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末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶技術(shù)應(yīng)用

本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-10-23 10:30 950閱讀次數(shù)

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末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶技術(shù)應(yīng)用CAS號(hào):9027-67-2鈉鈣交換蛋白2NCX2抗體.髓鞘相關(guān)糖蛋白a/bMAG-a抗體.神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE抗體.人生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白(GHBP)elisa檢測(cè)技術(shù)人酸性磷酸酶(ACP)elisa檢測(cè)技術(shù)人HLAMP-2elisa試劑盒生產(chǎn)囊泡相關(guān)膜蛋白1VAMP-1抗體.人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa檢測(cè)技術(shù)人鳥(niǎo)苷酸交換因子(GEF)elisa檢測(cè)技術(shù)腎上腺髓質(zhì)素(N端20肽)ADM抗體.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶技術(shù)應(yīng)用分子量:60000級(jí)別:BR來(lái)源:大腸桿菌細(xì)胞,含有編碼牛胸腺末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶的基因濃度:20u/ul活性定義:是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol脫氧核糖核酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量酶活性分析混合物:66mM二甲胂酸鉀(PH7.2),1mMCoCL2,0.01%(v/v)TritonX-100,10uMoligo(dT)10,1mMdTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP保存液組分:100mM醋酸鉀(PH6.8)、2mMβ-巰基乙醇,0.01%(v/v)TritonX-100和50%(v/v)甘油5×反應(yīng)緩沖液:1M二甲胂酸鉀、125mMTris,0.05%(v/v)TritonX-100,5mMCoCL2(PH7.2,25℃)YZ劑:金屬螯合劑、銨、氯化物、碘化物和磷酸鹽離子失活:加入EDTA,70℃加熱10分鐘質(zhì)量保證:測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染注意:由于含有CoCL2,TdT反應(yīng)緩沖液不能與下游應(yīng)用兼容,需采用柱離心法或苯酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法純化反應(yīng)混合物,除去CoCL2性狀:懸浮液,重組酶。末端轉(zhuǎn)移酶(Terminaltransferase,TdT)是一種無(wú)需模板的DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子的3'羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為T(mén)dT的底物。一般操作是:先在載體上打開(kāi)一單個(gè)位點(diǎn),把它與末端轉(zhuǎn)移酶和某一dNTP(如dATP)一起保溫以使添尾,另一待插入的外源DNA片段則用互補(bǔ)的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接著使上述兩種都接上互補(bǔ)單鏈尾的DNA片段彼此退火,使形成一雜合載體來(lái)轉(zhuǎn)化受體菌。雜合載體中的裂隙或切口可被受全菌所修復(fù)。用途:生化研究。催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端標(biāo)記保存:-20°C末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶技術(shù)應(yīng)用

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