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2024-09-18 18:10 237閱讀次數(shù)

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• 細(xì)胞培養(yǎng)中平板的選擇和常見問題

  細(xì)胞培養(yǎng)中平板的選擇和常見問題[詳細(xì)]

  2024-09-18 18:10

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 如何解決細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

  如何解決細(xì)胞培養(yǎng)常見問題[詳細(xì)]

  2013-11-01 00:00

  安裝說明

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• 細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解答

  細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解答[詳細(xì)]

  2016-09-13 00:00

  期刊論文

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• 細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及其解決方法

  細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及其解決1.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始。2.何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。3.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活。4可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。5何謂FBS,FCS,CS,HS?FBS（fetalbovineserum）和FCS（fetalcalfserum）是相同的意思，兩者都是指胎牛血清，F(xiàn)CS乃錯(cuò)誤的使用字眼，請(qǐng)不要再使用。CS（calfserum）則是指小牛血清。HS（horseserum）則是指馬血清。6培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5%或10%CO2？或根本沒有影響？一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10%CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時(shí)，則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。7.Hank's平衡鹽溶液（HBS）要在空氣中使用，不需要CO2培養(yǎng)箱。原因是什么？Hank's平衡鹽溶液（HBS）和Earle's平衡鹽溶液（EBS）有什么本質(zhì)的功能差別？HBS和EBS的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles（2.2g/L）中比在Hanks（0.35g/L）中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2中，溶液會(huì)變堿，Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織，需要用Eagles液，。如果僅僅是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織，用Hanks液就可以了。8.細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因。更多常見問題及解決方法請(qǐng)見附件.........[詳細(xì)]

  2024-09-29 22:57

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞培養(yǎng)中的一些試劑

  細(xì)胞培養(yǎng)中的一些試劑[詳細(xì)]

  2024-09-14 16:59

  應(yīng)用文章

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• 氮吹儀的常見問題和注意事項(xiàng)

  氮吹儀的用途： 用于除去少量易揮發(fā)的液體，比如水和一些有機(jī)溶劑，在實(shí)驗(yàn)室用得比較多。氮吹儀典型的應(yīng)用是在固相萃取-氣相色譜檢測中，固相萃取取完后可用氮吹儀將洗脫液中大部分溶液吹掉，即完成了一個(gè)濃縮過程，ZH便可上機(jī)進(jìn)樣檢測了。[詳細(xì)]

  2024-09-14 10:06

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 細(xì)胞培養(yǎng)常見的問題和解決方法

  細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及回答如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始，各種目的無血清培養(yǎng)**AIMV（12005）培養(yǎng)基（SFM）。L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎？它在溶液中不穩(wěn)定嗎？L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會(huì)降解，但是確切的降解率一直沒有Z終定論。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)致氨的形成，而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性。GlutaMAX-I是什么？培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I？這個(gè)二肽有多穩(wěn)定？GlutaMAX-I二肽是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘，GlutaMAX-I二肽溶液有Z小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完全降解。什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞？用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200～2000個(gè)/毫升，在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4％的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻，數(shù)分鐘后，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?；罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭，因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。如何消除組織培養(yǎng)的污染？當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時(shí)，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母，把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開，用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)，檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性，因而，做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點(diǎn)在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時(shí)尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實(shí)驗(yàn)步驟。1.在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞，稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。2.分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個(gè)小培養(yǎng)瓶中。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔中。例如，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0mg/ml。3.每天觀測細(xì)胞毒性指標(biāo)，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。4.確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2～3代。5.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。6.重復(fù)步驟4。7.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代，確定污染是否以已被消除。培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。目錄上說，Hank's平衡鹽溶液（HBS）要在空氣中使用，不需要CO2培養(yǎng)箱。原因是什么？Hank's平衡鹽溶液（HBS）和Earle's平衡鹽溶液（EBS）有什么本質(zhì)的功能差別？HBS和EBS的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles（2.2g/L）中比在Hanks（0.35g/L）中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2中，溶液會(huì)變堿，Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織，需要用Eagles液，。如果僅僅是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織，用Hanks液就可以了。二價(jià)離子YZ胰蛋白酶活性嗎？使用胰蛋白酶時(shí)加入EDTA的目的是什么？二價(jià)離子的確YZ胰蛋白酶活性。EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子，以便保持YZ胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細(xì)胞前，用EDTA清洗細(xì)胞，以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價(jià)離子。我SYSF900II時(shí)，細(xì)胞生長良好，但是我的蛋白產(chǎn)物不如使用Graces液和10%胎牛血清時(shí)效果好。如果目的蛋白是一個(gè)后期蛋白，它將與蛋白酶一起表達(dá)，這些蛋白酶將會(huì)作用于目的蛋白。在加有血清的培養(yǎng)基中，這些蛋白酶將作用到血清中的蛋白，從而使目的蛋白產(chǎn)品保持完好。在無血清配方中，蛋白酶作用的**底物是你的目的蛋白。為了避免這一問題，加入一些蛋白酶YZ劑或加入少量的血清（少于1％），讓血清給蛋白酶提供作用底物。20°C下配制的緩沖液，在較高或較低的溫度下PH值會(huì)改變嗎？對(duì)于普通使用的緩沖液，PH值隨溫度變化而變化。下表列出溫度改變10℃時(shí)，PH值的變化情況：例如20℃下配制PH7.4Tris緩沖液,40℃時(shí)PH值為7.4-（2x0.310）＝6.78緩沖系統(tǒng)pKa/20℃[Delta]pKa/10℃Mes6.15-0.110Ada6.60-0.110Pipes6.80-0.08ces6.90-0.200Bes7.15-0.160Mops7.20-0.013Tes7.50-0.200Hepes7.55-0.140Tricine8.15-0.210Tris8.30-0.310Bicine8.35-0.180Glycylglycine8.40-0.280室溫下（25）配制的Tris-HCl溶液，在37℃使用時(shí)PH值是多少？緩沖液的PH值隨溫度變化而變化。下表列出了50mMTris-HC溶液在4℃，25℃，37℃時(shí)，不同的PH值。4°C25°C37°C8.17.57.28.27.67.38.37.77.48.47.87.58.57.97.68.68.07.78.78.17.88.88.27.98.98.38.09.08.48.19.18.58.29.28.68.39.38.78.49.48.88.5昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)的Z適PH值和滲透壓是多少？生長培養(yǎng)基的PH值對(duì)細(xì)胞的增殖和病毒或重組蛋白的生產(chǎn)均會(huì)產(chǎn)生影響。對(duì)于大部分鱗翅類昆蟲細(xì)胞系，在PH值6.0～6.4范圍的大部分應(yīng)用效果良好。培養(yǎng)鱗翅類昆蟲細(xì)胞系時(shí)，培養(yǎng)基的Z適滲透壓是345-380mOsm/kg.。為保證可靠和持久的細(xì)胞培養(yǎng)方式，減少技術(shù)問題，保持PH值和滲透壓在以上所列的范圍之內(nèi)。HighFive細(xì)胞有任何其它名稱嗎？HighFive細(xì)胞也被稱為Trichoplasiani5B1-4和BTI-TN-5B1-4。PFHM-II和HYBRIDOMA-SFM之間有什么差別PFHM-II（Protein-freeHybridomaMedium）是不包含有蛋白質(zhì)的單克隆抗體生產(chǎn)培養(yǎng)基。如果作為雜交瘤生產(chǎn)培養(yǎng)基使用，PFHM-II可能需要補(bǔ)充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM既是雜交瘤生產(chǎn)培養(yǎng)基，也是單克隆抗體生產(chǎn)培養(yǎng)基。它包含低水平的蛋白質(zhì)。在HighFive無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度是多少？HighFive無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度：0.025g/LTween-80，1.0g/LPluronicPoly-all。HighFive細(xì)胞用多大的密度凍存？3.0x10E6cells/ml。在我的果蠅培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)形成白色沉淀，加熱后溶解。它是什么？對(duì)我的細(xì)胞有害嗎？可能是谷氨酰胺沉淀，但是更可能是L-酪氨酸沉淀。培養(yǎng)基中谷氨酰胺的濃度比典型的2mM高6倍。酪氨酸的濃度比在RPMI1640中高25倍，而且比谷氨酰胺更加難以溶解。沉淀也可能是不止一種成分的復(fù)合物。它可能是由于貯存在局部溫度較低的地方引起。只要沉淀在培養(yǎng)條件下可以溶解，對(duì)實(shí)驗(yàn)不會(huì)有不利的影響。如何從T25瓶中轉(zhuǎn)移sf9細(xì)胞？能用胰蛋白酶消化嗎？我們QL推薦使用脫落細(xì)胞的方法，因?yàn)檫@項(xiàng)技術(shù)破壞性Z小，生活力Z高。正如手冊(cè)上所顯示，通過使用巴斯德吸液管，讓細(xì)胞上培養(yǎng)基流動(dòng)。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養(yǎng)瓶。只有在必要的情況下，才使用胰酶消化細(xì)胞。胰酶消化一個(gè)T25瓶的sf9細(xì)胞：1.去除培養(yǎng)基。2.用2ml1xPBS（足以覆蓋細(xì)胞表面）洗滌細(xì)胞，去除PBS。3.加入2ml1x胰酶EDTA（恰好覆蓋細(xì)胞表面）。4.37℃孵育5到10分鐘。在儀器下檢測看到5分鐘后它們正在向上移動(dòng)。5.向細(xì)胞中加入2ml細(xì)胞培養(yǎng)液，移入錐形管，用2ml培養(yǎng)液洗瓶壁，移入同一錐形管中。（培養(yǎng)基中的FBS終止了胰酶的活性。）6.離心（1100rpm）沉淀細(xì)胞。去除培養(yǎng)基。7.用新的培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。傳代。在Sf9,Sf21,和highFive細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，肝素的使用量是多少？為了防止懸浮培養(yǎng)細(xì)胞聚集的形成，使用肝素濃度為10單位/毫升細(xì)胞懸液。在重新凍存sf9細(xì)胞前，它可以傳多少代？隨著傳代的次數(shù)的增加，它的感染能力會(huì)降低嗎？通常情況當(dāng)細(xì)胞經(jīng)過30次傳代后，應(yīng)該返回凍存。無論什么時(shí)候計(jì)數(shù)時(shí)，都應(yīng)該檢查細(xì)胞活力。如果超過95％的細(xì)胞保持有活力和在大約30小時(shí)左右加倍，細(xì)胞仍然可以使用。如果活力和加倍時(shí)間下降，它們的感染力將不在是有效的。Techtips●貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基，可能在放置幾天后顏色變紫。這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時(shí)，碳酸氫納導(dǎo)致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口，在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘，來校正溶液的pH值（確定松開瓶口以保證氣體交換）?！袢绻?xì)胞培養(yǎng)基偶然被凍，您應(yīng)該熔化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基?！衲檎遗囵B(yǎng)基成分表嗎？您可以在GIBCO目錄**章的后面或在我們網(wǎng)站的技術(shù)資源部分找到?！癞?dāng)在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時(shí)，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。血清蛋白會(huì)結(jié)合和滅活一些抗生素。在無血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活，可能對(duì)于細(xì)胞達(dá)到毒性水平。●一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。●總之，大部分添加物和試劑Z多可以凍融3次，如果次數(shù)更多都會(huì)在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，將會(huì)影響它的性能?！裨谶M(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，我們強(qiáng)烈推薦進(jìn)行臺(tái)盼蘭活性記數(shù)。研究者常常通過一個(gè)簡單的稀釋（1∶4或1∶2）進(jìn)行傳代，不進(jìn)行活性檢測，您可能接種比你認(rèn)為的低的多的濃度的細(xì)胞，這常?？赡軐?dǎo)致生長緩慢或培養(yǎng)物根本不生長?！裨谌芙獾囊恢軆?nèi)使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液。胰蛋白酶在4℃就可能開始降解，如果在室溫下放置超過30分鐘，就會(huì)變得不穩(wěn)定。●GIBCO產(chǎn)品的貯存期立足于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究結(jié)果。產(chǎn)品說明在超過指定的貯存期的一段時(shí)間內(nèi)，產(chǎn)品仍然在可接受的范圍內(nèi)，但是由于在超過指定的效期后，產(chǎn)品的性能和穩(wěn)定性沒有檢測，我們不推薦使用過了效期的產(chǎn)品。[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 真空干燥箱使用中常見問題和解決辦法

  真空干燥箱使用中常見問題和解決辦法普通真空干燥箱都認(rèn)為合適而使用先加熱真空室壁面、再由壁面向物品施行輻射加熱的形式。在這種形式下，控溫儀表的溫度傳感器可以安置在真空室外壁。傳感器可以同時(shí)接納對(duì)流、傳導(dǎo)、和輻射熱。而處于真空室里的玻璃棒溫度計(jì)只能接納輻射熱，更因?yàn)椴ＡО艉诙葲]可能達(dá)到1，相當(dāng)一小批輻射熱被折射了，因?yàn)檫@個(gè)玻璃棒溫度計(jì)反映的溫度值就肯定低于儀表的溫度讀數(shù)。普通講，200℃工況時(shí)儀表的溫度讀數(shù)與玻璃棒溫度計(jì)的讀數(shù)兩者相差30℃以內(nèi)是正常的。假如控溫儀表的溫度傳感器安置在真空室內(nèi)，玻璃棒溫度計(jì)的溫度值與儀表的溫度讀數(shù)之間的差別可以由大變小，但沒可能消弭，而真空室的嚴(yán)密封閉可靠性增加了一個(gè)有可能靠不住環(huán)節(jié)。假如從操作實(shí)用角度思索問題不期望看見這個(gè)差別，可以認(rèn)為合適而使用控溫儀表特有的顯露修正功能解決。物品放入真空箱里抽真空是為了抽去材質(zhì)中可以抽去的氣體成分。假如先加熱物品，氣體遇熱便會(huì)膨脹。因?yàn)檎婵障涞膰?yán)密封閉性十分好，膨脹氣體所萌生的很大壓力可能使仔細(xì)查看窗安全玻璃爆裂。這是一個(gè)潛伏的危險(xiǎn)。按先抽真空再升溫加熱的手續(xù)操作，就可以防止這種危險(xiǎn)。準(zhǔn)確的運(yùn)用辦法應(yīng)當(dāng)先抽真空再升溫加熱。待達(dá)到設(shè)定溫度后如發(fā)覺真空度有所減退時(shí)再合適加抽一下子。這么做對(duì)于延長設(shè)施的運(yùn)用生存的年限是有幫助的。加熱后的氣體被導(dǎo)向真空壓力計(jì)，真空壓力計(jì)便會(huì)萌生溫升。假如溫升超過了真空壓力計(jì)規(guī)定的運(yùn)用溫度范圍，就有可能使真空壓力計(jì)萌生示值誤差。假如按先升溫加熱再抽真空的手續(xù)操作，加熱的空氣被抽氣機(jī)抽出去的時(shí)刻，卡路里定然會(huì)被帶到抽氣機(jī)上去，因此造成抽氣機(jī)溫升過高，可能使抽氣機(jī)速率減退。普通的電熱鼓風(fēng)干燥箱均設(shè)有溫度平均度參變量：天然對(duì)流式的干燥箱為工作溫度Zda限度乘3，強(qiáng)迫對(duì)流式的干燥箱為工作溫度Zda限度乘2.5。唯獨(dú)電熱真空干燥箱不設(shè)溫度平均度參變量，這是為何？真空干燥箱內(nèi)有賴氣體熱運(yùn)動(dòng)使辦公室溫度達(dá)到平均的有可能性幾乎已經(jīng)沒有了。因?yàn)檫@個(gè)，從概念上我們就不可以再把一般電熱（鼓風(fēng)）干燥箱所規(guī)定的溫度平均度定義用到真空干燥箱上來。在真空狀況下設(shè)這個(gè)指標(biāo)也是無謂的。熱輻射的量與距離的平方成反比。同一個(gè)物體，距離加熱壁20cm小地兒接納的輻射熱只是距離加熱壁10cm處的1/4。差別非常大。這種現(xiàn)象與冬季曬太陽日計(jì)時(shí)，曬到日頭的一面很溫暖，曬不到日頭的一面比較冷是一個(gè)道理。因?yàn)檎婵崭稍锵湓诮Y(jié)構(gòu)上很難做到使辦公室三度空間內(nèi)的各點(diǎn)輻射熱的平均完全一樣，同時(shí)也匱缺權(quán)威的評(píng)估辦法，這可能是電熱真空干燥箱標(biāo)準(zhǔn)中不設(shè)溫度平均度參變量的端由。上海凱朗儀器設(shè)備廠專業(yè)生產(chǎn)鼓風(fēng)干燥箱、真空干燥箱、馬弗爐、生化培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、試驗(yàn)箱、恒溫?fù)u床、水槽、水浴鍋等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。咨詢電話：021-57180039[詳細(xì)]

  2018-10-01 10:00

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• 離子色譜儀常見問題的原因和解決方法

  離子色譜儀常見問題的原因和解決方法[詳細(xì)]

  2018-10-16 10:01

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• 力士樂換向閥的常見問題和解決方法

  力士樂換向閥的常見問題和解決方法力士樂方向閥的常見毛病及修理方法換向閥的毛病有：閥不能換向或換向動(dòng)作緩慢，氣體走漏，電磁先導(dǎo)閥有毛病等。（1）換向閥不能換向或換向動(dòng)作緩慢，一般是因光滑不良、繃簧被卡住或損壞、油污或雜質(zhì)卡住滑動(dòng)有些等緣由引起的。對(duì)此，應(yīng)先查看油霧器的作業(yè)是不是正常；光滑油的粘度是不是適宜。必要時(shí)，應(yīng)替換光滑油，清潔換向閥的滑動(dòng)有些，或替換繃簧和換向閥。（2）換向閥經(jīng)長期使用后易呈現(xiàn)閥芯密封圈磨損、閥桿和閥座損傷的現(xiàn)象，致使閥內(nèi)氣體走漏，閥的動(dòng)作緩慢或不能正常換向等毛病。此刻，應(yīng)替換密封圈、閥桿和閥座，或?qū)Q向閥換新。（3）若電磁先導(dǎo)閥的進(jìn)、排氣孔被油泥等雜物堵塞，封閉不嚴(yán)，活動(dòng)鐵芯被卡死，電路有毛病等，均可致使換向閥不能正常換向。對(duì)前3種狀況應(yīng)清潔先導(dǎo)閥及活動(dòng)鐵芯上的油泥和雜質(zhì)。而電路毛病一般又分為控制電路毛病和電磁線圈毛病兩類。在查看電路毛病前，應(yīng)先將換向閥的手動(dòng)旋鈕轉(zhuǎn)動(dòng)幾下，看換向閥在額外的氣壓下是不是能正常換向，若能正常換向，則是電路有毛病。查看時(shí)，可用外表丈量電磁線圈的電壓，看是不是達(dá)到了額外電壓，假如電壓過低，應(yīng)進(jìn)一步查看控制電路中的電源和相關(guān)聯(lián)的行程開關(guān)電路。假如在額外電壓下?lián)Q向閥不能正常換向，則應(yīng)查看電磁線圈的接頭（插頭）是不是松動(dòng)或觸摸不實(shí)。方法是，拔下插頭，丈量線圈的阻值，假如阻值太大或太小，說明電磁線圈已損壞，應(yīng)替換.[詳細(xì)]

  2018-11-05 10:00

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• 移液器常見問題和解決方法

  移液器常見問題和解決方法[詳細(xì)]

  2013-12-10 00:00

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• 如何解決細(xì)胞培養(yǎng)中的污染問題

  如何解決細(xì)胞培養(yǎng)中的污染問題[詳細(xì)]

  2013-10-31 00:00

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• ELISA實(shí)驗(yàn)中常見問題的解決

  ELISA操作常見問題1．樣品稀釋酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng)，如果血清不稀釋，不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng)，出現(xiàn)假陽性。因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù)，以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定，以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。但是，有些用戶未能嚴(yán)格按使用說明書操作，如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進(jìn)行稀釋，個(gè)別用戶取5μl甚至1μl樣品進(jìn)行稀釋，由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠，因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確，檢測結(jié)果出現(xiàn)問題。2．試劑盒平衡試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫（約25℃），一般需在室溫放置20～30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠，樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短，ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。3．樣品和試劑的混勻稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗(yàn)的均一性。4．加樣在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。5．溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗Z為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)間相對(duì)較短。Z為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，使用自己喜歡的溫育時(shí)間和溫育溫度，這樣造成一些不必要的麻煩。因?yàn)?，不同試劑盒有不同的溫育時(shí)間和溫育溫度的選擇，隨意更改溫育時(shí)間或者溫育溫度將導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差。6．洗板固相免疫測定技術(shù)是一種非均相免疫測定技術(shù)，需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過程中吸附的非特異成份分離開來，以保證ELISA測定的特異性。洗板對(duì)于ELISA測定來說，也是極其關(guān)鍵的一步。洗液盡量不要溢出孔外；加洗液后要靜置1分鐘，甩去板孔中洗液后，一定要大力拍干；及時(shí)更換吸水紙，尤其是拍過酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去，否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果。7．邊緣效應(yīng)使用96孔板的ELISA測定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)”，即外周孔顯色較ZX孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與ZX孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)”，并且可提高測定的重復(fù)性。8．顯色顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說，顯色時(shí)間過短，結(jié)果偏低；顯色時(shí)間過長，空白或者非特異性顯色增加。9．比色比色要注意波長的選擇。以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而前者比色波長為450nm，后者為492nm，濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。因此，容易出現(xiàn)濾光片錯(cuò)用的問題。其次，單波長或雙波長比色選擇的問題。所謂的單波長比色即是通常的以對(duì)顯色具有Zda吸收的波長如450nm或492nm進(jìn)行比色測定；而雙波長雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長如450nm和非敏感波長如630nm下各測定一次，敏感波上下的吸光度測定值為樣本測定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和；非敏感波長下測定即改變波長至一定值，使得樣本測定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零，此時(shí)測得的吸光度即為臟物的吸光度值。Z后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長下的吸光度值與非常感波長下的吸光度值的差。因此，雙波長比色測定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測定吸光度的影響的優(yōu)點(diǎn)。由于ELISA測定中單個(gè)空白孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性，也就是說每次測定或同次測定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測定值，故而在ELISA測定比色時(shí)，**是使用雙波長比色。綜上所述，盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單，但有可能會(huì)影響測定結(jié)果的因素卻較多，分布在測定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因，特對(duì)常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。操作過程中可能出現(xiàn)的問題和解決方法問題可能原因解決方法顯色淡，靈敏度偏低1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長，溫度太高盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫2、試劑盒未充分平衡試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意4、保溫時(shí)間不足校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)5、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加按說明書要求保留洗滌時(shí)間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)6、移液器吸液量不足，吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密，吸嘴內(nèi)壁要清潔，**一次性使用7、蒸餾水水質(zhì)有問題使用新鮮合格的蒸餾水8、底物作用時(shí)間不足準(zhǔn)確定時(shí)背景深，全部呈有色,1、洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留濃縮洗液準(zhǔn)確配制；10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋；充分洗滌，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染2、樣品污染樣品應(yīng)新鮮采集，或低溫保存，防止污染3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應(yīng)時(shí)間過長調(diào)整培養(yǎng)箱溫度，準(zhǔn)確定時(shí)4、吸嘴重復(fù)使用，未洗凈或消毒不徹底吸嘴盡可能一次性使用5、蒸餾水被污染使用新鮮蒸餾水6、酶等試劑混用不同批號(hào)試劑勿混用7、一次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本量過多，加樣時(shí)間太長，導(dǎo)致實(shí)際反應(yīng)時(shí)間延長合理安排實(shí)驗(yàn)，避免幾塊酶標(biāo)板同時(shí)加樣重復(fù)性不佳1、樣品數(shù)量多少不一，加樣時(shí)間有長有短重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與**次接近2、保溫時(shí)間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性3、加樣量不一致樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴出現(xiàn)白板，陽性對(duì)照不顯色顯色液變質(zhì)更換新的顯色液洗滌液配制有誤請(qǐng)按說明書所示稀釋倍數(shù)配制未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入注意不要漏加終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂妹看渭右呵熬鶓?yīng)看清標(biāo)簽[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

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• 血清操作中的常見問題解析

  血清操作中的常見問題解析在血清操作中，常常會(huì)遇到各種問題，以下就一些常見問題進(jìn)行解答。1.保存血清什么辦法**？我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.怎樣避免出現(xiàn)沉淀物？我們建議您在使用血清的時(shí)候，注意正確的血清解凍步驟，并盡量避免滅HX清及長時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中3.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損？我們建議您將血清從冷凍箱中取出后，先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。4.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理？血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因，但Z普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的；而血纖維蛋白在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量?！∪裟コ@些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管中，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。5.什么事熱滅活？有必要做熱滅活嗎？　一般以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活性，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活?！?shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅HX清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)過處理的血清對(duì)細(xì)胞生長只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低?！《?jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增?！∪舴潜仨殻梢圆恍枰鰺釡缁钸@一步，更確保血清的質(zhì)量！我公司售出產(chǎn)品提供售后服務(wù)，保證產(chǎn)品質(zhì)量。凡夠買我公司ELISA檢測試劑盒可免費(fèi)提供代測服務(wù)。[詳細(xì)]

  2018-10-03 10:00

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• 淺談天平測量中的常見問題

  天平有著諸多的優(yōu)勢(shì)，其中Z重要的因素是操作比較簡單，同時(shí)還具備準(zhǔn)確的功能。然而，相關(guān)人員在使用天平測量時(shí)也會(huì)存在不足之處，這些問題的發(fā)生會(huì)在某種程度上影響著測量結(jié)果。對(duì)此，本文主要論述天平測量時(shí)所存在的問題，闡述天平的使用方法，從而提出合理化的解決措施，提供給相關(guān)人士。[詳細(xì)]

  2018-11-21 17:47

  期刊論文

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• 細(xì)胞培養(yǎng)中死活細(xì)胞測定

  細(xì)胞培養(yǎng)中死活細(xì)胞測定[詳細(xì)]

  2013-11-11 00:00

  安裝說明

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• 冷水機(jī)中制冷系統(tǒng)常見問題

  冷水機(jī)中制冷系統(tǒng)常見問題[詳細(xì)]

  2015-01-13 00:00

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• 防爆等級(jí)的區(qū)分和選擇

  防爆等級(jí)ExibⅡBT4是什么意思？Ex是防爆電氣產(chǎn)品的標(biāo)志ib是可以應(yīng)用于一區(qū)二區(qū)的本質(zhì)安全型電氣產(chǎn)品，ⅡB是可以應(yīng)用于ⅡB類氣體與空氣形成的爆炸性混合物環(huán)境中，防爆等級(jí)劃分，主要分為I類（礦用）、II類（廠用）。其中II類又分為：IIA、IIB、IIC（安全級(jí)別：A<B<C）T是溫度組別,T4是指設(shè)備表面溫度不超過135度,T6安全級(jí)別Z高,也就是設(shè)備表面溫度越低越好。綜合來說就是本防爆產(chǎn)品為可用于ⅡB類氣體的一區(qū)二區(qū)，設(shè)備表面溫度不超過135度的本質(zhì)安全型防爆電氣產(chǎn)品。021-33737647[詳細(xì)]

  2018-11-13 15:46

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• 密封墊和接頭的選擇

  密封墊和接頭的選擇[詳細(xì)]

  2024-09-17 19:48

  安裝說明

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• 熱電阻常見問題和處理方法

  熱電阻常見問題和處理方法[詳細(xì)]

  2014-05-10 00:00

  操作手冊(cè)

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