電鉆提取植物DNA的具體步驟能告訴我嗎?
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我用與1.5離心管配套的塑料、玻璃鉆頭磨新鮮葉片(也試了麻花鉆頭),還加了石英砂,都磨不碎葉片,葉會(huì)漂在上層。轉(zhuǎn)了很久,提取液才出現(xiàn)一些淡綠色,沒(méi)有出現(xiàn)文獻(xiàn)上說(shuō)的勻漿狀……應(yīng)... 我用與1.5離心管配套的塑料、玻璃鉆頭磨新鮮葉片(也試了麻花鉆頭),還加了石英砂,都磨不碎葉片,葉會(huì)漂在上層。轉(zhuǎn)了很久,提取液才出現(xiàn)一些淡綠色,沒(méi)有出現(xiàn)文獻(xiàn)上說(shuō)的勻漿狀……應(yīng)該怎么弄? 展開
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- 焰影目 2012-12-05 00:00:00
- 確實(shí)會(huì)比較困難,先少加點(diǎn)提取液,幾十ul就可以,葉片越嫩就會(huì)越好磨一些。其實(shí)只要做pcr的話也不用達(dá)到文獻(xiàn)上說(shuō)的勻漿狀態(tài),有部分細(xì)胞破碎差不多就可以了。這種方法看起來(lái)簡(jiǎn)單,實(shí)際上沒(méi)經(jīng)驗(yàn)的話很難磨碎,還不如用液氮直接。如果你葉片太少或是懶得洗研缽的話,我建議你可以先將1.5ulEP管里的葉片用液氮泡一下,再拿塑料棒手磨,戴上手套不怕會(huì)被凍傷,沒(méi)那么恐怖,而且很方便。希望對(duì)你有用,望實(shí)驗(yàn)順利。
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- 馬莎520 2012-11-12 00:00:00
- 植物DNA不用這么費(fèi)事吧。用液氮就行了呀,不過(guò)我用的是惠彤TM磁珠法試劑盒,液氮都不需要用,非常安全,不會(huì)擔(dān)心被凍傷,樓主可以了解一下。
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- 我是做細(xì)菌研究的,有個(gè)課題需要用到植物的DNA??墒翘崛〕龅腄NA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒(méi)有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA,而且液體的顏色很深。洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的... 我是做細(xì)菌研究的,有個(gè)課題需要用到植物的DNA。 可是提取出的DNA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒(méi)有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA,而且液體的顏色很深。 洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的。請(qǐng)問(wèn)是不是研磨不充分還是其他的什么原因? 還有研磨的時(shí)候必須用液氮么?可以用-70C下保存的新鮮葉片直接研磨么? 展開
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