Shimadzu LC-30A 與 LCMS-8050 聯(lián)用系統(tǒng)；

色譜柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）；

純水機(jī)：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；

SHIMSEN Disc HPPTFE針式過濾器（P/N：380-00341）；

LC/MS認(rèn)證樣品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air移液槍：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）；

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

UHPLC條件

色譜柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）

流  速：0.8mL/min

進(jìn)樣量：10 μL

柱  溫：60 ℃

切閥程序：0 min（廢液）→ 4.2 min（MS）→ 6.8 min（廢液）

流動相：A：0.1%甲酸水

B：0.1%甲酸甲醇

梯度程序如下：

質(zhì)譜條件

離子化模式：APCI，正離子掃描

掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM)

碰撞氣：氬氣

接口電壓：4.5 kV

霧化氣：氮?dú)?3 L/min

干燥氣：氮?dú)?5 L/min

接口溫度：350℃

DL溫度：150 ℃

加熱模塊溫度：200 ℃

各化合物MRM參數(shù)見下表

二甲雙胍片供試品溶液、二甲雙胍片供試品加標(biāo)溶液、DMF和NDMA混合對照品溶液色譜圖如下：

為了避免高濃度的二甲雙胍成品藥物進(jìn)入質(zhì)譜，造成污染，實(shí)驗中通過調(diào)整液相洗脫程序，實(shí)現(xiàn)N,N-二甲基亞硝胺（NDMA）雜質(zhì)與二甲雙胍藥物進(jìn)行分離，通過二位流通閥，0~4.2 min二甲雙胍出峰時間內(nèi)以及6.8~15 min高比例有機(jī)相沖洗色譜柱時間內(nèi)切入廢液，4.2~6.8 min切至質(zhì)譜，進(jìn)行質(zhì)譜監(jiān)控，由于不同色譜系統(tǒng)的延遲體積的差異，N,N-二甲基亞硝胺雜質(zhì)與二甲雙胍的保留時間會發(fā)生變化，建議配置紫外檢測器進(jìn)行色譜圖的監(jiān)控。

本研究建立了二甲雙胍片中N,N-二甲基亞硝胺的測定方法。采用島津基毒專用柱ShimNex S-GTIs進(jìn)行分離，島津串聯(lián)質(zhì)譜LCMS-8050檢測分析。結(jié)果顯示，NDMA峰型良好，且NDMA和DMF分離度達(dá)到1.5以上。該方法可為二甲雙胍片中N,N-二甲基亞硝胺的測定提供參考。