現(xiàn)在離子交換層析作為最廣泛的分離純化方法之一，應用于蛋白質(zhì)、多肽、核酸以及其他帶電荷的生物分子的分離。該方法還可以分離只有微小電荷差異的不同分子，例如只有一個帶電荷氨基酸差別的兩個蛋白。

這些特征使得離子交換層析可以很好地應用于整個層析純化過程的樣品捕獲、中度純化及精純步驟，既適用于少量樣品的純化分析也可以用于純化千克級別的樣品。

本篇文章將繼續(xù)開啟層析純化小課堂，從離子交換層析的理論和應用兩方面出發(fā)，帶大家溫故知新，一探離子交換層析純化方法的神奇。

SOURCE填料由聚苯乙烯-對乙烯基苯制成的高度分散的球形多孔顆粒，該填料有利于高流速條件下的高分辨率分離過程。

Sepharose填料是基于瓊脂糖基架的，具有高流速與高分辨率不同區(qū)分的填料，可根據(jù)純化過程對分辨率的要求程度、結(jié)合載量及流速選擇最合的填料。

Capto填料比Sepharose基架填料具有更高的剛性，且反壓更低，使得該填料具有更好的穩(wěn)定性，更適合于具有規(guī)模放大的應用需求。

Capto HiRes系列預裝柱可以有效分離表面電荷具有極小差異的生物分子，而且性能穩(wěn)定，同時可以實現(xiàn)MonoBeads層析方案的平穩(wěn)轉(zhuǎn)移。目前在結(jié)構(gòu)研究和蛋白質(zhì)分析、制備高純度蛋白質(zhì)的過程中是首要選擇。

HiTrap Capto IEX Selection Kit (Capto離子選擇試劑盒套裝)內(nèi)含五支不一樣的1 mL層析柱，除了常用的強陰離子Q、弱陰離子DEAE、強陽離子S之外，還有多模式的adhere和MMC。一個試劑盒套裝，即可讓您一次性快速篩選出最合適的離子交換填料產(chǎn)品。

此外，還需要選擇合適的離子交換層析填料：隨著分辨率的提升，反壓也會隨之提高，因此需要平衡分辨率/壓力指標以獲得最適合的分離效果。

每一次完善的清潔都是下一次完美結(jié)果的保證，因此清洗工作不容忽視。

常規(guī)清洗均可以使用NaOH或NaCl完成，例如每5次分離純化即開啟一次清洗周期。如果樣品是細胞裂解液，則建議每次分離純化都需要作一次清洗，以保證離子交換層析柱始終保持在最佳狀態(tài)。