- 2025-01-10 10:52:26單克隆細(xì)胞株
- “單克隆細(xì)胞株”是通過克隆技術(shù)從單一細(xì)胞衍生而來的細(xì)胞群體。它具有遺傳一致性,即所有細(xì)胞均來自同一個(gè)祖先細(xì)胞,因此具有相同的遺傳特征和生物學(xué)特性。單克隆細(xì)胞株在生物學(xué)研究、藥物篩選、基因治療等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。通過培養(yǎng)單克隆細(xì)胞株,可以獲得大量具有特定功能的細(xì)胞,用于實(shí)驗(yàn)研究和治療應(yīng)用。這種細(xì)胞株的穩(wěn)定性和一致性,使其成為生物醫(yī)學(xué)研究和臨床應(yīng)用中的重要工具。
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- 通過構(gòu)建CD244基因轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定細(xì)胞株,并基于此制備特異性單克隆抗體。實(shí)驗(yàn)采用電穿孔儀(威尼德)完成基因轉(zhuǎn)染,篩選獲得高表達(dá)細(xì)胞株;通過免疫動(dòng)物及雜交瘤技術(shù)獲得抗體
單克隆細(xì)胞株產(chǎn)品
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單克隆細(xì)胞株問答
- 2023-05-20 12:59:12測(cè)定單克隆細(xì)菌群體中單細(xì)胞對(duì)抗生素的敏感性
- 鑒于抗菌素耐藥性的出現(xiàn),了解細(xì)胞群體對(duì)抗生素反應(yīng)的異質(zhì)性至關(guān)重要。因?yàn)樗幬锟梢允┘舆x擇壓力,導(dǎo)致抗性表型的出現(xiàn)。迄今為止,無論是整體方法還是單細(xì)胞方法都無法將單細(xì)胞易感性的異質(zhì)性與人群對(duì)抗生素的反應(yīng)聯(lián)系起來。在這里,我們提出了一個(gè)平臺(tái),通過使用錨定微流體滴和圖像和數(shù)據(jù)分析管道,測(cè)量單個(gè)大腸桿菌細(xì)胞在不同環(huán)丙沙星濃度下形成小菌落的能力。微流控結(jié)果與抗生素敏感性的經(jīng)典微生物學(xué)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行了基準(zhǔn)測(cè)試,顯示池微流控芯片與重復(fù)的批量測(cè)量結(jié)果之間的一致性。此外,單細(xì)胞形成菌落的實(shí)驗(yàn)可能性用于提供概率抗生素敏感性曲線。除了概率觀點(diǎn)外,微流控格式還可以隨著時(shí)間的推移對(duì)大量單個(gè)細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行表征。該管道可用于比較不同菌株對(duì)具有不同作用機(jī)制的抗生素的反應(yīng)。
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- 2023-05-25 15:24:22Vi-CELL BLU細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在工程細(xì)胞株開發(fā)中的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
- 工程細(xì)胞株開發(fā)(Cell Line Development: CLD)的主要目的是通過高通量篩選手段獲得數(shù)個(gè)高產(chǎn)穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株,為后續(xù)的工藝開發(fā)及優(yōu)化提供基礎(chǔ)。能否構(gòu)建適合于生產(chǎn)的高表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞株,將直接影響后期重組蛋白或單克隆蛋白等藥物的開發(fā)效率和生產(chǎn)成本。細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞株開發(fā)的基礎(chǔ),無論是細(xì)胞轉(zhuǎn)染、高通量克隆篩選、培養(yǎng)基優(yōu)化、還是抗體表達(dá),都需要在細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上完成細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的檢測(cè),其中包括活細(xì)胞密度(VCD)和活率(Viability)檢測(cè)。通過檢測(cè)結(jié)果將細(xì)胞密度和活率達(dá)不到要求的細(xì)胞排除掉。最 終,從數(shù)以千計(jì)的克隆細(xì)胞中篩選到穩(wěn)定高產(chǎn)的單克隆細(xì)胞株。由于要篩選的克隆細(xì)胞量很大,對(duì)所培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的檢測(cè),通常需要使用高通量分析設(shè)備,有時(shí)甚至結(jié)合移液工作站來完成自動(dòng)化檢測(cè)。譬如,使用96孔板檢測(cè)細(xì)胞密度和活率,同時(shí)根據(jù)需要可整合自動(dòng)化移液工作站,從而大大提高篩選分析通量,并實(shí)現(xiàn)測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)化,減少人為操作誤差,最 終使我們能在有限的平臺(tái)基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)細(xì)胞株的篩選。貝克曼庫爾特生命科學(xué)的Vi-CELL BLU全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀就是這樣一款滿足高通量上樣、全自動(dòng)檢測(cè),并可與自動(dòng)化移液工作站整合的分析儀器。它具有以下一些優(yōu)點(diǎn)滿足細(xì)胞株開發(fā)過程中對(duì)克隆細(xì)胞的VCD和Viability準(zhǔn)確和快速地檢測(cè)。96孔板上樣檢測(cè)Vi-CELL BLU全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀除了可以使用24位轉(zhuǎn)盤做不間斷檢測(cè)外,同時(shí)可以采用96孔板進(jìn)行高通量樣品分析測(cè)試(如下圖所示),使用配套的封板膜可以減少檢測(cè)過程中樣品的揮發(fā),防止待測(cè)樣品受到外部環(huán)境的污染,對(duì)于有生物安全的細(xì)胞樣品,也可降低對(duì)操作人員的危害風(fēng)險(xiǎn)。Vi-CELL BLU 96孔板檢測(cè)照片和移液工作站整合為了解決那些重復(fù)操作、通量高、易污染、需要大量人力操作的實(shí)驗(yàn)步驟,如梯度稀釋、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞換液、高通量篩選、克隆挑選等步驟,從而使得上游更通暢,并保證數(shù)據(jù)的完整性,可以使用貝克曼庫爾特Biomek系列自動(dòng)化移液工作站來完成這些工作。那細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析操作是否也可以整合進(jìn)來,讓自動(dòng)化工作站控制完成相關(guān)檢測(cè)呢?答案是可以的。Vi-CELL BLU細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可通過OPC UA Server和自動(dòng)化移液工作站實(shí)現(xiàn)有效地整合,進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析檢測(cè)的自動(dòng)化目的,避免無謂的重復(fù)實(shí)驗(yàn)操作。Biomek自動(dòng)化移液工作站整合Vi-CELL BLU細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的彩頁全自動(dòng)和標(biāo)準(zhǔn)化分析使用96孔板的高通量細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析時(shí),可以在Cell Type檢測(cè)參數(shù)表中設(shè)置染色前的吹打混懸次數(shù)(Aspiration cycles)和染色混合次數(shù)(Mixing cycles),以此讓儀器自動(dòng)對(duì)沉降的細(xì)胞吹打均勻。然后,在保證細(xì)胞樣品均一性的前提下,吸取等體積臺(tái)盼藍(lán)吹打完成細(xì)胞的均勻染色。最 后,再通過Cell Type中的細(xì)胞識(shí)別參數(shù),對(duì)拍攝得到的細(xì)胞進(jìn)行有效地識(shí)別分析。檢測(cè)結(jié)束后儀器自動(dòng)對(duì)管路清洗,接著儀器自動(dòng)對(duì)下一個(gè)樣品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化分析。Cell Type參數(shù)表單個(gè)樣品的百圖分析每個(gè)細(xì)胞樣品按默認(rèn)Cell Type方法檢測(cè)可以得到100張細(xì)胞照片,相比于其他細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的拍攝1張、3張或6張照片,同一樣品拍攝100張照片得到的細(xì)胞數(shù)更多,因而該細(xì)胞計(jì)數(shù)方法的系統(tǒng)偏差更小,測(cè)試結(jié)果的代表性更好。CHO細(xì)胞第59張照片(共100張)同一焦平面下的細(xì)胞直徑檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)過程中平均直徑的監(jiān)測(cè)通常會(huì)被忽略,同時(shí)這也是一個(gè)不太容易被細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)準(zhǔn)確的參數(shù),但這個(gè)直徑參數(shù)有時(shí)影響會(huì)很大。在細(xì)胞轉(zhuǎn)染病毒或質(zhì)粒后,一般細(xì)胞平均直徑會(huì)發(fā)生變化。有客戶發(fā)現(xiàn)在Fed-Batch培養(yǎng)過程中細(xì)胞平均直徑有時(shí)會(huì)過大,從而可能因?yàn)椴荒褪芘囵B(yǎng)過程中的剪切力,最 終導(dǎo)致Peak-VCD相對(duì)其他細(xì)胞更低。Vi-CELL BLU全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過使用聚焦質(zhì)控品完成自動(dòng)對(duì)焦(如下圖所示),之后細(xì)胞樣品檢測(cè)都在同一焦平面下完成。然后通過檢測(cè)L10粒徑質(zhì)控標(biāo)樣的平均粒徑結(jié)果是否在標(biāo)稱值±10%范圍內(nèi),以此判斷自動(dòng)對(duì)焦好壞。同時(shí),可把L10粒徑質(zhì)控品作為質(zhì)量控制標(biāo)樣,定期監(jiān)測(cè)儀器對(duì)焦?fàn)顟B(tài)是否正常,以此保證所有的細(xì)胞樣品都是在同一焦平面下檢測(cè),提高細(xì)胞平均直徑檢測(cè)的準(zhǔn)確性。聚焦質(zhì)控品和儀器自動(dòng)對(duì)焦示意圖同一個(gè)CHO細(xì)胞三次測(cè)試結(jié)果(考察細(xì)胞密度、活率和直徑的重復(fù)性)若您希望更多地了解Vi-CELL BLU全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀,請(qǐng)撥打400-821-8935和我們聯(lián)系。*本產(chǎn)品僅供工業(yè)和科研使用,不用于臨床診斷
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- 2023-01-14 16:41:53如何提高細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)試的準(zhǔn)確性,及細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在高產(chǎn)穩(wěn)定CHO細(xì)胞株開發(fā)中的應(yīng)用回顧
- 01如何提高細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析的準(zhǔn)確性?姚金龍貝克曼庫爾特高級(jí)應(yīng)用專員講座簡(jiǎn)介:在各種細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析方法中,臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)無疑是細(xì)胞活率分析的金標(biāo)準(zhǔn)。目前,通過臺(tái)盼藍(lán)染色分析細(xì)胞活率的方法包括:傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板法,也有市場(chǎng)上很普遍的插片式半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,以及無需手動(dòng)混勻和染色的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀。其中,后兩個(gè)分析儀器的出現(xiàn),不僅很大程度地解放了人力,同時(shí)相比于顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板法會(huì)更省時(shí),更合規(guī),所以被各大制藥企業(yè)所使用。而全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀更是在工藝開發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控方面表現(xiàn)出特有的優(yōu)勢(shì),即減少了人為的樣品吹打混勻和臺(tái)盼藍(lán)染色操作誤差,而且每種細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)化的測(cè)試條件,提高了儀器間數(shù)據(jù)的一致性而廣受歡迎。但是大家在使用這些儀器一段時(shí)間后,可能會(huì)遇到這樣一些問題,譬如:自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的測(cè)試結(jié)果為何有時(shí)和血球計(jì)數(shù)板的結(jié)果對(duì)不上,我該相信哪一個(gè)?細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)試標(biāo)樣沒有問題,但一檢測(cè)細(xì)胞怎么就不行了呢?為何同樣都是CHO細(xì)胞,同事測(cè)試結(jié)果是符合預(yù)期的,我的為何就不行呢?以上問題其實(shí)歸結(jié)一下都是我們測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性的問題,如何減小測(cè)試方法的人為誤差?如何提高我們使用的細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀的測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性?這些問題都將在此次講座中和大家一起來探討交流。02高產(chǎn)穩(wěn)定CHO細(xì)胞株構(gòu)建策略劉玉梅上海復(fù)宏漢霖生物醫(yī)藥有限公司高級(jí)研究員講座簡(jiǎn)介:探討影響穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建要素,包括載體,宿主細(xì)胞等?;谄脚_(tái)優(yōu)化篩選方式,在stable pool基礎(chǔ)上結(jié)合高通量技術(shù)進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株篩選,分享快速開發(fā)案例,實(shí)現(xiàn)快速、高效、穩(wěn)定細(xì)胞株篩選。
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- 2018-12-02 18:20:27貼壁培養(yǎng)細(xì)胞株怎么才能將細(xì)胞從培養(yǎng)瓶上取干凈
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- 2018-03-04 11:19:22tcr基因重排檢測(cè)到單克隆重排
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