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人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)說明書
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本文由 上海恒遠ELISA試劑盒供應商 整理匯編
2018-11-15 10:03 2184閱讀次數(shù)
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人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶((AMPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.3U/L-16U/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平。用純化的人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入AMPK,再與HRP標記的AMPK抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的AMPK呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(32U/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟操作步驟操作步驟操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。16U/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液8U/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液4U/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液2U/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液1U/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)操作程序總結(jié)操作程序總結(jié)操作程序總結(jié)::::計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事注意事注意事注意事項項項項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期保存條件及有效期保存條件及有效期保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月上海恒遠生物科技有限公司主營ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒。進口原裝的,進口分裝的,國產(chǎn)的均有。價位也分高中低來供客戶選擇。產(chǎn)品有任何質(zhì)量問題,我們都是承諾免費包換的!公司是成了了專門的技術(shù)部門,與同行業(yè)相比,實力雄厚,聘請了6位留學博士。以下是我們對客戶的承諾:1.有質(zhì)量問題免費包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結(jié)果,等等?。?.全程技術(shù)指導。(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會即時給你去電)3.提供免費代測的服務。(你只需把標本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時間是5天左右)4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務!公司網(wǎng)址:www.shhybio.comwww.shhykit.com聯(lián)系人:莫小姐聯(lián)系電話:021-60515410,18221290082傳真:021-64881400歡迎廣大科研朋友來電來函!
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人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)說明書
- 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶((AMPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.3U/L-16U/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平。用純化的人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入AMPK,再與HRP標記的AMPK抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的AMPK呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(32U/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟操作步驟操作步驟操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。16U/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液8U/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液4U/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液2U/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液1U/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)操作程序總結(jié)操作程序總結(jié)操作程序總結(jié)::::計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事注意事注意事注意事項項項項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期保存條件及有效期保存條件及有效期保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月上海恒遠生物科技有限公司主營ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒。進口原裝的,進口分裝的,國產(chǎn)的均有。價位也分高中低來供客戶選擇。產(chǎn)品有任何質(zhì)量問題,我們都是承諾免費包換的!公司是成了了專門的技術(shù)部門,與同行業(yè)相比,實力雄厚,聘請了6位留學博士。以下是我們對客戶的承諾:1.有質(zhì)量問題免費包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結(jié)果,等等?。?.全程技術(shù)指導。(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會即時給你去電)3.提供免費代測的服務。(你只需把標本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時間是5天左右)4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務!公司網(wǎng)址:www.shhybio.comwww.shhykit.com聯(lián)系人:莫小姐聯(lián)系電話:021-60515410,18221290082傳真:021-64881400歡迎廣大科研朋友來電來函![詳細]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊
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人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)檢測試劑盒
- 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-20 13:30
實驗操作
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大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒說明書
- 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0pg/ml-160pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平。用純化的大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK),再與HRP標記的磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(160pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。3.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。4.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。6.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。7.培養(yǎng)細胞檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。8.組織標本切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.80pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液4opg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液20pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液10pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液5pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液3.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。4.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。5.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。7.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。8.溫育:操作同3。9.洗滌:操作同5。10.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.11.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。12.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與大鼠其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。4.局限性:6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T[詳細]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)免疫分析
- 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.7U/L-32U/L使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平。用純化的大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入AMPK,再與HRP標記的AMPK抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的AMPK呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)濃度。[詳細]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
- 小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.5U/L-12U/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平。用純化的小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入AMPK,再與HRP標記的AMPK抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的AMPK呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)濃度。小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗體
- 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體英文名稱AMPKalpha-1中文名稱腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體別名MPactivatedproteinkinasealpha1catalyticsubunit;MPactivatedproteinkinasecatalyticalpha1chain;5'AMPactivatedproteinkinasecatalyticsubunitalpha1;AAPK1;acetylCoAcarboxylasekinase;AI194361;AI450832;AL024255;AMP-activatekinasealpha1subunit;AMP-activatedproteinkinase,catalytic,alpha-1;AMPK1;AMPKalpha1chain;AMPK;AMPK1;AMPKa1;AMPKalpha1;C130083N04Rik;cb116;EC2.7.11.1;HMGCoAreductasekinase;hormonesensitivelipasekinase;im:7154392;kinaseAMPKalpha1;MGC33776;MGC57364;PRKAA1;PRKAA1;ProteinkinaseAMPactivatedalpha1catalyticsubunit;SNF1-likeproteinAMPK;wu:fa94c10;AAPK1_HUMAN.腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體規(guī)格0.1ml0.2ml研究領(lǐng)域細胞生物神經(jīng)生物學激酶和磷酸酶Alzheimer's抗體來源Rabbit克隆類型Polyclonal交叉反應Human,Mouse,Rat,Chicken,Dog,Pig,Cow,Horse,產(chǎn)品應用WB=1:100-500IHC-P=1:100-500IHC-F=1:100-500(石蠟切片需做抗原修復)notyettestedinotherapplications.optimaldilutions/concentrations首ldbedeterminedbytheenduser.腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體分子量60kDa細胞定位細胞核細胞漿腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體性狀LyophilizedorLiquid腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體濃度1mg/1ml腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體免疫原KLHconjugatedsyntheticpeptidederivedfromhumanAMPKalpha1C-terminus腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體亞型IgG腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體純化方法affinitypurifiedbyProteinA腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPKα1抗體儲存液0.01MPBS,pH7.4with10mg/mlBSAand0.1%Sodiumazide[詳細]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊
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人磷酸化蛋白激酶A(P-PKA)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人磷酸化蛋白激酶A(P-PKA)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人P-PKA單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的P-PKA與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人P-PKA,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,P-PKA濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中P-PKA濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入4000pg/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應P-PKA含量即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的P-PKA檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人P-PKA。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人磷酸化蛋白激酶C(phos-PKC)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人磷酸化蛋白激酶C(phos-PKC)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人phos-PKC單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的phos-PKC與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人phos-PKC,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,phos-PKC濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中phos-PKC濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿至少作1:2稀釋(取50ul,加標本稀釋液50ul,稀釋2倍)。細胞上清至少10倍稀釋。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應phos-PKC含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的phos-PKC檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人phos-PKC。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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磷酸化活化復制因子2抗體
- 磷酸化活化復制因子2抗體[詳細]
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2015-01-19 00:00
選購指南
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大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
- 大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
課件
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小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
- 小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
課件
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大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
- 大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
期刊論文
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小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)檢測試劑盒
- 小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)檢測試劑盒[詳細]
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2015-08-13 00:00
安裝說明
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人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒
- 人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人蛋白激酶A(PKA)水平。用純化的人蛋白激酶A(PKA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入蛋白激酶A(PKA),再與HRP標記的蛋白激酶A(PKA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛋白激酶A(PKA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人蛋白激酶A(PKA)濃度。人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒操作步驟:標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為18ng/ml,12ng/ml,6.0ng/ml,3.0ng/ml,1.5ng/ml)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒高純度質(zhì)粒小量快速提取試劑盒離心柱型Turbo?NarI小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒脫氧核糖核酸酶DnaseI2000u/mgCAS:37326-33-3,透明質(zhì)酸酶,玻璃酸酶大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒CAS:82385-42-0,糖精鈉,可溶性糖精CAS:302-72-7,DL-α-丙氨酸,DL-α-氨基丙酸兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒礦物油(石蠟油)Mineraloil豚鼠主要組織相容性復合體(MHC/GPLA)ELISA試劑盒小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒人血凝素(HA)ELISA試劑盒人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒N-乙酰-L-半胱氨酸N-乙酰半胱氨酸硫酸鹽小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒考馬斯亮藍R250即用染液CAS:121714-22-5,鈣熒光探針Fluo-3,AMFluo-3,AMAnx瓊脂糖凝膠4FFAnxSepharose4FF人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒[詳細]
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2024-09-30 19:25
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人蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人PKA單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的PKA與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人PKA,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,PKA濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中PKA濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清或血漿測定前用標本稀釋液至少作1:50稀釋(取20ul,加標本稀釋液980ul,稀釋50倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入4000pg/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應PKA含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的PKA檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人PKA。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)英文說明書
- HumanActivatedcoagulationfactorⅫ(FⅫa)FORRESEARCHUSEONLYAssayrange:2.2U/L-80U/L96determinationsPurposeThiskitallowsforthedeterminationofFⅫaconcentrationsinHumanserum,cellculturesupernatesandotherbiologicalfluidsPrincipleoftheassayThekitassayHumanFⅫalevelinthesample,usePurifiedHumanFⅫaantibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddFⅫatowells,CombinedFⅫaantibodywhichWithHRPlabeled,becomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofHumanFⅫainthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.Materialsprovidedwiththekit1washsolution20ml×1bottle7StopSolution6ml×1bottle2HRP-Conjugatereagent6ml×1bottle8Standard(160U/L)0.5ml×1bottle3Microelisastripplate12well×8strips9Standarddiluent1.5ml×1bottle4Samplediluent6ml×1bottle10Instruction15ChromogenSolutionA6ml×1bottle11Closureplatemembrane26ChromogenSolutionB6ml×1bottle12Sealedbags1Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:80U/L5Standard150μlOriginaldensityStandard+150μlStandarddiluent40U/L4Standard150μl5Standard+150μlStandarddiluent20U/L3Standard150μl4Standard+150μlStandarddiluent10U/L2Standard150μl3Standard+150μlStandarddiluent5U/L1Standard150μl2Standard+150μlStandarddiluent2.Addsample:Setblankwellsseparately(blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame).testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl(samplefinaldilutionis5-fold),addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.Washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.Addenzyme:AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.Incubate:Operationwith3.8.Washing:Operationwith5.9.Color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionB50ultoeachwell,evadethelightpreservationfor10minat37℃10.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).11.Assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.StepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,incubatefor30minat37℃.Wash5time,AddHRP-Conjugatereagent,incubatefor30minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor10minat37℃.AddStopSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateCalculateTakethestandarddensityasthehorizontal,theODvalueforthevertical,drawthestandardcurveongraphpaper,FindoutthecorrespondingdensityaccordingtothesampleODvaluebytheSamplecurve,multipliedbythedilutionmultiple,orcalculatethestraightlineregressionequationofthestandardcurvewiththestandarddensityandtheODvalue,withthesampleODvalueintheequation,calculatethesampledensity,multipliedbythedilutionfactor,theresultisthesampleactualdensity.Importantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.washingbufferwillCrystallizationseparation,itcanbeheatedthewaterhelpsdissolvewhendilute.Washingdoesnotaffecttheresult.3.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.addsamplewithin5min,ifthenumberofsampleismuch,recommendtouseVolley.4.ifthetestingmaterialcontentisexcessivelyhigher(ThesampleODisbiggerthanthefirststandardwell),pleasediluteSample(n-fold),Pleasediluenteandmultipliedbythedilutionfactor.(×n×5).5.Closureplatemembraneonlylimitsthedisposableuse,toavoidcross-contamination.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.7.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.8.Allsamples,washingbufferandeachkindofreject首ldaccordingtoinfectivematerialprocess.9.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.Storageandvalidity1.Storage:2-8℃.2.validity:sixmonths[詳細]
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2018-09-19 10:00
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上海易利為您提供大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)說明書
- 上海易利生物技術(shù)有限公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物、儀器、試劑、耗材的公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科學領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應商之一,代理許多國際先進水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應用領(lǐng)域。公司的服務和業(yè)務網(wǎng)絡遍及全國,在同行獲得一致好評。特別是生物試劑和細胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實惠,進口原代細胞,專業(yè)培養(yǎng)基,常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基,細胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑,氨基酸,抗生素,維他命類產(chǎn)品品種齊全,試劑耗材種類繁多。并代理國內(nèi)外許多品牌等等。公司的規(guī)模和產(chǎn)品種類日益擴大和更新,我們一直秉承著代理優(yōu)質(zhì)品牌的產(chǎn)品,服務好每一位顧客,將ZxinZxian極n的科學技術(shù)和方法推薦顧客的服務宗旨為廣大客戶提供各類服務,產(chǎn)品、技術(shù)咨詢、國際國內(nèi)信息,每年組織大批員工出國學習,掌握國際先進的技術(shù)和信息。公司的理念是:為您提供全方位的產(chǎn)品及服務,產(chǎn)品價格極具競爭力。Z后,感謝您對我們的支持與信賴!同時也祝您的事業(yè)更上一層樓![詳細]
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2018-10-01 10:01
產(chǎn)品樣冊
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上海滬峰為您提供大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)說明書
- 上海泛柯生物科技有限公司是一家集經(jīng)銷批發(fā)、招商代理的有限責任公司,是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準注冊的企業(yè)。主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、毒素、移液器等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海滬峰生物科技擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,與國內(nèi)多家企業(yè)建立了良好的長期合作關(guān)系,在市場上樹立了公司的良好信譽和形象。[詳細]
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2024-09-28 07:04
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大鼠磷酸化細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(p-ERK)ELISA試劑盒
- 大鼠磷酸化細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(p-ERK)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠p-ERK單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的p-ERK與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠p-ERK,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,p-ERK濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中p-ERK濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應p-ERK含量即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的p-ERK檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠p-ERK。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2024-09-30 12:59
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