本篇文集將分別從入門指南篇、AdvanceBio 全流程解決方案、AdvanceBio AAA 色譜柱分類介紹如何確保氨基酸分析獲得優(yōu)異的選擇性，以助力獲取準(zhǔn)確的分析結(jié)果。精準(zhǔn)定量氨基酸分析研究的完整工作流程及應(yīng)用案例，進(jìn)而“柱”力提高生物藥行業(yè)關(guān)鍵質(zhì)量屬性。

入門指南篇

AdvanceBio 氨基酸分析柱使用了 C18 硅膠顆粒填料，該填料經(jīng)過化學(xué)改性，具有高 pH 穩(wěn)定性。氨基酸分離在高 pH 條件下效率更高，并且這種改善相比于之前的氨基酸分析解決方案顯著延長了色譜柱在這些流動相條件下的使用壽命。為了盡可能發(fā)揮這一改進(jìn)的優(yōu)點(diǎn)，注意切勿將色譜柱儲存在流動相 A 中。短期儲存應(yīng)置于流動相 B 中；長期儲存應(yīng)置于 100% 乙腈中。

安捷倫 AdvanceBio 全流程解決方案

助您獲得準(zhǔn)確的分析結(jié)果

Agilent AdvanceBio 氨基酸分析（AAA）全程解決方案將 Agilent InfinityLab 系列液相色譜儀和色譜柱技術(shù)的優(yōu)勢與成熟的柱前衍生化相結(jié)合，有助于優(yōu)化工作流程效率。它是 AdvanceBio 系列產(chǎn)品中的一員，旨在為蛋白質(zhì)、抗體、偶合物、新生物實(shí)體和生物藥物的完整表征提供一致、卓越的性能。

這一完善的單供應(yīng)商解決方案（包括化學(xué)品/標(biāo)準(zhǔn)品、色譜柱和應(yīng)用支持）可實(shí)現(xiàn)快速、靈敏的自動化氨基酸分析。該方案是基于最新的 InfinityLab 系列液相色譜儀和色譜柱技術(shù)。Agilent 1290/1260 Infinity II 樣品瓶進(jìn)樣器的自動化在線衍生化省略了繁瑣的手動操作流程，能夠提供可重現(xiàn)的反應(yīng)結(jié)果。AdvanceBio AAA 色譜柱的分析速度和分離度與亞 2 μm 色譜柱相當(dāng)，而反壓僅為亞 2 μm 色譜柱的 50%，并減少了色譜柱堵塞問題。

AdvanceBio AAA 溶液由用于氨基酸衍生化的經(jīng)過驗(yàn)證的鄰苯二甲醛/9-芴甲氧羰酰氯（OPA/FMOC）試劑發(fā)展而來。這些試劑與 AdvanceBio AAA 色譜柱和標(biāo)準(zhǔn)品結(jié)合，提供了一種兼具分析速度和靈敏度的理想氨基酸定量和定性分析方法。根據(jù)本文所述的方案使用時，AdvanceBio AAA 溶液能夠幫助用戶分離通常存在于蛋白質(zhì)/肽水解產(chǎn)物中的氨基酸。

AdvanceBio AAA 色譜柱

可確保氨基酸分析獲得優(yōu)異的選擇性

AdvanceBio AAA 色譜柱基于安捷倫創(chuàng)新的 2.7 μm 表面多孔顆粒填料（SPP）Poroshell 技術(shù)，這種顆粒填料由 1.7 μm 的實(shí)心核和 0.5 μm 的多孔殼層組成。

2.7 μm SPP 的柱效為亞 2 μm 全多孔顆粒填料的 80%–90%，而反壓比后者降低了 40%–50%。與全多孔顆粒填料相比，SPP 具有更窄的粒徑分布，這使柱床更均勻，并能減小色譜柱中的擴(kuò)散。同時，較薄的多孔殼層實(shí)現(xiàn)了較低的傳質(zhì)阻力。此外，由于色譜柱中含有一個 2 μm 篩板，因此它們的抗堵塞能力與 3.5 μm 和 5 μm 色譜柱相同。

直到目前，所有二氧化硅型 SPP 材料在 pH 較高的緩沖液（包括磷酸鹽緩沖液）中的壽命仍然有限。為獲得更長的壽命，必須對基礎(chǔ)顆粒填料進(jìn)行表面改性或特殊的鍵合改性。使用獨(dú)特工藝對表面進(jìn)行化學(xué)改性，形成一個有機(jī)層以避免硅膠在高 pH 條件下溶解。

快速穩(wěn)定的氨基酸分離

具有亞 2 μm 色譜柱的速度和分離度，反壓最多降低 50 %

采用 2 μm 篩板，使色譜柱對“臟”樣品的耐受性更強(qiáng)

獨(dú)特的化學(xué)改性，具有高 pH 穩(wěn)定性和更長的色譜柱壽命

保護(hù)柱選件可延長色譜柱壽命，減少您的運(yùn)行成本

效率始終如一，分析信心十足

能夠在 600 bar 和 5 mL/min 下運(yùn)行，具有更快的速度和更高分離度

具有進(jìn)樣器編程功能，可實(shí)現(xiàn)自動化在線衍生化

基于二極管陣列技術(shù)的高靈敏度紫外檢測，在同步多波長檢測中具有出色的靈敏度

在鑒定和峰純度分析中可選用全譜檢測

可靈活用于其他 LC 或 UHPLC 應(yīng)用，與 HPLC 完全兼容

訂購信息

安捷倫提供各種色譜柱，

可滿足您的氨基酸分析所需：

此外，本篇應(yīng)用文集中還包含細(xì)胞培養(yǎng)基和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)品中氨基酸組分的測定、使用 Agilent AdvanceBio AAA 色譜柱進(jìn)行自動化氨基酸分析等應(yīng)用簡報。

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