提取植物基因組DNA，DNA是綠色的
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我用的是CTAB法提取植物基因組DNA，方法如下：1.稱取材料0.2g，加入適量PVP，500μl冰冷CTAB，20μl冰冷RNA酶研磨；2.研磨后加入500μl加熱的CTAB，裝入1.5ml離心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因組DNA，方法如下： 1.稱取材料0.2g，加入適量PVP，500μl冰冷CTAB，20μl冰冷RNA酶研磨； 2.研磨后加入500μl加熱的CTAB，裝入1.5ml離心管中； 3.充分混勻后，65℃水浴1h，期間不時(shí)輕緩震蕩； 4.12000rpm離心10min，取750μl上清液至另一離心管中； 5.加入等體積的Tris飽和酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），搖勻后12000rpm、離心10min； 6.取上層清液650μl，加入等體積氯仿·異戊醇（24:1），搖勻后12000rpm離心10min； 7.取550μl上清液至另一離心管中，加入等體積異丙醇； 10.-20℃放置1h或室溫下過(guò)夜； 11.12000rpm離心10min，倒棄上清液；70%冰冷乙醇洗滌沉淀2次； 12.倒棄上清液，風(fēng)干沉淀； 14.加100μlTE溶解DNA，-20℃保存?zhèn)溆谩? 可是不知道為什么Z后異丙醇沉淀出來(lái)的DNA居然是深綠色的，已經(jīng)接近黑色了。有的時(shí)候同樣的步驟做出來(lái)的又是白色或者黃色的，這到底是怎么回事??！希望知道的人給我個(gè)提示！ 會(huì)不會(huì)是因?yàn)楹吐确?異戊醇反應(yīng)的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)？因?yàn)槲野l(fā)現(xiàn)我剩下的那些材料過(guò)一段時(shí)間后都變得很綠。 展開
全部評(píng)論(4條)
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- 要書翠 2010-06-21 00:00:00
- 上清液是什么顏色的？還有提取的是什么植物的什么組織？ 一般是抽提的問題，與氯仿-異戊醇反應(yīng)的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的可能性極小
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- 楊成功3 2010-06-21 00:00:00
- DNA純凈下不是黃色或白色的嗎？
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- 背鄉(xiāng)棄愛 2010-06-21 00:00:00
- 我覺得問題應(yīng)該出在4-6步中。綠色說(shuō)明色素（具體不知道哦）沒有充分的分解，除去。
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- R_Azarias 2010-06-21 00:00:00
- 葉子嗎？ 1 可能是葉綠素吧，用70%的酒精多洗幾遍； 2 可能是氧化產(chǎn)物，磨樣時(shí)要快，要加購(gòu)PVP.
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