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細(xì)胞培養(yǎng)減少污染的方法
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2018-09-02 10:00 1307閱讀次數(shù)
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細(xì)胞培養(yǎng)減少污染的方法●很多實(shí)驗(yàn)者都不bother自己洗手,酒精一噴就去實(shí)驗(yàn)了,這極端錯(cuò)誤。個(gè)人經(jīng)驗(yàn):你仔細(xì)洗手比噴酒精效果還好。**的是肥皂/香皂仔仔細(xì)細(xì)的洗手,一直到手腕,指甲縫都要洗。洗兩遍是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。然后手上噴酒精?!裼腥舜┌虢匦浒状蠊尤プ鰧?shí)驗(yàn),白大褂袖口要長,**是袖口扎緊的那種,如果不能的話,把袖口窩向手臂。裸露的手腕部分一定也要噴酒精。戴上手套后手請避免接觸工作臺外面,如果不得已接觸,那再噴酒精。寧可手套酒精味多一些?!衲门囵B(yǎng)瓶和培養(yǎng)液時(shí)候請托下面拿,切忌不要拿瓶頸部位?!衩刻鞂?shí)驗(yàn)開始時(shí)候,超凈臺/實(shí)驗(yàn)間照20分鐘紫外是不錯(cuò)的選擇。●有一點(diǎn)要注意的是,超凈臺里面的東西一定要盡量少放。放的越多越容易污染?!癖M量避免操作時(shí)候說話,尤其是嚴(yán)禁細(xì)胞房打鬧說笑?!衩刻煊^察細(xì)胞狀態(tài),不要總想著save,而是發(fā)現(xiàn)細(xì)胞不對勁(比如生長緩慢)就立即扔掉。有些(比如支原體)污染,鏡檢是看不到的,但是細(xì)胞的生長異常。所以如果細(xì)胞生長異常,那么請扔掉,同時(shí)由于支原體空氣傳播,請檢查自己的培養(yǎng)液和培養(yǎng)箱是不是污染。
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細(xì)胞培養(yǎng)減少污染的方法
- 細(xì)胞培養(yǎng)減少污染的方法●很多實(shí)驗(yàn)者都不bother自己洗手,酒精一噴就去實(shí)驗(yàn)了,這極端錯(cuò)誤。個(gè)人經(jīng)驗(yàn):你仔細(xì)洗手比噴酒精效果還好。**的是肥皂/香皂仔仔細(xì)細(xì)的洗手,一直到手腕,指甲縫都要洗。洗兩遍是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。然后手上噴酒精?!裼腥舜┌虢匦浒状蠊尤プ鰧?shí)驗(yàn),白大褂袖口要長,**是袖口扎緊的那種,如果不能的話,把袖口窩向手臂。裸露的手腕部分一定也要噴酒精。戴上手套后手請避免接觸工作臺外面,如果不得已接觸,那再噴酒精。寧可手套酒精味多一些?!衲门囵B(yǎng)瓶和培養(yǎng)液時(shí)候請托下面拿,切忌不要拿瓶頸部位。●每天實(shí)驗(yàn)開始時(shí)候,超凈臺/實(shí)驗(yàn)間照20分鐘紫外是不錯(cuò)的選擇?!裼幸稽c(diǎn)要注意的是,超凈臺里面的東西一定要盡量少放。放的越多越容易污染?!癖M量避免操作時(shí)候說話,尤其是嚴(yán)禁細(xì)胞房打鬧說笑?!衩刻煊^察細(xì)胞狀態(tài),不要總想著save,而是發(fā)現(xiàn)細(xì)胞不對勁(比如生長緩慢)就立即扔掉。有些(比如支原體)污染,鏡檢是看不到的,但是細(xì)胞的生長異常。所以如果細(xì)胞生長異常,那么請扔掉,同時(shí)由于支原體空氣傳播,請檢查自己的培養(yǎng)液和培養(yǎng)箱是不是污染。[詳細(xì)]
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- 污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵常見的污染類型細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物,而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì),包括生物和化學(xué)物質(zhì)。1、細(xì)菌污染細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了KJ素,也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴?。Z常見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH改變。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,Z后變圓脫落死亡。2、支原體污染支原體是介于細(xì)菌與病毒之間能獨(dú)立生活的Z小微生物,Z小直徑0.2μm,一般過濾CJ無法去除它,光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu)。開始不易發(fā)現(xiàn),能在偏堿條件下生存,對青霉素有抗藥性。多吸附于細(xì)胞表面或散在于細(xì)胞之間。培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后,部分敏感細(xì)胞可見細(xì)胞生長增殖變慢,部分細(xì)胞變圓,從瓶壁脫落。但多數(shù)細(xì)胞污染后無明顯變化,或略有變化,若不及時(shí)處理,還會產(chǎn)生交叉污染。3、病毒污染組織細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如果沒有除去潛在的病毒,就會產(chǎn)生病毒污染。目前,從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。4、真菌污染真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中Z常見的一種,Z常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后,可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點(diǎn),有的散在生長,培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁;倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯(cuò)在細(xì)胞之間或培養(yǎng)基中,有的呈鏈狀排列。真菌污染后,細(xì)胞生長變慢,但Z后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。5、非同種細(xì)胞污染由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yán)格分開,往往會使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。目前,世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無效。非細(xì)胞培養(yǎng)物所造成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)生,大多是由于細(xì)胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不徹底而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所致。[詳細(xì)]
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