蛋白質(zhì)的分離純化在生物化學(xué)研究應(yīng)用中使用廣泛，是一項(xiàng)重要的操作技術(shù)。 一個(gè)典型的真核細(xì)胞可以包含數(shù)以千計(jì)的不同蛋白質(zhì)，一些含量十分豐富，一些僅含有幾個(gè)拷貝。為了研究某一個(gè)蛋白質(zhì)，必須首先將該蛋白質(zhì)從其他蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)分子中純化出來(lái)。

1.離子交換層析

離子交換層析進(jìn)行在由液體作為流動(dòng)相，由離子交換劑作為固定相?；|(zhì)、電荷基團(tuán)和反離子構(gòu)成了離子交換劑。主要是利用離子交換劑上電荷基團(tuán)對(duì)溶液中離子或離子化合物的吸附作用或者是通過(guò)離子交換方式進(jìn)行離子交換劑與離子化合物或水溶液中離子的反應(yīng)。

2.分子篩層析

凝膠過(guò)濾又稱為分子篩層析，因?yàn)槟z具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，大分子物質(zhì)會(huì)被排除在外部，小分子物質(zhì)卻可以進(jìn)入其內(nèi)部。當(dāng)從凝膠過(guò)濾層析柱通過(guò)一混合溶液的時(shí)候，根據(jù)不同分子量篩分開(kāi)了溶液中的物質(zhì)。

3、聚酰胺薄膜層析

因?yàn)榫埘０房梢院头蛛x物之間形成氫鍵，所以聚酰胺對(duì)極性物質(zhì)具有吸附作用。被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小取決于形成氫鍵的強(qiáng)弱。層析時(shí)，在聚酰胺膜表面，展層劑與被分離物相互競(jìng)爭(zhēng)，使得氫鍵形成。所以，對(duì)展層劑進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼箤觿?，是被分離物發(fā)生的吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的過(guò)程在聚酰胺膜表面連續(xù)進(jìn)行，就可以引起物質(zhì)分離，從而使得分離目的達(dá)到。

4、吸附柱層析

吸附柱層析是指一種將緩沖液或者有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相，將固體吸附劑作為固定相使得柱構(gòu)成的層析方法。

5、薄層層析

薄層層析是指一種將液體作為流動(dòng)相，將在滌綸片或者玻板等載體上涂布的基質(zhì)作為固定相的層析方法。此種層析方法是在載體上涂布吸附劑等物質(zhì)使得薄層形成，之后根據(jù)紙層析操作展層。