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石蠟切片組織馮庫薩染色試劑盒產(chǎn)品說明書
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本文由 上海科學(xué)儀器有限公司 整理匯編
2018-11-18 10:00 973閱讀次數(shù)
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主要用途石蠟切片組織馮庫薩(VONKOSSA)染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)分離石蠟方法和銀還原技術(shù),分析存檔中的石蠟包埋的組織切片中鈣沉積現(xiàn)象的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良VONKOSSA方法、成功實驗證明的。主要適用于石蠟包埋組織切片的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。技術(shù)背景鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過嗜銀染色,鈣離子受到強(qiáng)光還原,由金屬銀沉積取代,呈現(xiàn)黑色。
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石蠟切片組織馮庫薩染色試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途石蠟切片組織馮庫薩(VONKOSSA)染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)分離石蠟方法和銀還原技術(shù),分析存檔中的石蠟包埋的組織切片中鈣沉積現(xiàn)象的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良VONKOSSA方法、成功實驗證明的。主要適用于石蠟包埋組織切片的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。技術(shù)背景鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過嗜銀染色,鈣離子受到強(qiáng)光還原,由金屬銀沉積取代,呈現(xiàn)黑色。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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石蠟切片組織馮庫薩染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 石蠟切片組織馮庫薩染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-04-29 00:00
實驗操作
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姬姆薩染液用于石蠟切片染色問題
- 姬姆薩染液用于石蠟切片染色問題[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:22
產(chǎn)品樣冊
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石蠟切片膠原纖維天狼猩紅(SIRIUS RED)染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 石蠟切片膠原纖維天狼猩紅(SIRIUS RED)染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-20 00:00
期刊論文
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冰凍切片組織堿性磷酸酶活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途冰凍切片組織堿性磷酸酶活性染色試劑是一種旨在使用偶聯(lián)偶氮技術(shù),在底物存在的情況下,分析組織樣本中堿性磷酸酶表達(dá),而呈現(xiàn)亮紅色沉淀現(xiàn)象的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實驗證明的。主要適用于動物組織冰凍切片,同時也適合原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的酶活性檢測。尤其可用于骨組織病理生理的研究和干細(xì)胞分化能力的鑒定。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,靈敏牢固,顯色清晰。技術(shù)背景堿性磷酸酶(ALKALINEPHOSPHATASE)在堿性環(huán)境下催化各種醇和酚的磷酸酯水解,存在于活躍運(yùn)輸?shù)哪ど?,如毛?xì)血管及毛細(xì)血管的動脈部分的內(nèi)皮,腎近曲小管壁邊緣和小腸上皮的紋狀緣,胎盤組織,未分化的干細(xì)胞等表達(dá)含量Z為豐富。它與骨質(zhì)的形成,維持細(xì)胞內(nèi)磷酸酶的濃度,以及與經(jīng)膜吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)過程有關(guān)。偶聯(lián)偶氮技術(shù)的基本原理為堿性磷酸酶水解底物(磷酸萘酯)釋放出萘酚,立即為重氮鹽所捕獲而成為不溶性有色的偶氮染料。實驗Z初(1944)應(yīng)用β-萘磷酸鹽作為底物,釋放出的萘酚與重氮α-萘胺偶聯(lián),在酶的活動處形成有色沉淀。Burstone(1962)推薦使用替代萘酚,如萘酚AS-MX磷酸鹽。重氮鹽有很多種,但較適宜的有FastblueRR,F(xiàn)astredTR,F(xiàn)astvioletB,F(xiàn)astblueVRT和FastblackB。偶聯(lián)偶氮技術(shù)孵育時間短;穩(wěn)定,靈敏;在正常組織中因無萘酚,故不需要對照;反應(yīng)產(chǎn)物為偶氮染料難以溶解,不易彌散因而圖象清晰。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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姬姆薩染色液使用說明書
- 姬姆薩染色液使用說明書[詳細(xì)]
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2013-08-09 00:00
安裝說明
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全組織神經(jīng)元高爾基法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 全組織神經(jīng)元高爾基法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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石蠟切片摩羅利(MALLORY)鐵(三價)染色試劑盒
- 主要用途石蠟切片摩羅利(MALLORY)鐵(三價)染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)分離石蠟方法和氰亞鐵酸鹽結(jié)合反應(yīng)技術(shù),分析存檔中的石蠟包埋的組織切片中三價正鐵離子(ferricion)沉積現(xiàn)象的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良MALLORY方法、成功實驗證明的。主要適用于石蠟包埋組織切片的三價正鐵離子檢測。廣泛用于血液細(xì)胞或組織病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。技術(shù)背景三價鐵(ferric)是氧化數(shù)為三的鐵。通過無機(jī)礦物酸(mineralacid)水解,三價鐵從蛋白結(jié)合形態(tài)中釋放出來。三價鐵具有難溶性的特點(diǎn)。通常三價鐵先被還原使之與有機(jī)配位體分離,分離出來的二價鐵被生物體吸收。動物和人體的整個消化道都可以吸收,植物在根尖處吸收。機(jī)體大約有三分之二的鐵存在于紅細(xì)胞的血紅蛋白和肌肉的肌紅蛋白中,20%的鐵以不同形式存在于肝、脾和其他組織中。鐵作為氧的載體,保證組織內(nèi)氧的正常輸送,在細(xì)胞生物氧化和能量代謝過程中發(fā)揮著重要作用。正常脾組織和里含有少量的三價鐵。組織中過量存在三價鐵,可能與血色?。╤emochromatosis)和含鐵血黃素沉著癥(hemosiderosis)有關(guān)。使用摩羅利(MALLORY)對于皮爾斯(PERLS)方法的修正,通過酸性氰亞鐵酸鹽(ferrocyanide)與組織中三價正鐵離子(ferricion)結(jié)合,成為亞鐵氰化鐵(ferricferrocyanide),而呈現(xiàn)亮藍(lán)素,又稱為普魯士藍(lán)(prussianblue)。其反應(yīng)原理如下:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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全組織神經(jīng)元高爾基法染色試劑盒
- 主要用途全組織神經(jīng)元高爾基法染色試劑是一種旨在使用親銀還原技術(shù),分析新鮮組織塊里神經(jīng)元(neuron)、錐體細(xì)胞(pyramidalcell)、膠質(zhì)細(xì)胞(gliacell)、少突觸膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte)和其它突起(process)尤其樹突(dendrites)形態(tài)學(xué)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實驗證明的。主要適用于各種新鮮或冰凍腦組織的相關(guān)神經(jīng)細(xì)胞檢測。廣泛用于動物腦神經(jīng)病理生理解剖學(xué)的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。技術(shù)背景意大利科學(xué)家高爾基(CamilloGolgi)于1873年發(fā)明了神經(jīng)細(xì)胞黑色反應(yīng)的浸銀染色技術(shù),從而開辟了神經(jīng)系統(tǒng)形態(tài)結(jié)構(gòu)、演變、單系發(fā)生、構(gòu)建以及疾病等學(xué)科研究,并建立了神經(jīng)學(xué)說。腦神經(jīng)組織經(jīng)固定,親銀染色后,呈現(xiàn)部分神經(jīng)細(xì)胞完全染色,而其它神經(jīng)細(xì)胞沒有任何著色的高度選擇性染色。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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免疫組化染色試劑盒說明書
- 免疫組化染色試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2014-06-23 00:00
課件
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細(xì)胞骨架綠色熒光染色試劑盒 產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞骨架綠色熒光染色試劑盒 產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2014-12-30 00:00
報價單
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DAB染色試劑盒使用說明書
- DAB染色試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2015-04-21 00:00
其它
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組織蛋白酶K試劑盒說明書
- 組織蛋白酶KCathepsinK試劑盒背景介紹:定量測定人血清或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中由破骨細(xì)胞分泌出的組織蛋白酶K。組織蛋白酶K降解骨膠原基質(zhì),是Z豐富的活化和吸收破骨細(xì)胞的合成蛋白,也是Z具吸收活性的特異性標(biāo)志物。蛋白酶K在組織溶解、重建和骨膠原降解中具有重要作用。組織蛋白酶K在不同物種間的高同源性(小鼠86%,大鼠88%,豬97%,兔96%),因此試劑盒也能用于動物模型的研究。臨床應(yīng)用:骨轉(zhuǎn)換研究惡性骨疾病應(yīng)用于腫瘤學(xué)監(jiān)測骨吸收藥物的LX預(yù)防糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松預(yù)防原發(fā)性和繼發(fā)性骨質(zhì)疏松監(jiān)測作用于骨骼多個區(qū)域的炎癥疾病監(jiān)控ZL如激素替代ZL,雙膦酸鹽ZL監(jiān)測風(fēng)濕性骨關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎的ZLLX蛋白酶k與骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變關(guān)系密切,特別在早期發(fā)病中有重要作用參考文獻(xiàn):“CathepsinK,osteoclasticresorption,andosteoporosistherapy”.ZaidiM.etal.;JBoneMinerRes2001Oct;16(10):1747-9“NewinsightsintotheregulationofcathepsinKgeneexpressionbyosteoprotegerinligand”CorisdeoS.etal.;BiochemBiophysResCommun2001Jul13;285(2):335-9“Linkingosteopetrosisandpycnodysostosis:regulationofcathepsinKexpressionbythemicrophthalmiatranscriptionfactorfamily”MotyckovaG.etal.;ProcNatlAcadSciUSA2001May;98(10):5798-803[詳細(xì)]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
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藍(lán)色熒光細(xì)胞核染色分析試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途藍(lán)色熒光細(xì)胞核染色分析試劑是一種旨在通過使用熒光染料DAPI與細(xì)胞核DNA特異性結(jié)合,并發(fā)出熒光檢測信號,用于分析和觀察細(xì)胞核形態(tài)或DNA含量以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細(xì)胞核(動物、人體、植物、昆蟲等)的觀察。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景作為細(xì)胞DNA染色劑之一的4,6-二咪基-4-聯(lián)苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole;DAPI)特異性地與DNA雙螺旋的凹槽部分發(fā)生相互作用,從而與DNA的雙鏈緊密結(jié)合。結(jié)合后產(chǎn)生的熒光基團(tuán)的吸收峰是358nm而散射峰是461nm,正好是UV(紫外光)的激發(fā)波長356nm,使得DAPI成為一種常用的熒光檢測信號,并作為雙重染色或重疊染色的主要染色劑之一。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升固定液(ReagentB)毫升擴(kuò)張液(ReagentC)毫升染色液(ReagentD)毫升抗淬滅劑(ReagentE)毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存固定液(ReagentB)、染色液(ReagentD)和抗淬滅劑(ReagentE)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;染色液(ReagentD)和抗淬滅劑(ReagentE)避免光照;有效保證6月用戶自備微型臺式離心機(jī):用于懸浮細(xì)胞的操作蓋玻片:用于染色后封片熒光顯微鏡:用于觀察細(xì)胞核DNA染色[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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高爾基體染色試劑盒說明書PK401A PK401
- FDRapidGolgiStainKit(small)fdneurotech是世界的染色試劑盒供應(yīng)商,其提供的高爾基體染色試劑盒以其高品質(zhì)的結(jié)果于科研界,光2012年列出來的引用文獻(xiàn)就多達(dá)70篇,2011年更是100多篇,fdneurotech從2012年開始就和上海起福生物科技公司簽訂長期合作協(xié)議為ZG科研人員帶來**的產(chǎn)品,并在ZG設(shè)有庫存,歡迎廣大科研工作者和我們公司聯(lián)系上海起發(fā)實驗試劑有限公司上海市浦東繡川路561號1102室4006551678傳真:021-50724961WWW.QFBIO.COMPK401AFDRapidGolgiStainKit125mlFDNEUROTECHNOLOGIES6200PK401FDRapidGolgiStainKit250mlFDNEURO9800Golgi-Coximpregnation1,2hasbeenoneofthemosteffectivetechniquesforstudyingboththenormalandabnormalmorphologyofneuronsaswellasglia.UsingtheGolgitechnique,subtlemorphologicalalterationsinneuronaldendritesanddendriticspineshavebeendiscoveredinthebrainsofanimalstreatedwithdrugsaswellasinthepostmortembrainsofpatientswithneurologicaldiseases3,4.However,theunreliabilityandthetime-consumingprocessofGolgistaininghavebeenmajorobstaclestothewidespreadapplicationofthistechniqueFDRapidGolgiStainKitisdesignedbasedontheprincipleofthemethodsdescribedbyRamón-Moliner2,GlaserandVanderLoos5.ThiskithasnotonlydramaticallyimprovedandsimplifiedtheGolgi-Coxtechniquebuthasalsoproventobeextremelyreliableandsensitivefordemonstratingmorphologicaldetailsofneuronsandglia,especiallydendriticspines.TheFDRapidGolgiStainKithasbeentestedextensivelyandwidelyusedonthebrainsfromseveralspeciesofanimalsaswellasonthespecimensofpostmortemhumanbrains.Kitcontents:StoreatroomtemperatureSolutionA125mlSolutionB125mlSolutionC125mlx2SolutionD125mlSolutionE125mlGlassSpecimenRetriever2Naturalhairpaintbrush3Droppingbottle1UserManual1Materialsrequiredbutnotincluded:Doubledistilledordeionizedwater.Plasticorglasstubesorvials.Histologicalsuppliesandequipment,includinggelatin-coatedmicroscopeslides,coverslips,stainingjars,ethanol,xyleneorxylenesubstitutes,resinousmountingmedium(e.g.Permount),andalightmicroscope.References:CorsiP.(1987)CamilloGolgi’smorphologicalapproachtoneuroanatomy.InMaslandRL,Portera-SanchezAandToffanoG(eds.),Neuroplasticity:anewtherapeutictoolintheCNSpathology,pp1-7.Berlin:Springer.Ramón-MolinerE.(1970)TheGolgi-Coxtechnique.InNautaWJHandEbbessonSOE(eds.),ContemporaryMethodsinNeuroanatomy.pp32-55,NewYork:Springer.GravelandGA,WilliamsRS,andDiFigliaM.(1985)EvidencefordegenerativeandregenerativechangesinneostriatalspinyneuronsinHuntington’sdisease.Science.227:770-3.RobinsonTE,andKolbB.(1997)Persistentstructuralmodificationinnucleusaccumbensandprefrontalcortexneuronsproducedbypreviousexperiencewithamphetamine.J.Neurosci.17:8491-7.GlaserME,andVanderLoosH.(1981)Analysisofthickbrainsectionsbyobverse-reversecomputermicroscopy:applicationofanew,highclarityGolgi-Nisslstain.J.Neurosci.Meth.4:117-25.[詳細(xì)]
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2018-09-29 10:03
產(chǎn)品樣冊
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骨磨片甲苯胺藍(lán)染色試劑盒說明書
- 主要用途骨磨片(groundsection)甲苯胺藍(lán)(toluidineblue)染色試劑是一種旨在通過甲苯胺藍(lán)染料的使用,觀察分析由成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞產(chǎn)生的的各種骨組織形成狀態(tài)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。廣泛應(yīng)用于各種不脫鈣骨組織、類骨質(zhì)和軟骨組織的染色分析。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,顯色清晰。技術(shù)背景甲苯胺藍(lán)(toluidineblue)是一種異染性(metachromatic)染料,其分子式是C15H16ClN3S,分子量為305.83。常用于骨組織淺表染色,觀察成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞產(chǎn)生的的骨粘合線(cementline)、反折線(reversalline)、長線(dermacationline)、類骨質(zhì)(osteoid)、鈣質(zhì)化新骨(mineralized)等骨組織變化,以評價各種骨整合(osseointegration)、新骨形成、材料再吸收(materialsresorption)、骨組織重塑(remode領(lǐng))和骨組織計量測定(histomorphometrics)等。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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石蠟切片神經(jīng)纖維波蒂安(Bodian)銀染試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 石蠟切片神經(jīng)纖維波蒂安(Bodian)銀染試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-19 00:00
產(chǎn)品樣冊
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藍(lán)色熒光細(xì)胞核染色分析試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 藍(lán)色熒光細(xì)胞核染色分析試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-17 00:00
期刊論文
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細(xì)胞β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細(xì)胞β-半乳糖苷酶原位染色試劑是一種旨在以X-Gal為底物,通過細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的外源性細(xì)菌β-半乳糖苷酶的催化所生成的深藍(lán)色的沉積產(chǎn)物,從而在光學(xué)顯微鏡下觀察到藍(lán)色表達(dá)的細(xì)胞,藉此建立一種簡單的目測顏色來識別報告基因陽性細(xì)胞的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。廣泛應(yīng)用于基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和其它分子生物學(xué)研究。其適用于轉(zhuǎn)基因后的人體和動物細(xì)胞。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,參數(shù)優(yōu)化,著色敏感,堪稱國際上同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景大腸桿菌的標(biāo)志基因LacZ編碼β-半乳糖苷酶(?-galactosidase;?-gal),在其催化作用下,半乳糖可從乳糖的水解作用中得到。β-半乳糖苷酶非常穩(wěn)定,對蛋白水解降解作用抗性強(qiáng),且容易測試。因此β-半乳糖苷酶成為目前Z常用的報告基因,以評價載體轉(zhuǎn)染的效果。X-Gal(5-bromo-4-chloro-3-indoyl-?-D-Galactopyranoside)是生物化學(xué)中常用的一種有機(jī)物,β-半乳糖苷酶可以將X-Gal轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物,由此用它作為生色底物,來建立一種簡單的目測顏色來確定細(xì)胞β-半乳糖苷酶的活性,從而通過光學(xué)顯微鏡鑒別轉(zhuǎn)染細(xì)胞報告基因的存在與否和強(qiáng)弱表現(xiàn)。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書
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動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,可以被用于線粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細(xì)胞器;第三,通過高速差速離心獲得線粒體;甚至,第四,可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升凈化液(ReagentC)毫升強(qiáng)化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升活性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液(ReagentC)和活性液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液(12028)或PBS緩沖溶液(12033):用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液(12052):用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管:用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管:用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管:用于保存線粒體4℃臺式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī):用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器:用于裂解細(xì)胞實驗步驟一、動物軟組織線粒體分離(組織勻漿法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和4毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實驗前**使動物空腹12至24小時)2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.即刻用刀片切碎組織5.放進(jìn)一個預(yù)冷的15毫升錐形離心管6.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7.渦旋震蕩5秒,充分混勻8.即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化組織(約80下)(注意:參見注意事項8)9.將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管,10.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g11.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g13.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)15.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g16.(選擇步驟)小心抽去上清液17.加xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻18.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里二、動物軟組織線粒體分離(化學(xué)處理法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實驗前**使動物空腹12至24小時)2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.移入一個液氮凍存管5.即刻放進(jìn)液氮罐過夜6.次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)碾碎組織(注意:切莫使組織凍融)7.放進(jìn)一個15毫升錐形離心管8.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9.渦旋震蕩5秒,充分混勻10.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)12.渦旋震蕩5秒,充分混勻13.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見注意事項9)14.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻15.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g16.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g18.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)20.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g21.(選擇步驟)小心抽去上清液22.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻23.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里三、動物細(xì)胞線粒體分離(細(xì)胞勻漿法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面,3.小心抽去清洗液4.重復(fù)實驗步驟2至3一次5.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養(yǎng)平面6.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7.手擊震動培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落8.分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9.全部移入到一個50毫升錐形離心管10.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g11.小心抽去上清液12.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞13.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g14.小心抽去上清液15.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16.渦旋震蕩5秒,充分混勻細(xì)胞顆粒群17.即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞(約80下)(注意:參見注意事項8)18.將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g20.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g22.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)24.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g25.(選擇步驟)小心抽去上清液26.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻27.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里四、動物細(xì)胞線粒體分離(化學(xué)處理法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面28.小心抽去清洗液3.重復(fù)實驗步驟2至3一次4.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養(yǎng)平面5.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6.手擊震動培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落7.分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8.全部移入到一個50毫升錐形離心管9.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g10.小心抽去上清液11.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)12.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g13.小心抽去上清液14.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15.渦旋震蕩5秒,充分混勻16.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)18.渦旋震蕩5秒,充分混勻19.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見注意事項9)20.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻21.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g22.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g24.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)26.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g27.(選擇步驟)小心抽去上清液28.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻29.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里注意事項1.本產(chǎn)品為10次(1克動物組織或5X107細(xì)胞)或50次(200毫克動物組織或1X107細(xì)胞)操作2.實際操作的動物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整:例如200毫克動物組織:試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3.所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進(jìn)行4.操作時,須戴手套5.操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)6.建議使用足夠的樣品量7.建議嚴(yán)格控制操作時間8.通常勻化次數(shù)為80下達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)9.通常孵育5分鐘達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)10.對于難以裂解的細(xì)胞,例如HeLa細(xì)胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11.通常5X107細(xì)胞或1克動物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12.如果需要計量線粒體,稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成,否則線粒體將分解13.本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線粒體純化程度,但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14.如果需要獲得99%以上純度的線粒體,使用動物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒-10006.315.線粒體正常活性測定方法是:CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16.線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是:CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17.本公司提供線粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18.本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長期穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?;钚?.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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