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2018-11-18 10:00 984閱讀次數(shù)

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• 血液對(duì)氧磷酶1有機(jī)磷酸酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

  主要用途HL血液對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)對(duì)氧磷酶1反應(yīng)系統(tǒng)中，水解有機(jī)磷酸，釋放出對(duì)硝基苯產(chǎn)物，出現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物和人體血液樣品（血漿、血清等）對(duì)氧磷酶1的有機(jī)磷酸酶活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。保存方式保存HL底物液（ReaHLntB）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或96孔板：用于比色的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于比色分析[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 血液對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  血液對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2015-02-28 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 組織對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性定量試劑盒說(shuō)明書(shū)

  主要用途組織對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)對(duì)氧磷酶1反應(yīng)系統(tǒng)中，水解有機(jī)磷酸，釋放出對(duì)硝基苯產(chǎn)物，出現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用光度法來(lái)測(cè)定組織樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物和人體組織裂解懸液樣品對(duì)氧磷酶1的有機(jī)磷酸酶活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景對(duì)氧磷酶（parapxonase；PON；EC3.1.8.1）是一種水解酯類(lèi)（esters）、有機(jī)磷酸酯（organophosphate）和內(nèi)酯（lactone）的多態(tài)性酶，分成三個(gè)亞型：PON1、PON2、PON3。結(jié)構(gòu)同源性在基因?qū)用嫔线_(dá)70%，在氨基酸層面上達(dá)65%。其中PON1，為鈣離子依賴(lài)性和高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein；HDL）相關(guān)性糖蛋白，含有354氨基酸，43Kd分子量，分布在肝臟、腎臟、小腸和血清（50毫克/升）中。具有有機(jī)磷酸酶（organophosphtase）、磷酸三酯酶（phosphotriesterase）、芳香酯酶（arylesterase）和硫內(nèi)酯酶（thiolactonase）等多重活性：PON1與HDL結(jié)合，水解各種LDL和HDL上的氧化性磷酯，以及芳香族羧酸酯、芳香族和脂肪族內(nèi)酯等，例如殺蟲(chóng)劑對(duì)硫磷（parathion）降解產(chǎn)物對(duì)氧磷（paraoxon）、毒死蜱（chlorpyriphos）、神經(jīng)毒因子*（sarin）和*（soman）、同型半胱氨酸（homocysteine）硫內(nèi)酯、二氫香豆素（dihydrocourmarin；DHC）、γ-丁內(nèi)酯（γ-butyrolactone）等，延緩和YZ低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein；LDL）氧化作用，阻止脂質(zhì)過(guò)氧化物產(chǎn)生，保護(hù)脂蛋白以及質(zhì)膜受到氧化損傷，達(dá)到抗粥樣硬化（antiatherogenic）、、抗氧化的功能。PON1活性降低與慢性腎衰、糖尿病、外周神經(jīng)病變、家屬性高膽固醇血癥、心血管疾病、肝纖維化等有關(guān)。PON2為44Kd分子量，分布在腦、肝臟、肺、腎臟、睪丸等大多數(shù)組織中，但血清中測(cè)不到。PON2具有水解芳香酯和內(nèi)酯酶的功能，但不能水解有機(jī)磷酸。具有細(xì)胞內(nèi)抗氧化作用，預(yù)防粥樣硬化等功能。PON3為40Kd分子量，主要分布在肝臟中，少量在腎臟中。主要水解各種內(nèi)酯和環(huán)狀羧酸酯，具有抗氧化功能?；谌斯ず铣傻孜飳?duì)硝基苯磷酸二乙酯（diethyl-p-nitrophenylphosphate），在對(duì)氧磷酶1的作用下，水解產(chǎn)生對(duì)硝基苯（p-nitrophenol）和磷酸二乙酯（diethylphosphate），通過(guò)對(duì)硝基苯產(chǎn)物吸收峰值的變化（405nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析對(duì)氧磷酶1的有機(jī)磷酸酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測(cè)

  要用途細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ劑存在下，受到PP1去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品包括免疫沉淀復(fù)合物和粗提或部分純化酶樣品的蛋白磷酸化酶1活性及其YZ劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景蛋白磷酸化酶1（proteinphosphatase1；PP1；EC3.1.3.48），又稱(chēng)為1型蛋白絲/蘇氨酸磷酸化酶，是7個(gè)主要絲/蘇氨酸磷酸化酶（包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6）成員之一，從酵母到人類(lèi)高度進(jìn)化保留。其參與調(diào)節(jié)多種重要的細(xì)胞生理功能，包括糖原代謝、細(xì)胞分裂、肌肉收縮、信號(hào)傳導(dǎo)、神經(jīng)元功能、轉(zhuǎn)錄、翻譯等，以及與HIV-1轉(zhuǎn)錄過(guò)程的調(diào)節(jié)，并且與老年性癡呆等多種疾病密切相關(guān)。PP1分子結(jié)構(gòu)表面的3個(gè)凹槽及β12-β13Loop環(huán)結(jié)構(gòu)，是底物與YZ劑的結(jié)合部位；其催化亞體為37kd，調(diào)節(jié)亞體有2種：目標(biāo)亞體和YZ亞體?；谔禺愋缘孜锾窃姿峄竌，在PP2AYZ劑福司曲星（fostriecin；FOS）存在的情況下，受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠（malachitegreen）染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，在分光光度儀下（660nm波長(zhǎng)）產(chǎn)生峰值的變化，由此測(cè)定蛋白磷酸化酶1（PP1）的特異活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無(wú)損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等，本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī)，方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標(biāo)準(zhǔn)品（reagentE）6微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一：血漿樣品1．準(zhǔn)備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二：血清樣品1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2．抽取2毫升血液，置于儲(chǔ)存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三：組織樣本準(zhǔn)確稱(chēng)取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進(jìn)酶標(biāo)儀，置零8．取出酶標(biāo)板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10．即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè)，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]

  2024-09-29 05:34

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• 植物堿性焦磷酸酶活性比色法法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途植物堿性焦磷酸酶（AlkalinePyrophosphatase）活性比色法法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用無(wú)機(jī)焦磷酸，在堿性焦磷酸酶去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍(lán)顯色反應(yīng)后峰值的變化，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種植物組織，包括種子、球莖（bulb）、塊莖（tuber）、根（root）、種葉（coleoptile）和葉片裂解懸液樣品或純化以及粗提的酶蛋白的堿性焦磷酸酶活性及其YZ劑的檢測(cè)。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景焦磷酸酶（Pyrophosphatase；PPase；；EC3.6.1.1），又稱(chēng)為無(wú)機(jī)焦磷酸酶（inorganicpyrophosphatase），屬于磷酸酶家族，包括磷酸單酯酶（phosphomonoesterase）、磷酸二酯酶（phosphodiesterase）等。通過(guò)釋放磷酸根，參與DNA合成、RNA合成、輔酶合成、鈣吸收、骨形成、氨基酸合成和脂肪酸代謝的激活等代謝活動(dòng)。焦磷酸酶分為堿性和酸性，前者作用于合成代謝，而后者作用于分解反應(yīng)。焦磷酸酶催化無(wú)機(jī)焦磷酸水解產(chǎn)生2個(gè)磷酸根離子的反應(yīng)，為能量釋放反應(yīng)（exergonicreaction）。在植物中，尤其碳4或碳3植物的葉片中，活性Z高。在固碳還原和光合作用起著重要作用成為碳4植物通路的指標(biāo)。基于底物無(wú)機(jī)焦磷酸，在堿性條件下，受到堿性焦磷酸酶的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍(lán)顯色反應(yīng)后，在分光光度儀下（660nm波長(zhǎng)）產(chǎn)生峰值的變化，由此測(cè)定堿性焦磷酸酶的活性。[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

  Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無(wú)損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等，本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī)，方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標(biāo)準(zhǔn)品（reagentE）6微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一：血漿樣品1．準(zhǔn)備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二：血清樣品1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2．抽取2毫升血液，置于儲(chǔ)存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三：組織樣本準(zhǔn)確稱(chēng)取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進(jìn)酶標(biāo)儀，置零8．取出酶標(biāo)板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10．即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè)，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]

  2024-09-29 11:52

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其YZ劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景細(xì)胞張力蛋白同源在10號(hào)染色體缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又稱(chēng)為多發(fā)性晚期腫瘤突變基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一個(gè)腫瘤YZ基因，位于染色體10q23.3，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物515kb，蛋白產(chǎn)物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個(gè)氨基酸左右的與骨架蛋白張力蛋白（tenasin）、輔助蛋白（auxilin）同源的區(qū)域，是一種雙重特異性磷酸酶，能使酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、防止細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)和分開(kāi)裂解、參與細(xì)胞凋亡、粘附、遷移、浸潤(rùn)，控制細(xì)胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，調(diào)控Akt/PKB信號(hào)通路等功能。PTEN基因突變和缺失將導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，以及多發(fā)性錯(cuò)構(gòu)瘤綜合征（Cowdensyndrome）等?；诘孜锪字＜〈?3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解產(chǎn)生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同時(shí)釋放出游離磷酸根，進(jìn)而與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)產(chǎn)生其峰值的變化（660nm波長(zhǎng)），以此測(cè)算PTEN的活性。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升緩沖液（ReagentC）1毫升陰性液（ReagentD）1毫升反應(yīng)液（ReagentE）200微升終止液（ReagentF）1毫升顯色液（ReagentG）4毫升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）500微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentE）和顯色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸；顯色液（ReagentG）避免光照，有效保證6月用戶(hù)自備15毫升離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品處理和保存的容器細(xì)胞刮脫棒：用于貼壁細(xì)胞脫離（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品收集培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進(jìn)冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞（5X106細(xì)胞）小心加入3毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），覆蓋生長(zhǎng)表面小心抽去清理液使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞加入3毫升清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細(xì)胞從這一步驟開(kāi)始）放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取2微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：樣品須澄清）設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為660nm，并置零準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管按下表分別加入陰性液（ReagentD）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）到每個(gè)離心管，混勻?qū)?至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表管號(hào)陰性液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）測(cè)定體系標(biāo)準(zhǔn)磷濃度10100微升20微摩爾/升225微升75微升15微摩爾/升350微升50微升10微摩爾/升475微升25微升5微摩爾/升5100微升00標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)測(cè)定移取20微升陰性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：縱座標(biāo)（Y軸）為吸光單位（A）；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度（微摩爾/升）樣品背景測(cè)定移取20微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度樣品活性測(cè)定移取10微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育2分鐘加入10微升反應(yīng)液（ReagentE）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度計(jì)算樣品活性{[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）]X5（體系倍數(shù)）X樣品稀釋倍數(shù)}÷10（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）＝納摩爾磷/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝納摩爾磷/毫克/分鐘注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為25次操作，包括5次標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定操作時(shí)，避免污染母液操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸樣品切忌使用磷酸緩沖液和脫氧膽酸納處理比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底如果用戶(hù)沒(méi)有660nm波長(zhǎng)，可以使用600至660nm的任一波長(zhǎng)替代顯示綠色表明具有較強(qiáng)酶活性空白對(duì)照讀數(shù)應(yīng)小于0.2建議待測(cè)樣本蛋白濃度為100微克/5微升；如果樣本酶活性過(guò)低或過(guò)高，則可以增加或降低樣本量；（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性單位濃度定義：在37℃溫度下，pH8.0的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）釋放1微摩爾的磷本公司提供系列磷酸化酶檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)準(zhǔn)確[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 血液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測(cè)

  主要用途血液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解，釋放出巰基基團(tuán)，使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物和人體血液樣品（血漿、血清等）樣品脂肪酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶（lipase；EC3.1.1.3）是可溶性糖蛋白分子，催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵（esterbond）的水解。在人體中，其來(lái)源于產(chǎn)生。在消化系統(tǒng)中，脂肪酶（Lipase），裂解脂肪分子，例如甘油三酯（triglyceride；TAG），產(chǎn)生1個(gè)分子甘油（glycerol）和3個(gè)分子游離脂肪酸分子（fattyacid）。脂肪酶異常與炎、管阻塞、癌、腎病、唾液腺炎癥、腸道阻塞等相關(guān)；異常降低則與中脂肪酶產(chǎn)生細(xì)胞的性損傷有關(guān)。脂肪酶的活性檢測(cè)是臨床診斷的指標(biāo)之一?；谥久冈谒肿拥膮⑴c下，催化三丁酸二巰基丙醇（dimercaptopropanoltributyrate；DMPTB或BALB）的水解，產(chǎn)生二巰基丙醇（dimercaptopropanol；DMP），并釋放出巰基基團(tuán)（－SH），進(jìn)而與Ellman試劑5，5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過(guò)其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途組織酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后，產(chǎn)生多巴色素，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物組織，尤其是皮膚、眼睛和黑色素瘤組織裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè)，以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一種單酚單加氧酶（monophenolmonooxygenase），又稱(chēng)為單酚酶（monophenolase）或單酚二羥基苯丙氨酸：O2氧化還原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有雙功能的含銅糖蛋白，廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中，其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白，而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞（melanocyte）或色素細(xì)胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通過(guò)催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羥基化（o-hydroxylation）反應(yīng)變成L-多巴（L-dopamine），進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），從而由多巴色素（dopachrome）轉(zhuǎn)化為黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線(xiàn)可以激活酪氨酸酶活性，嚴(yán)重時(shí)，會(huì)引起色素沉著（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，產(chǎn)生多巴色素，通過(guò)其吸光值的變化（475nm波長(zhǎng)），來(lái)定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后，產(chǎn)生多巴色素，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物細(xì)胞，尤其是黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè)，以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一種單酚單加氧酶（monophenolmonooxygenase），又稱(chēng)為單酚酶（monophenolase）或單酚二羥基苯丙氨酸：O2氧化還原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有雙功能的含銅糖蛋白，廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中，其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白，而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞（melanocyte）或色素細(xì)胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通過(guò)催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羥基化（o-hydroxylation）反應(yīng)變成L-多巴（L-dopamine），進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），從而由多巴色素（dopachrome）轉(zhuǎn)化為黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線(xiàn)可以激活酪氨酸酶活性，嚴(yán)重時(shí)，會(huì)引起色素沉著（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，產(chǎn)生多巴色素，通過(guò)其吸光值的變化（475nm波長(zhǎng)），來(lái)定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 血液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  血液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-03-30 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙?；痯53多肽底物，經(jīng)過(guò)SIRT1脫乙?；?，被位點(diǎn)特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?；福╤istonedeacetylase；HDAC）家屬分成三類(lèi)共20多個(gè)蛋白：種類(lèi)I（classI）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細(xì)胞核中；種類(lèi)II（classII）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里；上述兩大種類(lèi)的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。種類(lèi)III（classIII）為NAD+輔助因子必需，又稱(chēng)為sirtuins，與酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型賴(lài)氨酸脫乙?；福╨ysyl-deacetylase）。催化賴(lài)氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡。基于人工合成的乙?；痯53（379至382氨基酸位點(diǎn)）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來(lái)標(biāo)記乙?；痯53多肽底物，其次進(jìn)行脫乙?；琙后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺（波長(zhǎng)405nm），由此來(lái)定量測(cè)定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。用戶(hù)自備磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：用于清洗組織樣品15毫升錐形離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品操作和保存的容器（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于組織細(xì)胞預(yù)處理培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)物孵育96孔板或100微升1厘米光徑比色皿：用于反應(yīng)和比色的容器酶標(biāo)儀或分光光度儀：用于比色分析注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為20次操作，包括背景對(duì)照2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過(guò)程中，背景測(cè)定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要5．樣品處理時(shí)，避免使用蛋白酶YZ劑、PMSF、烷基胺（alkylamine）等6．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行比色測(cè)定7．濾波器可以使用波長(zhǎng)400nm替代405nm8．測(cè)定值由低到高變化；酶動(dòng)法測(cè)定可以持續(xù)60分鐘9．測(cè)定值吸光讀數(shù)越高，表明酶活性越高10．比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底11．待測(cè)樣本為核蛋白樣品，其蛋白濃度為50微克/20微升；待測(cè)樣本為組織裂解懸液，其蛋白濃度為200微克/20微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）12．如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度13．沉默調(diào)節(jié)蛋白1單位活性定義為：在30℃，pH8.0條件下，每分鐘內(nèi)能夠釋放1微摩爾對(duì)硝基苯酚所需的酶量作為一個(gè)活性單位14．本公司提供系列組蛋白脫乙?；笝z測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒

  血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)特異反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）還原后峰值的，即采用比色法來(lái)測(cè)定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種（動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等）血液樣品中包括白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血漿和血清等葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（Glucose-6-phosphatedehydrogenase；G6PD）是一種細(xì)胞漿中的酶，參與磷酸戊糖代謝通路，通過(guò)維持還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）水平，提供細(xì)胞還原性能量，進(jìn)而保持谷胱甘肽水平，幫助細(xì)胞，例如紅細(xì)胞，防止氧化損傷。同時(shí)NADPH的產(chǎn)生，促進(jìn)組織細(xì)胞（例如肝臟、乳腺、脂肪組織、腎上腺等）生物合成脂肪酸、類(lèi)異戊二烯等。在植物中，存在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的多種異構(gòu)體，位于細(xì)胞漿、質(zhì)體基質(zhì)（plastidicstroma）、和過(guò)氧化體。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺陷將導(dǎo)致急性溶血性貧血，即蠶豆病。基于葡萄糖-6-磷酸（D-glucose-6-phosphate）在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的作用下，轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖酸內(nèi)脂（6-phosphoglucono-δ-lactone）產(chǎn)物后，同時(shí)其輔酶因子氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate；β-NADP）轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate；β-NADPH），通過(guò)測(cè)定吸光值的變化（340nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的總活性。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

  細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶（protease）又稱(chēng)為肽酶（peptidase）或蛋白質(zhì)酶（proteinase），是一類(lèi)蛋白水解的酶，屬于水解酶（hydrolase）家屬中一員，存在于所有生物體內(nèi)。通過(guò)肽鍵的水解，進(jìn)行蛋白質(zhì)的分解代謝，參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補(bǔ)體系統(tǒng)、凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)和分化等一系列生理活動(dòng)。蛋白酶基本分成6類(lèi)，包括絲氨酸（serine）、蘇氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金屬（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等；還可以分成內(nèi)切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。細(xì)菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān)；作為外毒素（exotoxin），也是細(xì)菌致病的毒力（virulence）因子；同時(shí)細(xì)菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等?；诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein），在細(xì)菌蛋白酶的催化水解下，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物，通過(guò)其吸收峰值的變化（440nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容裂解液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升終止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升陰性液（ReagentE）微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測(cè)細(xì)菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107細(xì)胞/毫升）轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm，并置零實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將反應(yīng)液（ReagentB）置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液（ReagentE）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照樣品活性測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入100微升待測(cè)樣品（蛋白總量100微克）（注意：樣品需澄清）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：沉淀物為橘紅色）加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品讀數(shù)計(jì)算樣品活性注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全系統(tǒng)檢測(cè)時(shí)，背景測(cè)定只需一次樣品須澄清，至關(guān)重要比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底建議待測(cè)樣本的蛋白濃度為100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義：在37℃下，pH7.5的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細(xì)菌生理生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人 （Human） 對(duì)氧磷酶 ELISA 檢測(cè)試劑盒

  人(Human)對(duì)氧磷酶ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：paraoxonase試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知paraoxonase濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將paraoxonase和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中paraoxonase的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：1600uKat/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗paraoxonase抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：1600uKat/L（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800uKat/L（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400uKat/L（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200uKat/L（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100uKat/L（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50uKat/L（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0uKat/L（空白對(duì)照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（uKat/L）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的paraoxonase標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線(xiàn)，樣品的paraoxonase含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-1600uKat/L4、敏感度：1.0uKat/L[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人對(duì)氧磷酶（PON）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

  人對(duì)氧磷酶（PON）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2014-05-27 00:00

  專(zhuān)利

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• 人 （Human） 對(duì)氧磷酶 （PON） ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

  人（Human）對(duì)氧磷酶（PON）ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：paraoxonase試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知paraoxonase濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將paraoxonase和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中paraoxonase的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：1600uKat/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗paraoxonase抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9．按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：1600uKat/L（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800uKat/L（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400uKat/L（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200uKat/L（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100uKat/L（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50uKat/L（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0uKat/L（空白對(duì)照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9．在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（uKat/L）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的paraoxonase標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線(xiàn)，樣品的paraoxonase含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-1600uKat/L4、敏感度：1.0uKat/L[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人對(duì)氧磷酶（PON）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  電話(huà)：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人對(duì)氧磷酶（PON）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人PON單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的PON與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人PON，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，PON濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中PON濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：800ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入4ml蒸餾水混勻，配成200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄吖苤形?00ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線(xiàn)圖上查出相應(yīng)PON含量即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的PON檢測(cè)濃度小于0.16ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人PON。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于9.6％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2014-12-25 00:00

  期刊論文

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