ELISPOT細(xì)胞因子檢測技術(shù)應(yīng)用
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本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2018-09-27 10:00 1072閱讀次數(shù)
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目前,ELISPOT已被用于檢測藥物、化學(xué)制劑及其它CK復(fù)合物的特性及功能等方面,因此為體內(nèi)免疫功能的調(diào)節(jié)效應(yīng)提供了檢測依據(jù)。近幾年來,ELISPOT技術(shù)在腫瘤疫苗評(píng)價(jià)試驗(yàn)、免疫監(jiān)測及免疫學(xué)研究中越來越被廣泛地使用。在抗腫瘤免疫及相關(guān)領(lǐng)域中的應(yīng)用在許多研究中,該技術(shù)已被用于免疫動(dòng)物外周血淋巴細(xì)胞中抗原特異的細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)的數(shù)量檢測。近期,ELISPOT技術(shù)已用于分析和評(píng)價(jià)從傳染病病人的PBMC中檢測肽特異的T淋巴細(xì)胞以及在癌癥病人中誘導(dǎo)腫瘤特異的T細(xì)胞的疫苗試驗(yàn)。ELISPOT檢測T細(xì)胞反應(yīng)時(shí)敏感性、特異性和可重復(fù)性都很高,操作簡單迅速,需要少量標(biāo)本,在檢測抗原特異性細(xì)胞數(shù)量的同時(shí)也反應(yīng)其功能,并與臨床結(jié)果相關(guān)。ELISPOT平板可以提前大量準(zhǔn)備,移液、洗板和讀板都可自動(dòng)化,因而大批量檢查也可做到快速GX。在與與其他方法的比較后,ELISPOT很可能成為定量分析腫瘤或病毒特異性的T細(xì)胞反應(yīng)的。在抗感染免疫中的應(yīng)用CTL在抗病毒感染的免疫應(yīng)答中占有主要地位,而CD4+輔助性T細(xì)胞亞群Th1/Th2的平衡在抵御病毒感染中起著同樣重要的作用。在HIV研究方面,由MHC-1類分子加工的不同抗原經(jīng)CTL識(shí)別并產(chǎn)生免疫應(yīng)答在控制HIV-1感染中同樣起重要作用。利用ELISPOT方法檢測CK如IFN2γ就可以進(jìn)一步了解到針對(duì)HIV特異的CTL應(yīng)答及相關(guān)免疫信息。此外,ELISPOT法還用于評(píng)價(jià)由HIV-1感染引起粘膜的CD4+T細(xì)胞免疫應(yīng)答以及HIVgp120g與霍亂毒素共表達(dá)的DNA疫苗的免疫源性。在其他研究中,ELISPOT還用來檢測通過直腸免疫低劑量甲肝疫苗而產(chǎn)生的細(xì)胞免疫應(yīng)答。在急性的自限性肝炎中,以Th1為主的應(yīng)答促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫,且在控制病毒感染及延緩慢性疾病的發(fā)展方面有重要作用。在許多抗細(xì)菌免疫研究中,該方法也發(fā)揮了重要作用。例如:應(yīng)用ELISPOT試驗(yàn)證實(shí)表達(dá)大腸桿菌MalE蛋白的重組卡介苗(rBCG.MalE)誘導(dǎo)的T細(xì)胞應(yīng)答是CD4+T細(xì)胞依賴的,rBCG.MalE誘導(dǎo)的特異CD4+T細(xì)胞應(yīng)答存在Th1/Th2平衡轉(zhuǎn)換現(xiàn)象,并逐步形成Th1/Th2混合應(yīng)答。細(xì)胞因子檢測技術(shù)的臨床應(yīng)用目前,已經(jīng)實(shí)現(xiàn)臨床檢驗(yàn)的領(lǐng)域是對(duì)肺結(jié)核(TB)的檢測。而Z近的研究熱點(diǎn)就是對(duì)于移植的預(yù)測。受體對(duì)供體特異性HLA抗體一直以來都是器官移植的一大障礙,因?yàn)樗鼈兊拇嬖诓粌H介導(dǎo)超急性排斥反應(yīng)而且還可導(dǎo)致急性排斥反應(yīng)。因此,HLA抗體的存在限制了異體抗原敏感患者對(duì)供體器官的需要,因而增加了等待移植的時(shí)間。在心臟,肝臟和腎臟異體移植后早期出現(xiàn)的并發(fā)癥如急性排斥反應(yīng)與移植前存在的異體免疫臨床相關(guān)性迫切需要一種恰當(dāng)?shù)臋z測方法在器官移植前能了解受體對(duì)供體特異性體液免疫的功能狀態(tài)。在接受移植的人群中,部分因有多次輸血、或既往有異體移植失敗或多次妊娠史體內(nèi)曾經(jīng)存在陽性異體抗體,在他們接受異體移植時(shí),現(xiàn)有的檢測方法只能顯示他們對(duì)異體的免疫功能正常。但他們體內(nèi)存在記憶B淋巴細(xì)胞,一旦受到相應(yīng)HLA抗原的刺激則會(huì)喚起免疫反應(yīng),這不僅影響著移植的結(jié)果,甚至?xí)霈F(xiàn)危及患者生命的、與移植相關(guān)的并發(fā)癥。ELISPOT是一種強(qiáng)有效的檢測單個(gè)抗體分泌細(xì)胞的方法,具有很高的敏感性。因此,刺激記憶B淋巴細(xì)胞增殖、分化成漿細(xì)胞,并建立一種特異性ELISPOT方法檢測HLA抗體產(chǎn)生細(xì)胞是**手段。如果ELISPOT要進(jìn)一步推廣應(yīng)用,特別是臨床應(yīng)用,其標(biāo)準(zhǔn)化將是一個(gè)十分重要的問題。美國FDA和NIH等已經(jīng)開始建立ELISPOT的標(biāo)準(zhǔn)化流程,相信隨著ELISPOT技術(shù)的成熟、標(biāo)準(zhǔn)化程序的建立,它的應(yīng)用將更加廣泛。
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ELISPOT細(xì)胞因子檢測技術(shù)應(yīng)用
- 目前,ELISPOT已被用于檢測藥物、化學(xué)制劑及其它CK復(fù)合物的特性及功能等方面,因此為體內(nèi)免疫功能的調(diào)節(jié)效應(yīng)提供了檢測依據(jù)。近幾年來,ELISPOT技術(shù)在腫瘤疫苗評(píng)價(jià)試驗(yàn)、免疫監(jiān)測及免疫學(xué)研究中越來越被廣泛地使用。在抗腫瘤免疫及相關(guān)領(lǐng)域中的應(yīng)用在許多研究中,該技術(shù)已被用于免疫動(dòng)物外周血淋巴細(xì)胞中抗原特異的細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)的數(shù)量檢測。近期,ELISPOT技術(shù)已用于分析和評(píng)價(jià)從傳染病病人的PBMC中檢測肽特異的T淋巴細(xì)胞以及在癌癥病人中誘導(dǎo)腫瘤特異的T細(xì)胞的疫苗試驗(yàn)。ELISPOT檢測T細(xì)胞反應(yīng)時(shí)敏感性、特異性和可重復(fù)性都很高,操作簡單迅速,需要少量標(biāo)本,在檢測抗原特異性細(xì)胞數(shù)量的同時(shí)也反應(yīng)其功能,并與臨床結(jié)果相關(guān)。ELISPOT平板可以提前大量準(zhǔn)備,移液、洗板和讀板都可自動(dòng)化,因而大批量檢查也可做到快速GX。在與與其他方法的比較后,ELISPOT很可能成為定量分析腫瘤或病毒特異性的T細(xì)胞反應(yīng)的。在抗感染免疫中的應(yīng)用CTL在抗病毒感染的免疫應(yīng)答中占有主要地位,而CD4+輔助性T細(xì)胞亞群Th1/Th2的平衡在抵御病毒感染中起著同樣重要的作用。在HIV研究方面,由MHC-1類分子加工的不同抗原經(jīng)CTL識(shí)別并產(chǎn)生免疫應(yīng)答在控制HIV-1感染中同樣起重要作用。利用ELISPOT方法檢測CK如IFN2γ就可以進(jìn)一步了解到針對(duì)HIV特異的CTL應(yīng)答及相關(guān)免疫信息。此外,ELISPOT法還用于評(píng)價(jià)由HIV-1感染引起粘膜的CD4+T細(xì)胞免疫應(yīng)答以及HIVgp120g與霍亂毒素共表達(dá)的DNA疫苗的免疫源性。在其他研究中,ELISPOT還用來檢測通過直腸免疫低劑量甲肝疫苗而產(chǎn)生的細(xì)胞免疫應(yīng)答。在急性的自限性肝炎中,以Th1為主的應(yīng)答促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫,且在控制病毒感染及延緩慢性疾病的發(fā)展方面有重要作用。在許多抗細(xì)菌免疫研究中,該方法也發(fā)揮了重要作用。例如:應(yīng)用ELISPOT試驗(yàn)證實(shí)表達(dá)大腸桿菌MalE蛋白的重組卡介苗(rBCG.MalE)誘導(dǎo)的T細(xì)胞應(yīng)答是CD4+T細(xì)胞依賴的,rBCG.MalE誘導(dǎo)的特異CD4+T細(xì)胞應(yīng)答存在Th1/Th2平衡轉(zhuǎn)換現(xiàn)象,并逐步形成Th1/Th2混合應(yīng)答。細(xì)胞因子檢測技術(shù)的臨床應(yīng)用目前,已經(jīng)實(shí)現(xiàn)臨床檢驗(yàn)的領(lǐng)域是對(duì)肺結(jié)核(TB)的檢測。而Z近的研究熱點(diǎn)就是對(duì)于移植的預(yù)測。受體對(duì)供體特異性HLA抗體一直以來都是器官移植的一大障礙,因?yàn)樗鼈兊拇嬖诓粌H介導(dǎo)超急性排斥反應(yīng)而且還可導(dǎo)致急性排斥反應(yīng)。因此,HLA抗體的存在限制了異體抗原敏感患者對(duì)供體器官的需要,因而增加了等待移植的時(shí)間。在心臟,肝臟和腎臟異體移植后早期出現(xiàn)的并發(fā)癥如急性排斥反應(yīng)與移植前存在的異體免疫臨床相關(guān)性迫切需要一種恰當(dāng)?shù)臋z測方法在器官移植前能了解受體對(duì)供體特異性體液免疫的功能狀態(tài)。在接受移植的人群中,部分因有多次輸血、或既往有異體移植失敗或多次妊娠史體內(nèi)曾經(jīng)存在陽性異體抗體,在他們接受異體移植時(shí),現(xiàn)有的檢測方法只能顯示他們對(duì)異體的免疫功能正常。但他們體內(nèi)存在記憶B淋巴細(xì)胞,一旦受到相應(yīng)HLA抗原的刺激則會(huì)喚起免疫反應(yīng),這不僅影響著移植的結(jié)果,甚至?xí)霈F(xiàn)危及患者生命的、與移植相關(guān)的并發(fā)癥。ELISPOT是一種強(qiáng)有效的檢測單個(gè)抗體分泌細(xì)胞的方法,具有很高的敏感性。因此,刺激記憶B淋巴細(xì)胞增殖、分化成漿細(xì)胞,并建立一種特異性ELISPOT方法檢測HLA抗體產(chǎn)生細(xì)胞是**手段。如果ELISPOT要進(jìn)一步推廣應(yīng)用,特別是臨床應(yīng)用,其標(biāo)準(zhǔn)化將是一個(gè)十分重要的問題。美國FDA和NIH等已經(jīng)開始建立ELISPOT的標(biāo)準(zhǔn)化流程,相信隨著ELISPOT技術(shù)的成熟、標(biāo)準(zhǔn)化程序的建立,它的應(yīng)用將更加廣泛。[詳細(xì)]
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細(xì)胞因子的不同分類
- 主要是根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞分類和細(xì)胞因子的不同功能而產(chǎn)生的如下的分類:根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞種類不同分類1.單核因子(monokine) 主要由單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、G-CSF和M-CSF等。2.淋巴因子(lymphokine) 于命名,主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生,包括T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等。3.非淋巴細(xì)胞、非單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子 主要由和胸腺中的基質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等細(xì)胞產(chǎn)生,根據(jù)細(xì)胞因子主要的功能不同分類 1.集落刺激因子(colonystimulatingfactor,CSF) 根據(jù)不同細(xì)胞因子刺激造血干細(xì)胞或分化不同階段的造血細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中形成不同的細(xì)胞集落,分別命名為G(粒細(xì)胞)-CSF、M(巨噬細(xì)胞)-CSF、GM(粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)-CSF、Multi(多重)-CSF(IL-3)、SCF、EPO等。不同CSF不僅可刺激不同發(fā)育階段的造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞增殖的分化,還可促進(jìn)成熟細(xì)胞的功能?!?.白細(xì)胞介素(interleukinIL) 1979年開始命名。由淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞或其它非單個(gè)核細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,在細(xì)胞間相互作用、免疫調(diào)節(jié)、造血以及炎癥過程中起重要調(diào)節(jié)作用,凡命名的白細(xì)胞介素的cDNA基因克隆和表達(dá)均已成功,目前已報(bào)道IL-1-IL-15?!?.干擾素(interferonIFN) 1957年發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子,Z初發(fā)現(xiàn)某一種病毒感染的細(xì)胞能產(chǎn)生一種物質(zhì)可干擾另一種病毒的感染和復(fù)制,因此而得名。根據(jù)干擾素產(chǎn)生的來源和結(jié)構(gòu)不同,可分為IFN-α、INN-β和IFN-γ,他們分別由白細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和活化T細(xì)胞所產(chǎn)生。各種不同的IFN生物學(xué)活性基本相同,具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等作用?! ?.趨化因子家族(chemokinefamily) 包括兩個(gè)亞族:(1)C-X-C/α亞族,主要趨化中性粒細(xì)胞,主要的成員有IL-8、黑素瘤細(xì)胞生長刺激活性(GRO/MGSA)、血小板因子-4(PF-4)、血小板堿性蛋白、蛋白水解來源的產(chǎn)物CTAP-Ⅲ和β-thromboglobulin、炎癥蛋白10(IP-10)、ENA-78;(2)C-C/β亞族,主要趨化單核細(xì)胞,這個(gè)亞族的成員包括巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α)、MIP-1β、RANTES、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1/MCAF)、MCP-2、MCP-3和I-309?!?.腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactorTNF) Z初發(fā)現(xiàn)這種物質(zhì)能造成腫瘤組織壞死而得名。根據(jù)其產(chǎn)生來源和結(jié)構(gòu)不同,可分為TNF-α和TNF-β兩類,前者由單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,后者由活化T細(xì)胞產(chǎn)生,又名淋巴毒素(lymphotoxin,LT)。6.轉(zhuǎn)化生長因子-β家族(transforminggrowthfactor-βfamilyTGF-βfamily) 由多種細(xì)胞產(chǎn)生,主要包括TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGFβ1β2以及骨形成蛋白(BMP)等?! ?.其它細(xì)胞因子 如表皮生長因子(EGF)、血小板衍生的生長因子(PDGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、胰島素樣生長因子-I(IGF-1)、IGF-Ⅱ、白血病YZ因子(LIF)、神經(jīng)生長因子(NGF)、抑瘤素M(OSM)、血小板衍生的內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(PDECGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-α(TGF-α)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)等。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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常用臨床的細(xì)胞因子
- 常用臨床的細(xì)胞因子有:1、白介素(ILs),目前已經(jīng)基因重組問世的有IL1-IL11,其中研究Z多的為IL-2。IL-2是細(xì)胞間相互作用因子,可促進(jìn)活化的T、B細(xì)胞增殖,活化NK細(xì)胞及其他殺傷口細(xì)胞功能;2、干擾素(INK),已知干擾素有α、β、γ三種,是一組結(jié)構(gòu)功能緊密相關(guān)的糖蛋白分子。α干擾素是白細(xì)胞(T、B細(xì)胞、裸細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)產(chǎn)生的;β干擾素主要由纖維母細(xì)胞產(chǎn)生;γ干擾素是T細(xì)胞受T細(xì)胞絲裂原、特異抗原及IL-2刺激產(chǎn)生;3、腫瘤壞死因子(TNF),TNF-α是由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,TNF-β是由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生;4、集落刺激因子(CSF),是一類刺激各類造血干細(xì)胞生長和分化的因子。有多向CSF、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞CSF、巨噬細(xì)胞CSF和粒細(xì)胞CSF。它們對(duì)多種人腫瘤的細(xì)胞毒作用,并對(duì)多種腫瘤殺傷細(xì)胞和多種其余細(xì)胞因子的產(chǎn)生有激活效應(yīng)。服務(wù)內(nèi)容:凡購買本司目錄任何一種檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫、放射免疫),您只需將需要檢測的動(dòng)物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……)種類和檢測指標(biāo)(介素類、因子類)及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T)通知我司業(yè)務(wù)人員即可。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起,一周內(nèi)將檢測報(bào)告交到客戶手中![詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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HydroFlex洗板機(jī)在酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法(ELISpot)中的
- HydroFlex洗板機(jī)在酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法(ELISpot)中的[詳細(xì)]
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2010-12-06 00:00
其它
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乳制品包裝分析與檢測技術(shù)應(yīng)用
- 乳制品包裝分析與檢測技術(shù)應(yīng)用[詳細(xì)]
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2011-02-12 00:00
報(bào)價(jià)單
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茶葉中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)應(yīng)用實(shí)例
- 茶葉中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)應(yīng)用實(shí)例[詳細(xì)]
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2024-09-28 09:11
操作手冊(cè)
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超聲波檢測技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展
- 超聲波檢測技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展[詳細(xì)]
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2024-09-28 15:57
報(bào)價(jià)單
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小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒
- 小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
課件
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