為什么提取植物全基因組DNA總是降解

染丼櫻櫻 2017-09-14 04:20:44 1041 瀏覽

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lqqqianqi 2017-09-15 00:00:00

降解無怪乎幾種原因： 1，加入提取液后，若是65度提取，時(shí)間太久，有可能造成部分降解。 2，降入氯仿/異戊醇后，劇烈混勻時(shí)間太久，造成部分DNA斷裂 3，打碎組織時(shí)Z好用液氮處理后研磨的方式，用珠子打碎在后期混勻過程中也容易造成DNA斷裂

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熱門問答

為什么提取植物全基因組DNA總是降解:

為什么提取植物全基因組DNA總是降解:

提取植物DNA時(shí)如何防止DNA的降解:

提取的DNA為什么會(huì)降解: 用的CTAB法提的植物總DNA，有白色絮狀沉淀，可是溶解電泳檢測(cè)的時(shí)候帶很亂，很雜，以前提的沒有這種情況，是被降解了嗎，哪些原因會(huì)導(dǎo)致這種情況呢？

提取植物dna，用植物哪個(gè)部位:

植物DNA的提取問題: 我是做細(xì)菌研究的，有個(gè)課題需要用到植物的DNA。可是提取出的DNA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA，而且液體的顏色很深。洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的... 我是做細(xì)菌研究的，有個(gè)課題需要用到植物的DNA。可是提取出的DNA到用70%的乙醇洗滌三次之前那步時(shí)候沒有發(fā)現(xiàn)絮狀的DNA，而且液體的顏色很深。洗滌之后的沉淀物顏色也偏綠而不是透明的。請(qǐng)問是不是研磨不充分還是其他的什么原因？還有研磨的時(shí)候必須用液氮么？可以用-70C下保存的新鮮葉片直接研磨么？展開

怎樣提取植物線粒體DNA:

求問提取質(zhì)粒時(shí)為什么總是由總DNA:

提取植物基因組DNA，DNA是綠色的: 我用的是CTAB法提取植物基因組DNA，方法如下：1.稱取材料0.2g，加入適量PVP，500μl冰冷CTAB，20μl冰冷RNA酶研磨；2.研磨后加入500μl加熱的CTAB，裝入1.5ml離心管中... 我用的是CTAB法提取植物基因組DNA，方法如下： 1.稱取材料0.2g，加入適量PVP，500μl冰冷CTAB，20μl冰冷RNA酶研磨； 2.研磨后加入500μl加熱的CTAB，裝入1.5ml離心管中； 3.充分混勻后，65℃水浴1h，期間不時(shí)輕緩震蕩； 4.12000rpm離心10min，取750μl上清液至另一離心管中； 5.加入等體積的Tris飽和酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），搖勻后12000rpm、離心10min； 6.取上層清液650μl，加入等體積氯仿·異戊醇（24:1），搖勻后12000rpm離心10min； 7.取550μl上清液至另一離心管中，加入等體積異丙醇； 10.-20℃放置1h或室溫下過夜； 11.12000rpm離心10min，倒棄上清液；70%冰冷乙醇洗滌沉淀2次； 12.倒棄上清液，風(fēng)干沉淀； 14.加100μlTE溶解DNA，-20℃保存?zhèn)溆谩? 可是不知道為什么Z后異丙醇沉淀出來的DNA居然是深綠色的，已經(jīng)接近黑色了。有的時(shí)候同樣的步驟做出來的又是白色或者黃色的，這到底是怎么回事?。∠Ｍ赖娜私o我個(gè)提示！會(huì)不會(huì)是因?yàn)楹吐确?異戊醇反應(yīng)的時(shí)間過長？因?yàn)槲野l(fā)現(xiàn)我剩下的那些材料過一段時(shí)間后都變得很綠。展開