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現(xiàn)貨人纖維連接蛋白ELISA 檢測試劑盒內(nèi)容及其配制

本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2018-09-27 10:00 475閱讀次數(shù)

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人纖維連接蛋白ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:細胞培養(yǎng)上清液上海信然生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應elisa試劑,金標試劑,放免試劑盒,科研抗體,提供免費代測服務,保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細信息,請來電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機:18939846276,13482524164試驗原理:    FN試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知FN濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將FN和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中FN的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人纖維連接蛋白ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人纖維連接蛋白ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人纖維連接蛋白ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的FN標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的FN含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800ug/L4、敏感度:1.0ug/LRabbitanti-GuineaIgG/RBITC羅丹明標記兔抗豚鼠IgG0.3mlGoatanti-bovineIgG/RBITC羅丹明標記羊抗牛IgG0.3mlhumanIFN-α(Interferonα)干擾素-α抗體(抗人)0.1mlhumanIFN-α(Interferonα)干擾素-α抗體(抗人)0.2mlIFN-α2b(Interferonalpha2b)干擾素α2b抗體0.2mlIFN-β(Interferonβ)干擾素-β抗體(大鼠、小鼠)0.1mlIFN-β(Interferonβ)干擾素-β抗體(大鼠、小鼠)0.2mlIFN-gamma(Interferongamma)(human)干擾素-γ抗體(抗人)0.1mlGoatanti-chiIgG/RBITC羅丹明標記羊抗雞IgG0.3mlGoatanti-chiIgM/RBITC羅丹明標記羊抗雞IgM0.3mlRbFITC/RBITC羅丹明標記兔抗FITC0.3mlGoatanti-humanIgA/RBITC羅丹明標記羊抗人IgA0.3mlGoatanti-humanIgM/RBITC羅丹明標記羊抗人IgM0.3mlIFN-gamma(Interferongamma)(human)干擾素-γ抗體(抗人)0.2mlIFNgamma(Interferongamma)(mouse,rat)干擾素-γ抗體(抗大、小鼠)0.1mlIFNgamma(Interferongamma)(mouse,rat)干擾素-γ抗體(抗大、小鼠)0.2mlIFN-γR/CD119(Interferon-γRreceptor)干擾素-γ受體抗體0.2mlnti-IGC(immunoglobulindeltaheavychainconstantAregionmembrane-boundform)兔抗非洲爪蟾IGC抗體0.2mlIGF-1R/CD221(Insulin-likeGrowthFactor-IReceptor)胰島素樣生長因子-I受體抗體0.1ml

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