【概述】

本方案依據(jù)GB/T 22400-2008《原料乳中三聚氰胺快速檢測(cè)液相法》，測(cè)試原料乳中的三聚氰胺含量。用乙腈作為原料乳中的蛋白質(zhì)沉淀劑和三聚氰胺提取劑，強(qiáng)陽離子交換色譜柱分離，GX液相色譜-紫外檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。

一、主要儀器和試劑

a. LC220GX液相色譜儀，紫外檢測(cè)器；

b. SCX（強(qiáng)陽離子交換）柱，250mm*4.6mm 5μm；

c. 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品；

d. 乙腈（色譜純）。

二、實(shí)驗(yàn)方法

2.1 色譜條件

2.2 試劑配制

a. 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（1000 mg/L）：

稱取100mg（準(zhǔn)確至0.1mg）三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用水完全溶解后，100mL容量瓶中定容至刻度，混勻，4℃條件下避光保存，有效期為1個(gè)月。

b. 標(biāo)準(zhǔn)溶液A（200 mg/L）：

準(zhǔn)確移取20.0mL標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。

c. 標(biāo)準(zhǔn)溶液B（0. 50mg/L）：

準(zhǔn)確移取0.25mL標(biāo)準(zhǔn)溶液A于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。

2.3 按下表分別配置高標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線系列濃度和低標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線系列濃度。

2.4 樣品處理

稱取混合均勻的15g（精確至0.01g）原料乳樣品，置于50mL具塞刻度試管中，加入30mL乙腈，劇烈振蕩6min，加水定容至滿刻度，充分混勻后靜置3min，用一次性注射器吸取上清液用針式過濾器過濾后待測(cè)。

三、實(shí)驗(yàn)圖譜匯總

3.1 實(shí)驗(yàn)圖譜

標(biāo)準(zhǔn)樣品圖譜

原料乳樣品譜圖

空白試樣譜圖

空白加標(biāo)譜圖

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

高濃度曲線

低濃度曲線

3.3 重復(fù)性測(cè)試

3.4 結(jié)果計(jì)算

式中：

X——原料乳中三聚氰胺的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；

c ——從校準(zhǔn)曲線得到的三聚氰胺溶液的濃度，單位為毫克每升（mg/L）；

V——試樣定容體積，單位為毫升（mL）；

M——樣品稱量質(zhì)量，單位為克（g）。

原料乳中未檢出三聚氰胺，加標(biāo)回收率計(jì)算如下：

標(biāo)簽：高效液相色譜儀三聚氰胺