1. 用 PDQuest軟件或肉眼比對,找出感興趣的蛋白點(diǎn),并做好標(biāo)記和記錄
2. 用 MilliQ水沖洗膠 2 次
3. 用色譜純甲醇和 MilliQ水沖洗 Ep 管
4. 將槍頭(200l)下端剪去,使其內(nèi)徑略小于蛋白斑點(diǎn)的直徑,用色譜純甲醇和MilliQ水沖洗槍頭
5. 對準(zhǔn)斑點(diǎn)ZY小心將蛋白切割下來,放入Ep 管,MilliQ水漂洗 2 次,如膠塊 太大,將其切成 1 x 1 mm 的膠片
6. 將切好的點(diǎn)做好標(biāo)記和記錄,置- 80 保存或凍干后- 20 存放
注意事項(xiàng):
1. 盡量避免皮膚和頭發(fā)的角蛋白的污染,在操作過程中應(yīng)戴一次性的 PE 手套 (不用乳膠手套)和帽子
2. 不要將膠長期存放于乙酸溶液中
3. Ep 管及染膠的容器必須用甲醇和水充分清洗,尤其應(yīng)與進(jìn)行Western blotting 的容器分開,以避免 casein 或 BSA 的污染
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