小片段DNA（100-200bp）的PCR擴增
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PCR模板是100bp-200bp的片段，用SSR引物擴增的時候，出現(xiàn)的不是單一的目的帶，目的帶出現(xiàn)的同時還有許多非特異性擴增條帶，有時候就是條帶擴不出來，對于小片段模板的擴增，怎樣能擴出單一條帶？請教！
全部評論(2條)
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- yangshao327 2009-07-04 00:00:00
- 出現(xiàn)非特異帶很正常，主要是引物的特異性不好。提高退火溫度，72度20秒就足夠了。如果還是有非物異帶的話就只能換引物位點了
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- 小啦啦gg 2009-07-03 00:00:00
- 這個，出現(xiàn)非特異性擴增估計跟模板，引物，以至于反應(yīng)條件都有關(guān)系。 可以減少延伸時間，因為你擴的片段很小，沒有必要花很長時間延伸。 我P SSR的程序是94度 35s 55度 35s 72度 45s 前面的預(yù)變性和Z后的延伸時間都可以隨便定，沒有嚴格要求。 如果還不行的話，你可以把模板或者引物換一換，看看有沒有效果。
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