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現(xiàn)貨人單核細胞趨化蛋白-1ELISA 檢測試劑盒內容及其配制

本文由 上海盈公生物技術有限公司 整理匯編

2018-09-27 10:00 505閱讀次數(shù)

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人單核細胞趨化蛋白-1ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿上海信然生物技術有限公司專業(yè)供應葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量1**%保證,若存在質量問題,我們無條件包退換。試驗原理:    MCP-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知MCP-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MCP-1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MCP-1的濃度呈比例關系。 安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人單核細胞趨化蛋白-1ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人單核細胞趨化蛋白-1ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。人單核細胞趨化蛋白-1ELISA檢測試劑盒結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的MCP-1標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的MCP-1含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlIMP3(Insulinlikegrowthfactor2mRNAbindingprotein3)胰島素樣生長因子ⅡmRNA結合蛋白3抗體0.2mlInhibinαYZ素α抗體0.2mlInhibinbetaA(ActivinAactivinABalphapolypeptide;ActivinA)YZ素betaA抗體0.2mlInhibinbetaBYZ素βB抗體0.2mlInsulin胰島素抗體0.1mlGoatanti-humanIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標記羊抗人IgG0.1mlGoatanti-bovineIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標記羊抗牛IgG0.1mlInsulin胰島素抗體0.2mlInsulinReceptor-α(ISR-α)胰島素受體-α抗體0.1mlInsulinReceptor-α(ISR-α)胰島素受體-α抗體0.2mlIntegrinα3/CD49c(Integrinalpha3)整合素α3抗體0.1mlIntegrinα3/CD49c(Integrinalpha3)整合素α3抗體0.2mlIntegrinβ5整合素β5抗體0.1mlIntegrinalpha1整合素α1抗體0.1mlRabbitanti-DogIgG/APC熒光素APC標記兔抗狗IgG0.1mlRabbitanti-RatIgG/APC熒光素APC標記兔抗大鼠IgG0.1mlIntegrinβ7整合素β7抗體0.1mlL-Citrulline抗L-瓜氨酸抗體0.2ml若需要了解試劑盒的詳細信息,請來電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機:18939846276,13482524164

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