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植物基因組DNA一般取植物的哪個(gè)部分提取Z好,是根

夢(mèng)想老鳥 2018-04-24 08:55:13 555  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • jmbmbmbmbm 2018-04-25 00:00:00
    一般是根,例如水稻和擬南芥,都是研磨提取根部的DNA,可以在-80攝氏度下保存較長(zhǎng)時(shí)間。根部提取DNA可以減少本身RNA的污染。

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    評(píng)論

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植物基因組DNA一般取植物的哪個(gè)部分提取Z好,是根
 
2018-04-24 08:55:13 555 1
提取植物基因組DNA,DNA是綠色的
我用的是CTAB法提取植物基因組DNA,方法如下:1.稱取材料0.2g,加入適量PVP,500μl冰冷CTAB,20μl冰冷RNA酶研磨;2.研磨后加入500μl加熱的CTAB,裝入1.5ml離心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因組DNA,方法如下: 1.稱取材料0.2g,加入適量PVP,500μl冰冷CTAB,20μl冰冷RNA酶研磨; 2.研磨后加入500μl加熱的CTAB,裝入1.5ml離心管中; 3.充分混勻后,65℃水浴1h,期間不時(shí)輕緩震蕩; 4.12000rpm離心10min,取750μl上清液至另一離心管中; 5.加入等體積的Tris飽和酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),搖勻后12000rpm、離心10min; 6.取上層清液650μl,加入等體積氯仿·異戊醇(24:1),搖勻后12000rpm離心10min; 7.取550μl上清液至另一離心管中,加入等體積異丙醇; 10.-20℃放置1h或室溫下過夜; 11.12000rpm離心10min,倒棄上清液;70%冰冷乙醇洗滌沉淀2次; 12.倒棄上清液,風(fēng)干沉淀; 14.加100μlTE溶解DNA,-20℃保存?zhèn)溆谩? 可是不知道為什么Z后異丙醇沉淀出來(lái)的DNA居然是深綠色的,已經(jīng)接近黑色了。有的時(shí)候同樣的步驟做出來(lái)的又是白色或者黃色的,這到底是怎么回事?。∠M赖娜私o我個(gè)提示! 會(huì)不會(huì)是因?yàn)楹吐确?異戊醇反應(yīng)的時(shí)間過長(zhǎng)?因?yàn)槲野l(fā)現(xiàn)我剩下的那些材料過一段時(shí)間后都變得很綠。 展開
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我是做細(xì)菌研究的,有個(gè)課題需要用到植物的DNA。可是提取出的DNA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA,而且液體的顏色很深。洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的... 我是做細(xì)菌研究的,有個(gè)課題需要用到植物的DNA。 可是提取出的DNA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA,而且液體的顏色很深。 洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的。請(qǐng)問是不是研磨不充分還是其他的什么原因? 還有研磨的時(shí)候必須用液氮么?可以用-70C下保存的新鮮葉片直接研磨么? 展開
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