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耗材專(zhuān)區(qū) | 應(yīng)用EZsep HMR-Lipid固相萃取柱檢測(cè)魚(yú)肉中水楊酸殘留量

來(lái)源：北京萊伯泰科儀器股份有限公司 更新時(shí)間：2024-10-18 09:18:14 閱讀量：148
導(dǎo)讀：本實(shí)驗(yàn)是參照《魚(yú)可食性組織中水楊酸殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見(jiàn)稿)》建立的魚(yú)肉中水楊酸殘留量的分析方法。

前言


水楊酸，分子式為C7H6O3，是植物柳樹(shù)皮提取物，是一種天然的消炎藥。水楊酸可以殺菌、消炎，從而常被用于對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物體表的水霉、鰓霉的剝離分解及傷口修復(fù)，水產(chǎn)動(dòng)物因紅斑、皮膚病、打印、赤皮、爛尾、潰爛、腐皮、膚霉、脫粘、白頭白嘴、爛鰓、水腫、出血等引起的多種傷口能快速愈合。本品定期使用能有效預(yù)防和降低水產(chǎn)品發(fā)病率并快速凈化水體，從而抑制降解水體中的各種雜菌及病原體，但長(zhǎng)期過(guò)量使用會(huì)造成藥物在動(dòng)物體內(nèi)富集，人類(lèi)食用這些水產(chǎn)品會(huì)使殘留的獸藥進(jìn)入人體，從而影響人體健康。

本文參照《魚(yú)可食性組織中水楊酸殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見(jiàn)稿)》，利用EZsep?HRM-Lipid固相萃取柱（300mg/6mL，貨號(hào)：PZ12624） 凈化樣品，再通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)進(jìn)行檢測(cè)，建立了魚(yú)肉中水楊酸殘留量的分析方法。


1

實(shí)驗(yàn)過(guò)程



1.1 儀器與試劑
MPREP-SPE08手動(dòng)固相萃取裝置，貨號(hào)：PZ0008，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；
E.T.氮吹濃縮儀，貨號(hào)：C020017，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；
4500質(zhì)譜系統(tǒng)，SCIEX公司；
EZsep?HRM-Lipid固相萃取柱（300 mg/6mL，貨號(hào)：PZ12624），北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；
冷凍離心機(jī)，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng)；
乙腈（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；
甲酸（分析純），購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 工作液配制
水楊酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：100mg/瓶，購(gòu)自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。
水楊酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：取水楊酸標(biāo)準(zhǔn)品適量(相當(dāng)于有效成分約10mg)，精密稱(chēng)定，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為1000μg/mL的水楊酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。
水楊酸D4標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：濃度為100μg/mL溶劑為甲醇，購(gòu)自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。
水楊酸標(biāo)準(zhǔn)中間液：移取水楊酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的水楊酸標(biāo)準(zhǔn)中間液。
水楊酸標(biāo)準(zhǔn)使用液：水楊酸標(biāo)準(zhǔn)中間液1.0mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為1.0μg/mL的水楊酸標(biāo)準(zhǔn)使用液。
水楊酸D4標(biāo)準(zhǔn)使用液:移取水楊酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為1.0μg/mL的水楊酸D4標(biāo)準(zhǔn)使用液。
依次移取1.0μg/mL的水楊酸標(biāo)準(zhǔn)使用液0、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.0mL，分別置于10mL容量瓶中并均加入水楊酸D4標(biāo)準(zhǔn)使用液0.2mL，以0.1%甲酸水溶液定容至刻度，得到濃度依次為0μg/L、2μg/L、5μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液，水楊酸D4濃度固定為20μg/L。

1.3 實(shí)驗(yàn)部分
1.3.1 樣品制備
取魚(yú)肉試樣2g，置于50mL聚丙烯離心管中，添加水楊酸D4標(biāo)準(zhǔn)工作液40μL，加5%甲酸乙腈溶液10.0mL，渦旋混勻1min超聲提取10min，10000r/min冷凍離心5min，收集上清液5.0mL待凈化
1.3.2 固相萃取凈化
EZsep?HRM-Lipid固相萃取柱（300 mg/6mL，貨號(hào)：PZ12624）用5mL乙腈進(jìn)行活化，取1.3.1待凈化液上樣，收集流出液，以E.T.氮吹濃縮儀，40℃氮?dú)鉂饪s至近干，加1.0mL0.1%甲酸水溶液，渦旋混勻過(guò)微孔濾膜后供LC-MS/MS測(cè)定。
1.3.1 LC-MS/MS儀器條件
色譜柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；
檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；
流動(dòng)相：A：0.1%甲酸水溶液；B：乙腈；
流速：0.3mL/min。

表1 流動(dòng)相梯度洗脫表


2

實(shí)驗(yàn)結(jié)果



表2 加標(biāo)回收率

圖1 標(biāo)液色譜圖

圖2 空白樣品色譜圖

圖3 10μg/kg樣品添加色譜圖

3

實(shí)驗(yàn)結(jié)論



本實(shí)驗(yàn)使用EZsep?HRM-Lipid固相萃取柱（300mg/6mL，貨號(hào)：PZ12624） 對(duì)魚(yú)肉樣品進(jìn)行凈化，通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定其中的水楊酸殘留量，該方法的加標(biāo)回收率在95.0%~105.3%之間，RSD為3.8%，滿(mǎn)足標(biāo)準(zhǔn)要求。測(cè)試結(jié)果說(shuō)明EZsep?HRM-Lipid固相萃取柱（300 mg/6mL，貨號(hào)：PZ12624）能很好的完成方法中的凈化工作，并且結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

4

參考文獻(xiàn)



[1] 《魚(yú)可食性組織中水楊酸殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見(jiàn)稿)》


關(guān)于

北京儀器股份有限公司成立于2002年，是一家專(zhuān)業(yè)從事實(shí)驗(yàn)分析儀器的研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售的科技型公司。
自成立之初便致力于為環(huán)境檢測(cè)、食品安全、疾病控制、半導(dǎo)體檢測(cè)、生命科學(xué)、能源化工、核環(huán)保、公安司法、地質(zhì)與地礦、材料研究等眾多行業(yè)客戶(hù)提供實(shí)用可靠的實(shí)驗(yàn)室分析儀器、智能自動(dòng)化前處理設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室工程和耗材在內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室整體解決方案，是全球范圍內(nèi)能將多種類(lèi)、多功能的樣品前處理技術(shù)與全自動(dòng)實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)平臺(tái)組合成全自動(dòng)實(shí)驗(yàn)分析儀器系統(tǒng)的主要實(shí)驗(yàn)分析儀器供應(yīng)商之一。
擁有LabTech、CDS、Empore等品牌，在中國(guó)和美國(guó)設(shè)有研發(fā)和生產(chǎn)基地，并在中國(guó)內(nèi)地主要城市、中國(guó)香港、美國(guó)馬薩諸塞州和賓夕法尼亞州等地設(shè)有產(chǎn)品營(yíng)銷(xiāo)和服務(wù)中心。目前，公司產(chǎn)品已銷(xiāo)往全球90多個(gè)國(guó)家，累計(jì)服務(wù)客戶(hù)3萬(wàn)余家。
未來(lái)，將繼續(xù)秉承自主創(chuàng)新的發(fā)展思路，以安全可靠的智能自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和解決方案服務(wù)于各行各業(yè)，讓分析檢測(cè)更準(zhǔn)確、更快速、更智能！
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