在腫瘤免疫、神經(jīng)科學(xué)等前沿領(lǐng)域,理解細(xì)胞在原位空間環(huán)境中的相互作用是突破疾病機(jī)制的關(guān)鍵。傳統(tǒng)技術(shù)受限于信號(hào)強(qiáng)度、多重?zé)晒獾墓庾V串?dāng)_和檢測(cè)通量,難以實(shí)現(xiàn)多靶標(biāo)原位同時(shí)分析。Thermo Fisher Scientific推出的EVOS S1000空間生物學(xué)成像系統(tǒng)和Invitrogen Aluora空間擴(kuò)增試劑,以創(chuàng)新技術(shù)攻克多重?zé)晒鈾z測(cè)瓶頸,為空間生物學(xué)研究提供全新工具。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
三重突破,定義行業(yè)標(biāo)桿
超高靈敏度,攻克低豐度靶標(biāo)
通過(guò)共價(jià)信號(hào)擴(kuò)增技術(shù),顯著提升弱表達(dá)蛋白檢出能力。對(duì)比傳統(tǒng)染料(如Alexa Fluor?),信號(hào)強(qiáng)度提升10倍以上,曝光時(shí)間縮短至1/20(如PCNA檢測(cè)中,Aluora 594僅需50ms vs AF594的1000ms),大幅降低背景噪聲。支持超低抗體濃度(稀釋比達(dá)1:100,000),節(jié)約珍貴樣本與試劑成本。
人結(jié)腸組織中Alexa Fluor 594(左)與Aluora 594染料(右)的顯影效果
兩份樣本均按1:1000比例染色PCNA且曝光時(shí)間相同。點(diǎn)狀染色顯示PCNA蛋白定位。縮短曝光時(shí)間可減少背景噪音對(duì)信號(hào)檢測(cè)的干擾。
8色光譜分拆,實(shí)現(xiàn)9重標(biāo)記
Invitrogen Aluora空間擴(kuò)增試劑中8種專屬熒光染料(430/488/514/555/594/647/700/750nm)經(jīng)光譜優(yōu)化,在EVOS S1000空間成像系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)零串?dāng)_分拆。無(wú)需循環(huán)檢測(cè)(cyclic detection),單次成像即可解析9重標(biāo)記(8蛋白+DAPI),完整保留組織空間結(jié)構(gòu)。其光譜匹配Akoya Opal染料,可作為無(wú)縫替代方案。
靈活兼容,解放實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
支持任意一抗(兔源、鼠源、生物素化),無(wú)需預(yù)偶聯(lián)。兼容FFPE組織、自動(dòng)化工作站,可與其他IHC策略聯(lián)用。工作流程標(biāo)準(zhǔn)化:從單重優(yōu)化到9重檢測(cè),試劑盒(Rainbow Kit)覆蓋100張玻片需求。
應(yīng)用場(chǎng)景
從腫瘤微環(huán)境到神經(jīng)圖譜
9重標(biāo)記解析乳腺導(dǎo)管癌(IDC)微環(huán)境:同步可視化癌細(xì)胞、T細(xì)胞(CD4/CD8)、B細(xì)胞(CD20)、巨噬細(xì)胞(CD68)、增殖標(biāo)志物(PCNA)、基質(zhì)蛋白(Vimentin)的空間互作,揭示免疫逃逸機(jī)制。
▽
小鼠腦組織9重成像:同步標(biāo)記神經(jīng)元(MAP2/NeuN)、膠質(zhì)細(xì)胞(GFAP/AQP4)、干細(xì)胞(SOX2)及功能蛋白(GAD67),構(gòu)建神經(jīng)環(huán)路空間圖譜。
▽
人扁桃體、結(jié)腸、淋巴瘤等多組織驗(yàn)證,信號(hào)穩(wěn)定性>95%。
對(duì)比優(yōu)勢(shì)
三重突破,定義行業(yè)標(biāo)桿
指標(biāo) | Aluora | 傳統(tǒng)熒光試劑 |
多重能力 | 9重單次成像 | 通?!?重 |
低豐度靶標(biāo)靈敏度 | 信號(hào)擴(kuò)增10倍+ | 依賴高濃度一抗 |
抗體消耗 | 稀釋比1:1,000–1:100,000 | 1:10–1:200 |
實(shí)驗(yàn)流程 | 兼容自動(dòng)化,F(xiàn)FPE專屬優(yōu)化 | 部分需反復(fù)脫蓋/染色 |
在FFPE腸組織PCNA檢測(cè)中,Aluora 488僅需6ms曝光(1:100,000抗體),而競(jìng)品在1:10,000濃度下仍需175ms,且背景顯著升高。
一體化解決方案
儀器 + 試劑協(xié)同創(chuàng)新
Aluora?與EVOS? S1000空間成像系統(tǒng)深度整合:
16-bit sCMOS相機(jī) + 蔡司APO物鏡,實(shí)現(xiàn)亞細(xì)胞分辨率。
定制紅外激光自動(dòng)對(duì)焦,支持4玻片連續(xù)掃描。
預(yù)裝Aluora光譜配置文件,一鍵式分拆分析。
Invitrogen EVOS S1000空間生物學(xué)成像分析系統(tǒng)是一款寬場(chǎng)光譜成像系統(tǒng),整合了多重光譜熒光、透射明場(chǎng)、相差及彩色明場(chǎng)成像等諸多功能。
快速:20分鐘即可完成1cm2組織的9標(biāo)成像(10x;掃描、光譜解析及拼接);
靈活:兼容多種熒光染料、抗體、RNA探針及顯色試劑;
全面:支持光譜熒光、透射明場(chǎng)、相差及彩色明場(chǎng)成像;
高靈敏度:配備420萬(wàn)像素16-bit科研級(jí)sCMOS相機(jī),可清晰檢測(cè)組織內(nèi)復(fù)雜的多重染色信號(hào);
可變倍率:支持2.5x–40x物鏡(5孔物鏡轉(zhuǎn)盤);
高效:自動(dòng)化激光聚焦與軟件輔助聚焦流程加速圖像采集;
易用:直觀的軟件界面,適用于不同經(jīng)驗(yàn)水平的用戶(圖像采集、導(dǎo)航及數(shù)據(jù)檢索);
兼容性:支持TIFF、OME-TIFF及分層圖像格式,適配各類數(shù)據(jù)分析軟件;
高分辨率:光譜解析技術(shù)減少熒光串色,生成高分辨率圖像。
Aluora試劑專為FFPE組織設(shè)計(jì),支持從單重成像到9重成像(含DAPI)的多種成像方式。具有靈活性,可與小鼠IgG、兔IgG或生物素標(biāo)記的IHC抗體panel配合使用,適用于常規(guī)成像和空間多重成像。部分貨號(hào)請(qǐng)見(jiàn)下表,還有多種試劑盒可供選擇:
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為什么不能直接用熱電偶測(cè)量冷熱沖擊試驗(yàn)箱內(nèi)移動(dòng)籃筐的溫度?
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