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精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┖挟a(chǎn)品說明書

本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-11-18 10:00 981閱讀次數(shù)

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主要用途精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┦且环N旨在使用赫斯特33258和熒光素標(biāo)記的花生凝集素雙重?zé)晒馊旧夹g(shù),分析精子活力以及頂體狀態(tài)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種動(dòng)物或人體精子細(xì)胞以及凍存精子細(xì)胞的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運(yùn)動(dòng)能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomalreaction)功能的評(píng)價(jià)是精子分析的重要指標(biāo),也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。其中頂體反應(yīng),是指當(dāng)精子接近卵子實(shí)施授精時(shí),精子頭部前半端的帽狀結(jié)構(gòu)頂體,釋放出溶解酶,以便精子和卵子的膜融合。頂體反應(yīng)測(cè)試是一項(xiàng)穩(wěn)定的精子功能參數(shù),可以用于預(yù)測(cè)受精成功率。因此頂體的結(jié)構(gòu)完整性(intact)是評(píng)價(jià)的主要標(biāo)志,也是不育癥和避孕藥物研究的對(duì)象。使用DNA敏感性熒光染料赫斯特33258(Hoechst33258)和熒光素標(biāo)記的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinatedpeanutArachishypogaeaagglutinin;PNA-FITC)雙重?zé)晒馊旧夹g(shù),是精子活力,以及精子頭部頂體狀態(tài)分析和授精效率評(píng)價(jià)的Z常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,分析精子活力,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特點(diǎn),受到活體精子細(xì)胞(包括游動(dòng)性和非游動(dòng)性精子)的排斥,而容易進(jìn)入死亡精子細(xì)胞。其次使用熒光素標(biāo)記的花生凝集素染料,與頂體外膜糖蛋白上的半乳糖殘基(β-D-galactosylresidue)的結(jié)合,顯示完整性(未反應(yīng)性u(píng)nreacted)頂體,同時(shí)可以應(yīng)用于受精時(shí)的精卵反應(yīng)。雙染的作用,以幫助區(qū)分生理性反應(yīng)性頂體缺失(loss)或病理性退行性頂體缺失。通過常用的熒光顯微鏡(激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)530nm)便可清晰觀察到綠色頂體狀態(tài)(status)。

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