在1906年，HermannLeuchs發(fā)現(xiàn)，在N－羧基內酸酐（NCA）中，可以同時發(fā)生氨基酸的羧基活化和酰基保護。所以在德國文獻中，其又被叫做Leuchs－酸酐。實際上，為了在多肽合成中使用，具備理想的條件是該類衍生物的應用前提。

從N－（乙氧羰基）氨基酸酰氯上將氯乙烷消除消除從而得到了diyi個N－羧基內酸酐（1,3－氧氮雜環(huán)戊烷－2,5－二酮）。以相應的氨基甲酰氨作為中間體，將游離氨基酸與光 氣反應是對該類衍生物進行制備的好方法之一。但是，恒量的水可以聚合N－羧基內酸酐。由于游離胺是由Z初形成的氨基甲酸自動脫去羧基而形成。發(fā)生進一步開環(huán)反應的親核試劑為該游離胺。所以，在肽合成中，對于NCA方法的應用一直有所限制，一直到1966年，正確的反應條件才被探索出來。有條件的肽合成能夠用N－羧基內酸在水性介質中進行。在pH值為10.2以及低溫的環(huán)境中，氨基酸和肽能夠利用N－羧基內酸酐能迅速酰化而來。增加pH值到10.2，同時將下一種N－羧基內酸酐加入其中，從而使下一輪縮合開始，必須對反應混合物進行劇烈的攪拌，從而使得中間體肽氨基甲酸酯和氨基組分間的羧酸酯的交換減少，除此之外的另一個前提條件為對pH值進行精確控制（氨基酸要求在pH值為10.2－10.5，肽要求在pH值為10.2），由于當pH值高于10.5時，會有副產物乙內酰脲產生。

N-硫代羧基內酸酐（N－thiocarboxyanhydrides,NTA），作為N－羧基內酸酐的硫類似物，也能夠用來對肽進行合成。是由于硫代氨基甲酸酯的穩(wěn)定性比較的高。能夠在9－9.5的pH值條件下進行酰化反應，所以能夠使可能的水解轉化為乙內酰脲得以避免。NCA/NTA方法對于反應中間體不需要分離的片段縮合特別的適用。側鏈沒有必要對三官能團氨基酸（除賴氨酸和半胱氨酸）進行保護。采用該方法已經(jīng)使得核糖核酸酶S－蛋白的幾個片段組合了，之后采用疊氮物法就能夠使完整的S－蛋白得到。