圖1.進樣順序：通過連續(xù)進樣食品基質(zhì)提取物評估穩(wěn)定性，這些提取物以溶劑QC樣本為間隔進行注射（每5次溶劑QC進樣100次食品基質(zhì)進樣）（點擊查看大圖）

圖2.固體樣品分析的LC-MS/MS工作流程（點擊查看大圖）

為了提取固體和生物固體樣品，通過以下步驟制備提取0.3%氫氧化銨的甲醇溶液：將1mL 30%的氫氧化銨加入到甲醇（99mL）中，在室溫下儲存，1個月后更換。固體（或生物固體）樣品通過以下程序制備（或參考EPA方法第11.3和12.0節(jié)）¹。

本研究中使用雙層GCB/WAX固相萃取柱代替WAX固相萃取柱，再進行脫碳凈化處理，減少了樣品提取和凈化時間，并最大限度地減少了手動操作誤差。

在樣品瓶和SPE柱之間使用入口過濾器，以防止顆粒堵塞SPE柱。以上所有萃取流程均使用 Promochrom SPE-03自動進樣系統(tǒng)（Promochrom Technologies，Richmond，BC， Canada），以減少人力成本，并最大限度地減少人為錯誤。

該方法的選擇性和樣品中PFAS分析物的確認通過比較分析物保留時間和MS信息（例如參考標準品和測試樣品之間的分析物定量/定性離子豐度比 [IAR]）進行評估。根據(jù)關(guān)于分析方法驗證的監(jiān)管指導，該LC-MS/MS方法應至少使用兩個結(jié)構(gòu)特異的MS/MS轉(zhuǎn)換離子對14-16^4-6。美國EPA方法1633要求樣品的IAR必須在所觀察到的中間點初始校準標準品的IAR的±50%范圍內(nèi)，并且該比率要求不適用于PFBA、PFPeA、NMeFOSE、NEtFOSE、PFOSA、PFMPA和PFMBA，因為沒有合適的（無法檢測或S/N不足）二級離子對可用。

在本研究中，該方法盡可能針對每種分析物使用了兩個或三個MS/MS離子對，以對研究樣品中 PFAS 的目標峰進行定性確認，并確定除PFBA和PFOSA（其二級離子對的S/N不足）外，真實水樣中所有測定的 PFAS分析物的IAR值均在預期值容差窗的±40%范圍內(nèi)。有關(guān)樣品分析結(jié)果和IAR值（表5-6），請參閱本文最后一節(jié)。

通過測量最低濃度校準標準品的信噪比（S/N）來確定儀器靈敏度（參見EPA方法第7.3.4、10.3.3.1和13.3節(jié)）。在本研究中，定量離子和確證離子的定量限（LOQ）由S/N≥3:1確定，如果分析物只有一個定量離子，則S/N≥10:1。

方法檢測限（MDL）是指能夠以99%的置信度報告可將分析物的實測濃度與方法空白結(jié)果區(qū)分開來的最小濃度。每個實驗室必須使用40 CFR Part 136.7中的為所有目標分析物建立MDL。在本研究中，使用了若干低水平持續(xù)精密度和回收率（LLOPR）樣本以及方法。

三份方法空白樣品分別在三個不同日期進行了分析，然后從所有LLOPR樣品和空白中計算PFAS濃度。LLOPR是持續(xù)存在的精密度和回收率樣品，其濃度為實驗室LOQ的兩倍，并用作儀器靈敏度的常規(guī)檢查。在本研究中，由于空白樣品未檢測到PFAS，因此使用11個LLOPR 樣品的結(jié)果來計算每種分析物的平均PFAS含量和標準偏差（STDEV）。

MDL=T（ n-1，0.99）x STDEV，其中當n=11時，T（n-1，0.99）=2.764。因此，MDL= 2.764 x STDEV 。

表1列出了本研究中獲得的MDL和LOQ值以及EPA組織的實驗室間研究的匯總結(jié)果（見EPA方法表9 ¹）。

表1.本研究中獲得的方法檢測限（MD）和定量限（LOQ）以及EPA組織的實驗室間研究的匯總結(jié)果（點擊查看大圖）

表2.樣品中未提取內(nèi)標物（NIS）的回收率（%）（點擊查看大圖）

表3.從樣品中提取的內(nèi)標物（EIS）的回收率（%）（點擊查看大圖）

方法準確度可通過加標樣品的分析物回收率（LFM）進行評估。如表4所示，LFM樣品的PFAS 回收率結(jié)果在EPA方法設(shè)定的范圍內(nèi)（EPA方法中的表7）。PFDOs的回收率較低，可能是由于缺乏同位素標記的內(nèi)標物（¹³C₈-PFOS用于該方法中的定量）。EPA的實驗室間研究也獲得了同樣低的結(jié)果。¹

測量的RSD%的精密度在20%以內(nèi)（n≥3）。此外，使用從Absolute Standards Inc.獲得的能力驗證樣品進一步驗證了該方法的準確性，所有40種PFAS的結(jié)果均在可接受范圍內(nèi)（數(shù)據(jù)未顯示，但可根據(jù)要求提供）。

表4.加標現(xiàn)場樣品中目標全氟辛烷磺酸的回收率（點擊查看大圖）

表5.不同固體樣品的全氟辛烷磺酸結(jié)果（ng/G）及其IAR值（點擊查看大圖）

圖3.黑色花園土壤樣品中發(fā)現(xiàn)的全氟辛烷磺酸的LC-MS/MS色譜圖（點擊查看大圖）

表6.生物固體樣品的全氟辛烷磺酸結(jié)果（ng/g）和IAR值（點擊查看大圖）

盡管加拿大自21世紀初就開始對PFAS進行管制并逐步停止生產(chǎn)，但由于其在環(huán)境中的持久性，仍然在大多數(shù)樣本中檢測到了PFAS 。