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人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒

本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編

2024-09-30 19:25 434閱讀次數(shù)

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人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人蛋白激酶A(PKA)水平。用純化的人蛋白激酶A(PKA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入蛋白激酶A(PKA),再與HRP標(biāo)記的蛋白激酶A(PKA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛋白激酶A(PKA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人蛋白激酶A(PKA)濃度。人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為18ng/ml,12ng/ml,6.0ng/ml,3.0ng/ml,1.5ng/ml)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒高純度質(zhì)粒小量快速提取試劑盒離心柱型Turbo?NarI小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒脫氧核糖核酸酶DnaseI2000u/mgCAS:37326-33-3,透明質(zhì)酸酶,玻璃酸酶大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒CAS:82385-42-0,糖精鈉,可溶性糖精CAS:302-72-7,DL-α-丙氨酸,DL-α-氨基丙酸兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒礦物油(石蠟油)Mineraloil豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA試劑盒小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒人血凝素(HA)ELISA試劑盒人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒N-乙酰-L-半胱氨酸N-乙酰半胱氨酸硫酸鹽小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒考馬斯亮藍(lán)R250即用染液CAS:121714-22-5,鈣熒光探針Fluo-3,AMFluo-3,AMAnx瓊脂糖凝膠4FFAnxSepharose4FF人(PKA)說明書,人蛋白激酶AElisa試劑盒

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