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耗材專(zhuān)區(qū) | 應(yīng)用EZsep MAX固相萃取柱建立牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測(cè)方法

來(lái)源：北京萊伯泰科儀器股份有限公司 更新時(shí)間：2024-08-23 09:15:11 閱讀量：196
導(dǎo)讀：本實(shí)驗(yàn)室參照《動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（征求意見(jiàn)稿）》建立的一種對(duì)牛奶中碘醚柳胺殘留量進(jìn)行分析的方法。

前言


碘醚柳胺是鹵化水楊酰苯胺類(lèi)殺吸蟲(chóng)藥，可以抑制蟲(chóng)體線粒體的磷酸化過(guò)程，從而阻止蟲(chóng)體內(nèi)三磷酸腺甙（ATP）的合成，導(dǎo)致蟲(chóng)體能量代謝的活力迅速減弱而死亡，隨著國(guó)內(nèi)驅(qū)蟲(chóng)藥的廣泛應(yīng)用和研究，發(fā)現(xiàn)碘醚柳胺有明顯胚胎毒性，食用含有碘醚柳胺的動(dòng)物性食品會(huì)影響身體健康。

本文參照《動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（征求意見(jiàn)稿）》，利用EZsepTM MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號(hào)：PZ12802）凈化樣液，再通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)，建立了一種對(duì)牛奶中碘醚柳胺殘留量進(jìn)行分析的方法。


1

實(shí)驗(yàn)過(guò)程



1.1 儀器與試劑
MPREP-SPE08手動(dòng)固相萃取裝置，貨號(hào)：PZ0008，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；
E.T.氮吹濃縮儀，貨號(hào)：C020017，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；
4500質(zhì)譜系統(tǒng)，SCIEX公司；
EZsep MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號(hào)：PZ12802），北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；
冷凍離心機(jī)，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學(xué)儀器廠；
甲醇（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；
乙腈（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；
甲酸、氨水、三乙胺等化學(xué)品均為分析純或以上規(guī)格，購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 工作液配制
碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：100mg/瓶，購(gòu)自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。
碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：取碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)品適量（相當(dāng)于有效成分約10mg），精密稱(chēng)取，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為1000μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。
碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液：移取碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液。
碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液：碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液。
依次移取0.1μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL，分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，得到濃度依次為0.2μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。

1.3 實(shí)驗(yàn)部分
1.3.1 樣品制備
取牛奶試樣2g，置于50 mL聚丙烯離心管中，加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液超聲提取10 min，8000 r/min離心5 min，收集上清液至另一50 mL離心管中，向殘?jiān)屑尤?.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液，重復(fù)提取一次，合并兩次上清液，用乙腈定容至20 mL，混勻，待凈化。
1.3.2 固相萃取凈化
EZsep MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號(hào)：PZ12802）用5mL乙腈進(jìn)行活化，取1.3.1待凈化液5.0 mL上樣，上樣結(jié)束后用5mL乙腈淋洗萃取柱，再用5mL 5%甲酸乙腈洗脫萃取柱，收集洗脫液，使用E.T.氮吹濃縮儀在45℃下氮?dú)鉂饪s至近干，加2.0 mL甲醇渦旋混勻，過(guò)微孔濾膜后供LC-MS/MS測(cè)定。
1.3.1 LC-MS/MS儀器條件
色譜柱：Kinetex Luna PFP（2.6μm，3*100mm）；
檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；
流動(dòng)相：A:0.1%氨水水溶液  B: 甲醇；
流速：0.3mL/min；
進(jìn)樣量：5μL。


2

實(shí)驗(yàn)結(jié)果



表2 加標(biāo)回收率

圖1 標(biāo)液色譜圖

圖2 碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

3

實(shí)驗(yàn)結(jié)論



本實(shí)驗(yàn)使用EZsep MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號(hào)：PZ12802）對(duì)牛奶中碘醚柳胺進(jìn)行凈化，通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測(cè)定，該方法的加標(biāo)回收率范圍89.6%~95.3%，RSD為2.3%，能夠滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。也說(shuō)明EZsep MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號(hào)：PZ12802）能很好的完成方法中的凈化工作，結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

4

參考文獻(xiàn)



[1] 《動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（征求意見(jiàn)稿）》


關(guān)于

北京儀器股份有限公司成立于2002年，是一家專(zhuān)業(yè)從事實(shí)驗(yàn)分析儀器的研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售的科技型公司。
自成立之初便致力于為環(huán)境檢測(cè)、食品安全、疾病控制、半導(dǎo)體檢測(cè)、生命科學(xué)、能源化工、核環(huán)保、公安司法、地質(zhì)與地礦、材料研究等眾多行業(yè)客戶提供實(shí)用可靠的實(shí)驗(yàn)室分析儀器、智能自動(dòng)化前處理設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室工程和耗材在內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室整體解決方案，是全球范圍內(nèi)能將多種類(lèi)、多功能的樣品前處理技術(shù)與全自動(dòng)實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)平臺(tái)組合成全自動(dòng)實(shí)驗(yàn)分析儀器系統(tǒng)的主要實(shí)驗(yàn)分析儀器供應(yīng)商之一。
擁有LabTech、CDS、Empore等品牌，在中國(guó)和美國(guó)設(shè)有研發(fā)和生產(chǎn)基地，并在中國(guó)內(nèi)地主要城市、中國(guó)香港、美國(guó)馬薩諸塞州和賓夕法尼亞州等地設(shè)有產(chǎn)品營(yíng)銷(xiāo)和服務(wù)中心。目前，公司產(chǎn)品已銷(xiāo)往全球90多個(gè)國(guó)家，累計(jì)服務(wù)客戶3萬(wàn)余家。
未來(lái)，將繼續(xù)秉承自主創(chuàng)新的發(fā)展思路，以安全可靠的智能自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和解決方案服務(wù)于各行各業(yè)，讓分析檢測(cè)更準(zhǔn)確、更快速、更智能！
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