰島素依賴性的糖尿?。↖DDM)和其它疾病例如垂體機(jī)能減退疾病中,胰島素的濃度會(huì)明顯降低。在非胰島素依賴性的糖尿病患者、肥胖患者、胰島素瘤患者和一些內(nèi)分泌功能紊亂(如庫欣綜合癥和支端肥大癥)患者的體內(nèi),其胰島素的水平會(huì)上升。2、實(shí)驗(yàn)原理DRG公司的胰島素酶免實(shí)驗(yàn)是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA),反應(yīng)板上的微檢測(cè)孔包被有能結(jié)合胰島素分子上獨(dú)特抗原位點(diǎn)的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性胰島素的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進(jìn)行孵育,該酶聯(lián)物是一種生物素標(biāo)記的抗胰島素抗體。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。在第二次溫育時(shí),鏈親和素過氧酶復(fù)合物結(jié)合到生物素化抗胰島素抗體上,過氧酶復(fù)合物的結(jié)合量與樣品中胰島素的濃度成正比。加入底物液后,所顯示的顏色強(qiáng)度與病人樣品中胰島素的濃度成正比。3、試劑盒成分1)微孔板:12×8,96孔,包被抗胰島素的單克隆抗體。2)零標(biāo)準(zhǔn)品:1支,3ml,即用,0μIU/ml。3)標(biāo)準(zhǔn)品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。4)酶聯(lián)物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠單克隆抗體。5)酶復(fù)合物:1支,7ml,即用,辣根過氧化物-鏈親和素復(fù)合物。6)TMB底物液:1支14ml即用。7)終止液:1支14ml即用包含0.5M硫酸,請(qǐng)勿接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。8)洗滌液:1瓶,30ml,40倍濃縮,見試劑準(zhǔn)備。注意:用樣品稀釋的零標(biāo)準(zhǔn)品視需要而定。4、實(shí)驗(yàn)所需材料(但試劑盒不提供)1)酶標(biāo)儀2)標(biāo)準(zhǔn)移液器3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性所有的未開啟的試劑在2-8℃下儲(chǔ)存至保質(zhì)期,不要使用過期的試劑。所有開啟的試劑應(yīng)在2-8℃下儲(chǔ)存。一旦打開微孔板的包裝,需將其重新密封。6、樣品的準(zhǔn)備將所有的試劑和所需要的板條在使用前平衡至室溫。洗滌液:用1170ml的蒸餾水稀釋30ml濃縮的洗滌液,Z終得到的容積為1200ml,稀釋好的洗滌液在室溫下可穩(wěn)定存放兩個(gè)星期。7、樣品的收集此ELISA試劑盒可使用血清也可使用(只有肝素或檸檬酸鹽抗凝的血漿)血漿作為樣品。不能使用明顯溶血黃疸和脂血的樣品。血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下離心分離血清。血漿:將全血采集到含有抗凝劑的離心管,采集后立即離心分離。8、樣品的儲(chǔ)存:樣品蓋好蓋子后,可在實(shí)驗(yàn)前2-8℃下儲(chǔ)存5天,要更長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存,應(yīng)在-20℃下凍存。在開始實(shí)驗(yàn)前應(yīng)避免反復(fù)凍融樣品。9、樣品的稀釋:在**次實(shí)驗(yàn)中,要是樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品,則樣品應(yīng)用按實(shí)驗(yàn)步驟所描述的10倍或100倍稀釋。在計(jì)算濃度時(shí)需乘以此稀釋度。例子:a)按1:10稀釋:10μL的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)。b)按1:100釋?。?0μL按a)稀釋的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)10、實(shí)驗(yàn)步驟所有的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品都必須做雙份檢測(cè)以確保所有微孔的檢測(cè)條件都一樣。1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。。2)用一次性吸嘴將標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和樣品分別25μL加入相應(yīng)的檢測(cè)孔中。3)每孔加入25μL的酶聯(lián)物。4)充分混合10秒,在此步驟中充分混合非常重要。5)室溫下溫育30分鐘。6)快速棄去檢測(cè)孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。注意:洗板步驟是否正確操作會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度和極ng確度。7)每孔加入50μL的酶復(fù)合物。8)在室溫下溫育30分鐘。9)快速棄去檢測(cè)孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。10)每孔加入50μL的底物液。11)在室溫下溫育15分鐘。12)每孔加入50μL的終止液終止反應(yīng)。13)在加終止液后10分鐘內(nèi)于450±10nm處讀取OD值。11、計(jì)算結(jié)果:1)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和病人樣品的平均吸光度。2)以吸光率為Y軸,濃度為X軸,按照從標(biāo)準(zhǔn)品中獲得的平均吸光率和其相對(duì)應(yīng)的濃度值,繪制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。3)利用樣品的平均吸光率,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上得出其相應(yīng)的濃度值,4)自動(dòng)方法:使用計(jì)算機(jī)三次方模式四參數(shù)模式或雙對(duì)數(shù)函數(shù)的計(jì)算機(jī)程序可得到結(jié)果。5)樣品的濃度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的濃度則需進(jìn)一步稀釋。在計(jì)算濃度的時(shí)候,要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。下面是胰島素ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線的典型例子。標(biāo)準(zhǔn)品吸光率(450nm)零標(biāo)準(zhǔn)品(0μIU/ml)0.03標(biāo)準(zhǔn)品1(6.25μIU/ml)0.07標(biāo)準(zhǔn)品2(12.5μIU/ml)0.14標(biāo)準(zhǔn)品3(25μIU/ml)0.35標(biāo)準(zhǔn)品4(50μIU/ml)0.88標(biāo)準(zhǔn)品5(100μIU/ml)2.05參考值:建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的正常值與非正常值。在一明顯正常成年人的研究中,用DRG公司的胰島素ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)得到如下數(shù)值:2-25μIU/ml本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費(fèi)電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細(xì)]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子(ELISA)試劑盒使用說明書
- 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子(ELISA)試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2015-06-04 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子-2(IGF-2)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子-2(IGF-2)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠IGF-2單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IGF-2與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠IGF-2,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,IGF-2濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IGF-2濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1:20稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成4000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入4000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品400、200、100、50、25、12.5、6.25、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IGF-2含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IGF-2檢測(cè)濃度小于3ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠IGF-2。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠IGF-1單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IGF-1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠IGF-1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,IGF-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IGF-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):500ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成1000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入1000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IGF-1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IGF-1檢測(cè)濃度小于1ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠IGF-1。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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