全部評(píng)論(1條)
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- sijie199396 2017-01-30 00:00:00
- 如果你做的是非?？孔V的定量RT-PCR，可以根據(jù)標(biāo)曲算。 但實(shí)際上對(duì)包括RT-PCR在內(nèi)的PCR產(chǎn)物濃度定量，更簡(jiǎn)單、更靠譜的辦法是: 1，加標(biāo)準(zhǔn)marker電泳，用照膠自動(dòng)分析系統(tǒng)計(jì)算，可以大致定量，得其質(zhì)量濃度; 2，更準(zhǔn)的是，回收PCR產(chǎn)物，用紫外分光光度計(jì)準(zhǔn)確測(cè)定其質(zhì)量濃度。 “先算出模板鏈的質(zhì)量然后用2的N-1次方算出擴(kuò)增后DNA的數(shù)量相乘”，這是有誤區(qū)的，實(shí)際的PCR反應(yīng)不是理想的指數(shù)擴(kuò)增過程，尤其是循環(huán)到了一定次數(shù)后。何況，還要考慮特異性的問題。 如有疑問，歡迎繼續(xù)討論，純屬手打，歡迎采納，祝愉快!
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- 我改進(jìn)了一下酚氯仿法提取得到了豬糞便的DNA，吸光度比值在1.8左右，濃度也達(dá)到幾百，這些條件已經(jīng)滿足了PCR的要求，但是一直就是擴(kuò)增不出東西（引物應(yīng)該沒問題）！我就覺得應(yīng)該是糞便中YZPCR的成分沒有去除干凈，進(jìn)行了YZ反應(yīng)驗(yàn)證，證實(shí)確實(shí)是YZ物的作... 我改進(jìn)了一下酚氯仿法提取得到了豬糞便的DNA，吸光度比值在1.8左右，濃度也達(dá)到幾百，這些條件已經(jīng)滿足了PCR的要求，但是一直就是擴(kuò)增不出東西（引物應(yīng)該沒問題）！我就覺得應(yīng)該是糞便中YZPCR的成分沒有去除干凈，進(jìn)行了YZ反應(yīng)驗(yàn)證，證實(shí)確實(shí)是YZ物的作用，所以請(qǐng)問大家糞便中有哪些YZPCR的成分？？？？怎樣才能完全去除糞便中YZPCR的成分？？？ 展開
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