全部評(píng)論(2條)
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- heitiansh1 2018-07-25 00:00:00
- Z好是4度,沒(méi)有低溫冷凍離心機(jī)也沒(méi)關(guān)系,普通離心機(jī)室溫下也可以,少許的降解對(duì)一般實(shí)驗(yàn)的影響并不大。DNA純化過(guò)程中確實(shí)有一些小的細(xì)節(jié),對(duì)DNA的得率和純度影響比較大,如清洗的時(shí)候一定要溫和,清洗后溶解的時(shí)間也要合適等等。
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- zky914 2018-07-25 00:00:00
- 降解無(wú)怪乎幾種原因: 1,加入提取液后,若是65度提取,時(shí)間太久,有可能造成部分降解。 2,降入氯仿/異戊醇后,劇烈混勻時(shí)間太久,造成部分DNA斷裂 3,打碎組織時(shí)Z好用液氮處理后研磨的方式,用珠子打碎在后期混勻過(guò)程中也容易造成DNA斷裂
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熱門問(wèn)答
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2018-07-24 01:17:18
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2011-03-08 22:14:06
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- 我是做細(xì)菌研究的,有個(gè)課題需要用到植物的DNA??墒翘崛〕龅腄NA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒(méi)有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA,而且液體的顏色很深。洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的... 我是做細(xì)菌研究的,有個(gè)課題需要用到植物的DNA。 可是提取出的DNA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒(méi)有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA,而且液體的顏色很深。 洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的。請(qǐng)問(wèn)是不是研磨不充分還是其他的什么原因? 還有研磨的時(shí)候必須用液氮么?可以用-70C下保存的新鮮葉片直接研磨么? 展開(kāi)
2010-08-23 09:15:01
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- 提取植物基因組DNA,DNA是綠色的
- 我用的是CTAB法提取植物基因組DNA,方法如下:1.稱取材料0.2g,加入適量PVP,500μl冰冷CTAB,20μl冰冷RNA酶研磨;2.研磨后加入500μl加熱的CTAB,裝入1.5ml離心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因組DNA,方法如下: 1.稱取材料0.2g,加入適量PVP,500μl冰冷CTAB,20μl冰冷RNA酶研磨; 2.研磨后加入500μl加熱的CTAB,裝入1.5ml離心管中; 3.充分混勻后,65℃水浴1h,期間不時(shí)輕緩震蕩; 4.12000rpm離心10min,取750μl上清液至另一離心管中; 5.加入等體積的Tris飽和酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),搖勻后12000rpm、離心10min; 6.取上層清液650μl,加入等體積氯仿·異戊醇(24:1),搖勻后12000rpm離心10min; 7.取550μl上清液至另一離心管中,加入等體積異丙醇; 10.-20℃放置1h或室溫下過(guò)夜; 11.12000rpm離心10min,倒棄上清液;70%冰冷乙醇洗滌沉淀2次; 12.倒棄上清液,風(fēng)干沉淀; 14.加100μlTE溶解DNA,-20℃保存?zhèn)溆谩? 可是不知道為什么Z后異丙醇沉淀出來(lái)的DNA居然是深綠色的,已經(jīng)接近黑色了。有的時(shí)候同樣的步驟做出來(lái)的又是白色或者黃色的,這到底是怎么回事??!希望知道的人給我個(gè)提示! 會(huì)不會(huì)是因?yàn)楹吐确?異戊醇反應(yīng)的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)?因?yàn)槲野l(fā)現(xiàn)我剩下的那些材料過(guò)一段時(shí)間后都變得很綠。 展開(kāi)
2010-06-20 00:43:24
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