本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2024-09-28 07:04 956閱讀次數(shù)

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  抗體催化的化學(xué)反應(yīng)：由抗體催化的化學(xué)反應(yīng)特異性高于酶，但催化速率低于常規(guī)的酶，只有l(wèi)010倍。但有一些未發(fā)現(xiàn)催化劑的反應(yīng)，如DielsAlder反應(yīng)也能被抗體催化。常規(guī)酶一般不能催化胺鍵水解，抗體酶能使胺鍵水解的速度增加25萬(wàn)倍。訖今為止，已發(fā)現(xiàn)和證明的由抗體催化的化學(xué)反應(yīng)不下40種?！　】贵w催化的制備：抗體酶是抗原決定簇處于轉(zhuǎn)換態(tài)結(jié)構(gòu)的抗體。因?yàn)檗D(zhuǎn)換態(tài)分子極不穩(wěn)定無(wú)法制備抗體，所以催化性抗體的獲得主要是通過(guò)設(shè)計(jì)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)換態(tài)的類似物作為半抗原，與載體蛋白交聯(lián)后，免疫動(dòng)物，獲得針對(duì)半抗原的抗體，從中篩選具有催化活性的抗體。篩選催化性單克隆抗體所用的ELISA與篩選一般抗體的方法不完全一樣，應(yīng)根據(jù)催化反應(yīng)的特點(diǎn)而進(jìn)行適當(dāng)?shù)男薷摹＝?jīng)典的方法是先篩選出與底物或半抗原結(jié)合的抗體，然后從中再篩選出有催化活力的抗體，這種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力。利用催化性抗體對(duì)底物的催化活性，對(duì)底物進(jìn)行適當(dāng)修飾，使催化反應(yīng)的產(chǎn)物可直接表現(xiàn)抗體的催化活性，這樣可以簡(jiǎn)化檢測(cè)步驟?！　∞D(zhuǎn)換態(tài)類似物半抗原的設(shè)計(jì)，必須了解催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)換態(tài)模型的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。催化抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)上與轉(zhuǎn)換態(tài)互補(bǔ)的某些催化基團(tuán)的形成，能穩(wěn)定轉(zhuǎn)換態(tài)分子。此外有人把單克隆抗體分子用化學(xué)修飾方法引入一些活性基團(tuán)，提高催化性抗體的催化與親和效率。應(yīng)用噬菌體抗體文庫(kù)也可以篩選催化性抗體，可省去制備轉(zhuǎn)換態(tài)類似物的復(fù)雜過(guò)程，直接用底物從文庫(kù)中篩選有催化活性的抗體片段。如用半抗原免疫后制備的文庫(kù)或文庫(kù)經(jīng)過(guò)多次混雜重組，則可以得到更高的親和力的催化性抗體。抗獨(dú)特型抗體也用于催化性抗體的制備，用酶作為抗原免疫小鼠獲得能夠封閉酶活性位點(diǎn)的單克隆抗體，將這個(gè)抗體用蛋白酶除去Fc片段，用Fab免疫其他品系的小鼠或家兔，得到的抗體具有相應(yīng)的酶催化活性。[詳細(xì)]

  2024-09-28 07:04

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