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黃曲霉毒素危害: 黃曲霉毒素是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒的代謝產(chǎn)物,它們具有很強(qiáng)的致癌性,主要存在于藥材谷物堅(jiān)果棉籽以及動物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中其毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氰化物砷化物和有機(jī)農(nóng)藥的毒性,其中以B1毒性Zda當(dāng)人攝入量大時,可發(fā)生急性中毒,出現(xiàn)急性肝炎出血性壞死肝細(xì)胞脂肪變性和膽管增生當(dāng)微量持續(xù)攝入,可造成慢性中毒,生長障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生 國家重視程度: 近年來,各級食品藥品監(jiān)管部門不斷加大中藥生產(chǎn)流通監(jiān)管力度,努力保持中藥質(zhì)量總體穩(wěn)定 國家食品藥品監(jiān)督管理局關(guān)于規(guī)范中藥生產(chǎn)經(jīng)營秩序嚴(yán)厲查處違法違規(guī)行為的通知(國食藥監(jiān)安[2012]187號中,要求加強(qiáng)對重金屬及有害元素農(nóng)藥殘留黃曲霉毒素等安全性指標(biāo)的檢測和控制,切實(shí)保證中藥材質(zhì)量和安全,另要求企業(yè)具備與生產(chǎn)品種相適應(yīng)的檢驗(yàn)設(shè)備和能力,嚴(yán)把質(zhì)量檢驗(yàn)關(guān) 國家藥品安全十二五規(guī)劃,規(guī)劃中明確提出開展藥品快速檢驗(yàn)技術(shù)研究,搭建檢驗(yàn)技術(shù)共享平臺加快推進(jìn)藥品快速檢驗(yàn)技術(shù)在基層的應(yīng)用,配置快速檢驗(yàn)設(shè)備加強(qiáng)縣級機(jī)構(gòu)快速檢驗(yàn)?zāi)芰ㄔO(shè)的要求 中藥中黃曲霉毒素的檢測方法: 2010版藥典附錄IX V 黃曲霉毒素測定采用GX液相色譜法,另外增補(bǔ)藥典描述該法檢測建立增加柱后光化學(xué)衍生法 華安麥科作為國內(nèi)Z早從事霉菌毒素檢測研究的高新技術(shù)企業(yè)對黃曲霉毒素檢測也有深刻的探索研究,下面就我們的實(shí)踐和大家分享一下,免疫親和柱-GX液相色譜法-柱后光化學(xué)衍生等內(nèi)容 原理: 樣品經(jīng)甲醇-水提取,提取液經(jīng)過濾稀釋,濾液經(jīng)過含有黃曲霉毒素特異抗體的免疫親和柱層析凈化,黃曲霉毒素交聯(lián)在層析介質(zhì)中的抗體上,此抗體對黃曲霉毒素B1B2G1G2具有專一性,用水將免疫親和柱上雜質(zhì)除去,以甲醇通過免疫親和柱洗脫,再經(jīng)光化學(xué)衍生器柱后衍生,以提高檢測準(zhǔn)確性 主要試劑及耗材: ToxinFast®氣控操作架:含氣泵 ToxinFast®黃曲霉毒素免疫親和柱1ml或3ml ToxinFast®光化學(xué)衍生器 ToxinFast®玻璃微纖維濾紙 :直徑11cm孔徑1.5µm ToxinFast®玻璃試管:直徑12mm,長75mm,無熒光特性 ToxinFast®注射器:10ml20ml 檢測步驟: 樣品粉碎提取洗脫液進(jìn)樣親和柱凈化化學(xué)衍生檢測數(shù)值(做過液相的都知道這些步驟的,在這里就簡單提一下,主要是為什么用到氣控操作架和化學(xué)衍生器在下面解釋一下?。?氣控操作架的使用說明: 在樣品粉碎后需要過親和柱凈化,也就是怎么方便親和柱使用操作的問題,氣控操作架能有效地提高這個環(huán)節(jié)的工作效率(很方便操作的),如圖示: 1連接組裝好的氣控操作架,將免疫親和柱注射器針筒與氣控操作架連接, 2 將處理后的溶液上樣; 3 調(diào)節(jié)空氣泵旋鈕以控制流速,使樣液以1-2d/s的速度流出; 4,待樣液完全排干,用去離子水或蒸餾水以2-3d/s的流速洗滌兩次,每次10ml; 5,待液體完全排干,將樣品瓶置于親和柱下方,上樣1ml甲醇以1d/s的速度流出至完全排干 以上操作步驟是用免疫親和柱--GX液相法檢測中藥中黃曲霉毒素的必經(jīng)步驟,如使用氣控操作架就能很好的固定親和柱并以可控流速操作,既GX也能使操作誤差減到Z小 華安麥科ToxinFast®氣控操作架具有6支可控支流,能同時有效檢測多個樣本,還適用于 1ml和3ml多種規(guī)格免疫親和柱 為什么使用光化學(xué)衍生器? 由于黃曲霉具有較強(qiáng)的紫外吸收和產(chǎn)生熒光的特性,因此可以進(jìn)行HPLC-紫外或熒光檢測,但是同時黃曲霉毒素中的B1G1由于其在含水的流動相中容易產(chǎn)生熒光淬滅,因此在很多的實(shí)驗(yàn)中都會采用衍生法測定黃曲霉毒素 衍生的方法也很多:有柱前的,柱后的,在線的,由于在線的柱后光化學(xué)衍生有明顯的優(yōu)勢,所以現(xiàn)在被增補(bǔ)為藥典的檢測方法,優(yōu)勢主要在于(無需任何化學(xué)試劑對人員無傷害;無需人員直接操作避免誤差; 無需擔(dān)心衍生液腐蝕檢測器) 希望這個分享可以給大家做黃曲霉毒素檢測時提供小小的幫助 歡迎各位做黃曲霉毒素檢測的老師與華安麥科聯(lián)系交流,可從官網(wǎng) http://www.magnech.com查詢聯(lián)系方式

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