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精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-03-30 00:00 541閱讀次數(shù)
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精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色
- 主要用途精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)染色試劑是一種旨在使用伊紅染料致死亡精子著色從而確定細胞活力的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,著色清晰,建立自動化和標準化體系。技術(shù)背景在男科學(xué)(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomalreaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。使用伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)染色技術(shù),是精子活力分析的Z常用的方法?;诨铙w精子細胞的膜完整性,作為細胞染色劑之一的伊紅受到活體精子細胞(包括游動性和非游動性精子)的排斥,而死亡精子細胞攝入染料顯示紅色,同時苯胺黑作為復(fù)染,使背景呈現(xiàn)深色,增強對比度。通過常用的一般光學(xué)顯微鏡(無需相差顯微鏡;phase-contrastmicroscope)便可清晰觀察到細胞染色情況,同時可以定量計數(shù)。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-03-30 00:00
課件
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精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┖挟a(chǎn)品說明書(中文版)
- 精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┖挟a(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-07 00:00
專利
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精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┖挟a(chǎn)品說明書
- 主要用途精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┦且环N旨在使用赫斯特33258和熒光素標記的花生凝集素雙重?zé)晒馊旧夹g(shù),分析精子活力以及頂體狀態(tài)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞以及凍存精子細胞的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomalreaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。其中頂體反應(yīng),是指當(dāng)精子接近卵子實施授精時,精子頭部前半端的帽狀結(jié)構(gòu)頂體,釋放出溶解酶,以便精子和卵子的膜融合。頂體反應(yīng)測試是一項穩(wěn)定的精子功能參數(shù),可以用于預(yù)測受精成功率。因此頂體的結(jié)構(gòu)完整性(intact)是評價的主要標志,也是不育癥和避孕藥物研究的對象。使用DNA敏感性熒光染料赫斯特33258(Hoechst33258)和熒光素標記的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinatedpeanutArachishypogaeaagglutinin;PNA-FITC)雙重?zé)晒馊旧夹g(shù),是精子活力,以及精子頭部頂體狀態(tài)分析和授精效率評價的Z常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,分析精子活力,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特點,受到活體精子細胞(包括游動性和非游動性精子)的排斥,而容易進入死亡精子細胞。其次使用熒光素標記的花生凝集素染料,與頂體外膜糖蛋白上的半乳糖殘基(β-D-galactosylresidue)的結(jié)合,顯示完整性(未反應(yīng)性unreacted)頂體,同時可以應(yīng)用于受精時的精卵反應(yīng)。雙染的作用,以幫助區(qū)分生理性反應(yīng)性頂體缺失(loss)或病理性退行性頂體缺失。通過常用的熒光顯微鏡(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長530nm)便可清晰觀察到綠色頂體狀態(tài)(status)。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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蘇木精-伊紅染色使用說明
- 蘇木精-伊紅染色使用說明【試劑配制】蘇木精染液蘇木精配方很多,現(xiàn)介紹常用的是Harris蘇木精染液。蘇木精1g95%乙醇溶液10ml鉀礬或銨礬20g蒸餾水200ml0.5g冰醋酸8.0ml先將蘇木精溶于乙醇溶液。鉀礬加溫溶解燒瓶后,將倒入,繼續(xù)加熱1min。加熱停止后,緩慢加入0.5g,再繼續(xù)加熱煮沸1min。迅速將燒瓶移人冰水內(nèi)。染液冷卻呈深色時,加冰醋酸過濾后即可使用。棕色磨口瓶保存。室溫保存2個月,4℃保存4個月左右。1.0%伊紅染液將1.0g水溶性伊紅溶100ml蒸餾水中,每100ml伊紅液中加0.2ml冰醋酸?!緦嶒灢襟E】(1)石蠟片經(jīng)脫蠟、水化,單層細胞片經(jīng)漂洗固定。(2)蘇木素染液染5~10min(染色時間與溫度、染液成熟度有關(guān))。(3)自來水換數(shù)次,標本轉(zhuǎn)為深藍色。(4)分色:浸入1%稀鹽酸乙醇液(100ml75%乙醇溶液中加1d鹽酸)分色數(shù)秒鐘至1min,脫去多余的藍浮色,標本轉(zhuǎn)為淡紫紅色鏡下呈紫紅色,胞質(zhì)無色或灰藍色(后者為幼稚細胞)。(5)藍化:自來水浸洗10min或數(shù)小時,甚至更長,標本從淡紫紅色轉(zhuǎn)為鮮艷的淺藍色。注意:為縮短自來水浸洗時間,使蘇木素更加顯色,可將標本置淡氨水溶液(400ml自來水加氨水2滴)中10min,切片很快呈鮮艷的淺藍色,經(jīng)此處理的標本,要經(jīng)自來水充分浸洗,否則會影響伊紅染色。(6)蒸餾水漂洗。(7)伊紅染液5~10min,進行對比染色。(8)用蒸餾水洗去玻片的浮色,經(jīng)70%、80%、90%梯度乙醇溶液脫水各一次,再分別經(jīng)95%、100%乙醇溶液脫水各兩次,每次1min。(9)浸入二甲苯兩次,每次1min。中性樹膠封片【注意事項】(1)Harris蘇木精染液即配即用,不能久存,宜少量配用。(2)HE染色時,除大批標本采取浸染外,一般以滴染為好。染液反復(fù)使用而被水稀釋,使特異性染色和染色速度下降。(3)蘇木精染液出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,是染液變質(zhì)的一種指示,但濾液仍可使用一段時間。蘇木精染液效力判斷方法為:將蘇木精染液滴人自來水中,若染液出現(xiàn)由紫紅色變?yōu)樗{色的現(xiàn)象,即證實染液有效。(4)蘇木精染色后,鹽酸乙醇溶液分色是關(guān)鍵步驟:以細胞核染色清晰、細胞質(zhì)基本無色為佳。核過染,延長分色時間;染色太淺,則應(yīng)重新染色。(5)伊紅染色后,低濃度乙醇溶液脫水后極易脫色:為防止此現(xiàn)象的發(fā)生,標本脫水至95%乙醇溶液后,再轉(zhuǎn)入95%乙醇溶液配制的1%伊紅液中復(fù)染3~5min分鐘,然后繼續(xù)脫水透明,可獲得滿意效果。(6)無水酒精脫水后,轉(zhuǎn)入二甲苯中出現(xiàn)混濁現(xiàn)象,為脫水不徹底的表現(xiàn)。此時應(yīng)退回乙醇溶液或更換100%乙醇重新脫水。(7)封片時,蓋玻片要大于切片。切片裸露,標本很快褪色。(8)市售95%乙醇溶液常含雜質(zhì),只能用于脫水或清潔玻片。(9)二甲苯是一種易揮發(fā)的有毒液體,實驗者要帶眼罩、口罩、手套,在通風(fēng)的地方操作。[詳細]
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2018-11-26 10:00
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藍色熒光細胞核染色分析試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2016-03-17 00:00
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2015-04-29 00:00
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2015-03-30 00:00
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2015-08-25 00:00
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2015-03-30 00:00
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- 冰凍切片神經(jīng)元高爾基法快速染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-03-30 00:00
應(yīng)用文章
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活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 主要用途活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長波長的熒光染料特異性地聚集在線粒體,并呈現(xiàn)紅色,用于分析和觀察線粒體活性與形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種線粒體(動物、人體、昆蟲等)的形態(tài)觀察、活性探測和定位標記。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定,滯留持久。技術(shù)背景線粒體是細胞中重要的細胞器,其主要功能是提供細胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體大量存在于代謝旺盛的細胞中,如動物的心肌,肝,腎等器官和組織的細胞中。大量制備線粒體就是從這些器官組織中提取,或從組織培養(yǎng)細胞中提取。在光學(xué)顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細線。線粒體熒光探針MitoTrackerRED,是一種含有硫醇(Thiol)氯甲基基團的熒光染料,自由通過細胞膜,選擇性地聚集在線粒體。它可以對活細胞進行直接染色,在580nm波長可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位,以檢測線粒體活性。[詳細]
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2018-11-18 10:00
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細胞骨架(肌動蛋白微絲;F-ACTIN)綠色熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-01-29 00:00
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細胞骨架(肌動蛋白微絲;F-ACTIN)綠色熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-01-22 00:00
應(yīng)用文章
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石蠟切片膠原纖維天狼猩紅(SIRIUS RED)染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2014-12-22 00:00
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冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試劑盒產(chǎn)品說明書 (中文版)
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2015-03-30 00:00
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