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激素六項之卵泡刺激素(FSH)ELISA試劑盒使用說明書
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本文由 深圳市科潤達生物工程有限公司 整理匯編
2018-11-14 10:00 1352閱讀次數(shù)
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4卵泡刺激素(FSH)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1288)1、應用范圍DRG公司的卵泡刺激素酶免試劑盒可用于血清中FSH(卵泡刺激素)的定量檢測。此檢測試劑盒僅供體外診斷用。2、前言說明FSH和LH兩者密切的控制著性腺組織的生長和的繁殖活動,性腺組織通過負反饋的構效關系合成和分泌雄性激素和雌性激素。FSH是垂體前葉嗜堿細胞分泌的一種糖蛋白。下丘腦產生的促性腺激素釋放激素(GnRH)可控制垂體前葉FSH的釋放。和其它糖蛋白一樣,如:LH、TSH和HCG,F(xiàn)SH由兩個亞單位組成,分別為α和β。這種類型的激素其α亞單位在結構上都非常類似,因此每一激素的生物學和免疫學活性主要依賴于其β亞單位的獨特性。在女性中,F(xiàn)SH直接作用于粒細胞的受體而刺激卵泡的生長和成熟;從而增加卵泡類固醇激素的分泌和LH的產生。產生的LH之后結合到卵泡膜細胞上并刺激類固醇的分泌。在接近卵泡成熟時,卵巢內雌二醇的水平就開始增加,于是雌二醇的刺激作用可增加FSH受體的活性和FSH卵泡性結合。因此,在女性中,F(xiàn)SH、LH和雌二醇密切相連促進卵巢的發(fā)育和成熟。在絕經后、閹割和卵巢早衰的情況下,F(xiàn)SH的水平會表現(xiàn)為提高。通過雌激素的調節(jié)(雌激素表現(xiàn)的是一種負反饋機制),F(xiàn)SH的水平可能會變得規(guī)范化。FSH和LH、FSH和雌激素之間關系的不正常與神經性食欲缺乏癥和多囊卵巢并相關聯(lián)。當FSH隨機抽樣的濃度超過10mIU/mL時表明患有卵巢衰竭疾病的這一觀點,人們對此存在著明顯的異議。男性中,生精小管的發(fā)育和精子發(fā)生的維持同樣會受到FSH的調節(jié)。然而和雌激素不一樣,雄性激素并不會降低FSH的水平,因此它僅與血清LH之間表現(xiàn)為負反饋的關系。因為對FSH還不是完全了解,但人們發(fā)現(xiàn)精子稀少的男性通常FSH水平會提高。如通過放免檢測得到的結果:睪丸癌一般會降低血清FSH濃度,而提高LH濃度。因此人們推測:LH濃度的明顯增加可能是通過與由睪丸癌分泌的hCG樣物質的交叉反應所造成的。在原發(fā)性睪丸功能障礙和克氏綜合征男性患者中,我們可發(fā)現(xiàn)高濃度的FSH水平。FSH濃度的提高同樣也出現(xiàn)在饑餓、腎功能衰竭、甲狀腺功能亢進和肝硬化的情況下。3、實驗原理DRG公司的FSH酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合FSH分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性FSH的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結有辣根過氧化物酶的抗FSH抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結合的酶聯(lián)物。結合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中FSH的濃度成正相關。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中FSH的濃度成正比。4、試劑盒成分1)微量反應板,1塊(96孔),微孔中包被了抗FSH的單克隆抗體。2)酶聯(lián)物,1ml,內含抗辣根過氧酶標記的抗FSH抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)標準系列,6支(凍干粉),即:0,5,10,20,50,100mIU/ml,轉換系數(shù):1ng/ml=0.34mIU/ml。5)終止液:0.5M的H2SO4,,6ml5、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)標準水箱5)蒸餾水6、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在6周內穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。7、樣品的采集1)靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清,避免溶血。2)必須蓋住樣本并在實驗之前于2-8℃下可貯存48小時。樣品需要更長的貯存時間,則應將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣本在檢測之前必須上下倒置幾次。注意:用于此試劑盒的樣品不能含有任何添加劑。8、試劑的準備參考標準:在凍干的標準品中加入1.0ml雙蒸水。注意:配制好了的標準品可在2-8℃下穩(wěn)定存放2個月。想要存放更長時間應當將其凍存于-20℃的環(huán)境下。9、一般注意事項1)實驗開始前,將所有試劑和樣本都平衡至室溫,試劑混合時避免起泡。2)實驗一旦開始,所有的步驟應完整地進行下去。3)每一樣品的取樣都得使用新的取樣吸頭。4)吸光度與溫育時間和溫度有關,在實驗開始后所有的試劑都應準備好,以保證加液時間的一致。5)本試劑盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之間(室溫22℃,顯色10分鐘以內)。如果ZdaOD值高于您酶標儀的上限或低于1.000,則相應的減少或延長顯色反應的溫育時間。一般情況下,酶免反應的強度與時間和溫度成線性,這使得操作者應當適當?shù)恼{整物理化學環(huán)境。10、實驗步驟1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將黃體生成素標準系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、質控和血清樣本分別25μl加入到相應的微孔中,每一樣品都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗FSH酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內的反應液。7)用蒸餾水洗板5次。8)在吸水紙上把板拍干。9)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。10)室溫(22℃)溫育10分鐘。11)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。12)10分鐘內在450nm波長讀吸光度。11、結果計算1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。根據(jù)自己的實際經驗或計算機的功能,也可以采用其它的歸納方法進行計算。4)任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應的稀釋因子考慮進去。12、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。以下結果是以一定量正常人群的血液樣本為準得出的實驗結果:樣本FSH范圍(mIU/ml)男性2.010女性卵泡期2.010循環(huán)中期7.020黃體期2.0--10絕經后女性20100-------------------------------------------------------------------------------靈敏度:Z小檢測卵泡刺激素濃度,1mIU/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431
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激素六項之卵泡刺激素(FSH)ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4卵泡刺激素(FSH)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1288)1、應用范圍DRG公司的卵泡刺激素酶免試劑盒可用于血清中FSH(卵泡刺激素)的定量檢測。此檢測試劑盒僅供體外診斷用。2、前言說明FSH和LH兩者密切的控制著性腺組織的生長和的繁殖活動,性腺組織通過負反饋的構效關系合成和分泌雄性激素和雌性激素。FSH是垂體前葉嗜堿細胞分泌的一種糖蛋白。下丘腦產生的促性腺激素釋放激素(GnRH)可控制垂體前葉FSH的釋放。和其它糖蛋白一樣,如:LH、TSH和HCG,F(xiàn)SH由兩個亞單位組成,分別為α和β。這種類型的激素其α亞單位在結構上都非常類似,因此每一激素的生物學和免疫學活性主要依賴于其β亞單位的獨特性。在女性中,F(xiàn)SH直接作用于粒細胞的受體而刺激卵泡的生長和成熟;從而增加卵泡類固醇激素的分泌和LH的產生。產生的LH之后結合到卵泡膜細胞上并刺激類固醇的分泌。在接近卵泡成熟時,卵巢內雌二醇的水平就開始增加,于是雌二醇的刺激作用可增加FSH受體的活性和FSH卵泡性結合。因此,在女性中,F(xiàn)SH、LH和雌二醇密切相連促進卵巢的發(fā)育和成熟。在絕經后、閹割和卵巢早衰的情況下,F(xiàn)SH的水平會表現(xiàn)為提高。通過雌激素的調節(jié)(雌激素表現(xiàn)的是一種負反饋機制),F(xiàn)SH的水平可能會變得規(guī)范化。FSH和LH、FSH和雌激素之間關系的不正常與神經性食欲缺乏癥和多囊卵巢并相關聯(lián)。當FSH隨機抽樣的濃度超過10mIU/mL時表明患有卵巢衰竭疾病的這一觀點,人們對此存在著明顯的異議。男性中,生精小管的發(fā)育和精子發(fā)生的維持同樣會受到FSH的調節(jié)。然而和雌激素不一樣,雄性激素并不會降低FSH的水平,因此它僅與血清LH之間表現(xiàn)為負反饋的關系。因為對FSH還不是完全了解,但人們發(fā)現(xiàn)精子稀少的男性通常FSH水平會提高。如通過放免檢測得到的結果:睪丸癌一般會降低血清FSH濃度,而提高LH濃度。因此人們推測:LH濃度的明顯增加可能是通過與由睪丸癌分泌的hCG樣物質的交叉反應所造成的。在原發(fā)性睪丸功能障礙和克氏綜合征男性患者中,我們可發(fā)現(xiàn)高濃度的FSH水平。FSH濃度的提高同樣也出現(xiàn)在饑餓、腎功能衰竭、甲狀腺功能亢進和肝硬化的情況下。3、實驗原理DRG公司的FSH酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合FSH分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性FSH的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結有辣根過氧化物酶的抗FSH抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結合的酶聯(lián)物。結合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中FSH的濃度成正相關。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中FSH的濃度成正比。4、試劑盒成分1)微量反應板,1塊(96孔),微孔中包被了抗FSH的單克隆抗體。2)酶聯(lián)物,1ml,內含抗辣根過氧酶標記的抗FSH抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)標準系列,6支(凍干粉),即:0,5,10,20,50,100mIU/ml,轉換系數(shù):1ng/ml=0.34mIU/ml。5)終止液:0.5M的H2SO4,,6ml5、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)標準水箱5)蒸餾水6、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在6周內穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。7、樣品的采集1)靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清,避免溶血。2)必須蓋住樣本并在實驗之前于2-8℃下可貯存48小時。樣品需要更長的貯存時間,則應將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣本在檢測之前必須上下倒置幾次。注意:用于此試劑盒的樣品不能含有任何添加劑。8、試劑的準備參考標準:在凍干的標準品中加入1.0ml雙蒸水。注意:配制好了的標準品可在2-8℃下穩(wěn)定存放2個月。想要存放更長時間應當將其凍存于-20℃的環(huán)境下。9、一般注意事項1)實驗開始前,將所有試劑和樣本都平衡至室溫,試劑混合時避免起泡。2)實驗一旦開始,所有的步驟應完整地進行下去。3)每一樣品的取樣都得使用新的取樣吸頭。4)吸光度與溫育時間和溫度有關,在實驗開始后所有的試劑都應準備好,以保證加液時間的一致。5)本試劑盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之間(室溫22℃,顯色10分鐘以內)。如果ZdaOD值高于您酶標儀的上限或低于1.000,則相應的減少或延長顯色反應的溫育時間。一般情況下,酶免反應的強度與時間和溫度成線性,這使得操作者應當適當?shù)恼{整物理化學環(huán)境。10、實驗步驟1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將黃體生成素標準系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、質控和血清樣本分別25μl加入到相應的微孔中,每一樣品都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗FSH酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內的反應液。7)用蒸餾水洗板5次。8)在吸水紙上把板拍干。9)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。10)室溫(22℃)溫育10分鐘。11)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。12)10分鐘內在450nm波長讀吸光度。11、結果計算1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。根據(jù)自己的實際經驗或計算機的功能,也可以采用其它的歸納方法進行計算。4)任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應的稀釋因子考慮進去。12、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。以下結果是以一定量正常人群的血液樣本為準得出的實驗結果:樣本FSH范圍(mIU/ml)男性2.010女性卵泡期2.010循環(huán)中期7.020黃體期2.0--10絕經后女性20100-------------------------------------------------------------------------------靈敏度:Z小檢測卵泡刺激素濃度,1mIU/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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激素六項之孕酮(PRG)ELISA 試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4孕酮(PRG)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1561)1、前言孕酮是一種類固醇激素,含21個碳原子,在C-3上連有酮基,在C-4與在C-5之間為雙鍵連接。該類固醇激素是一種女性性激素,與雌激素共同在月經周期中調節(jié)附屬的器官,它對于胚細胞著床前的子宮內膜增生狀態(tài)和維持孕期是特別重要的。在非孕期婦女懷孕的胎盤成為主要來源。極少數(shù)來源于兩性的腎上腺皮質。孕酮在循環(huán)血中主要與皮質類固醇結合蛋白(CBG),性激素結合蛋白(SHBG)和白蛋白結合,僅有循環(huán)總濃度的2-10%是游離激素。根據(jù)月經循環(huán)周期血孕酮濃度范圍很寬,在卵泡期可以低于1ng/ml(3.2nmol/L),在黃體期達到10-20ng/ml(32-64nmol/L)。在排卵后4-7天達到Z高水平保持4-6天,在月經開始前24小時降至排卵前的水平,因為孕酮的升高和降低與卵巢卵泡和黃體的活動相對應,因此血漿孕酮的測定在臨床上常用來證明排卵和非孕婦女的黃體功能正常。假如排卵沒有發(fā)生,黃體則沒有生成進而孕酮升高的循環(huán)也不能見到,異常的孕酮分泌與經前期緊張子宮內膜異位癥痛經和黃體不全有關。孕酮濃度不僅個體之間有差異,而且同一個人每天甚至每個小時都會不同,一般的在婦科內分泌紊亂或異常妊娠為了恰當?shù)慕忉尣∫蜻B續(xù)測定比單個測定更有意義。在孕期孕酮更多的由胎盤產生,血漿水平在這個時期穩(wěn)定在200ng/ml的水平。2、實驗原理DRG公司的孕酮酶免試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合孕酮分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性孕酮的病人樣本與辣根過氧酶標記的孕酮競爭性的結合包被板上的抗體。溫育之后,未結合的酶聯(lián)物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結合量與樣品中孕酮的濃度成反比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中孕酮的濃度成反比。3、試劑盒成分1)預包被反應板,12條X8孔,96孔,微孔中包被了單克隆的抗孕酮抗體。2)標準品系列,7支,1ml,濃度:0;0.3;1.25;2.5;5;15;40ng/ml,轉換系數(shù):1ng/ml=3.18nmol/ml,內含0.3%的Proclin防腐劑,3)酶聯(lián)結物,1支,25ml,辣根過氧酶標記的孕酮,內含0.3%的Proclin防腐劑。4)底物液,1支,25ml,TMB5)終止液,1支,14ml,內含0.5M的H2SO46)濃縮洗滌液(40X),1支,30ml.注:用于樣品稀釋的零標準品應視需要而定。4、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存時,其活性在有效期內穩(wěn)定,不要使用過期試劑。所有開封了的試劑都必須儲存于2-8℃的環(huán)境下,微孔反應板也必須貯存于28℃的環(huán)境下。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。6、試劑準備實驗開始前,將所有的試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。洗滌液:在30ml的濃縮洗滌液中加入1170ml去離子水進行稀釋,稀釋好的洗滌液室溫下可穩(wěn)定存放2周。7、樣本采集和準備此實驗中要使用到血清或血漿(EDTA-,肝素血漿),不要使用溶血、黃疸血或脂血樣品。請注意:含疊氮鈉的樣品不能用于此實驗中。7.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清。未完全凝血前請勿離心,接受了抗凝劑ZL的病人樣品可能需要更長的凝血時間。血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。7.2樣品的儲存實驗開始前,應當將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放24個小時。如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣品在實驗前應反復倒置幾次。7.3樣品的稀釋在S次實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于Z高標準品中睪酮的濃度,則應將此樣品用零標準品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測。在計算濃度時應當將此稀釋因子考慮進去。例如:a)按1:10的比例稀釋:10μl的血清+90μl零標準品(充分混合)b)按1:100的比例稀釋:10μl已稀釋好的a)+90μl零標準品(充分混合)8、實驗步驟:1)將所需數(shù)量的板條固定到板架上。2)將標準品、質控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應的微孔中。3)室溫溫育5分鐘。4)在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。5)充分混勻10秒,在這個步驟完全混勻很重要。6)室溫孵育60分種。7)快速棄去孔內反應物,每孔用400μL蒸餾水洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。8)在每一微孔中加入200μl底物液。9)室溫孵育15分種。10)加100μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應。11)加終止液后10分鐘之內,用酶標儀在450±10nm處測定OD值。9、結果計算1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。4)自動計算方法:在IFU上,它用四參數(shù)曲線已自動計算出結果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中孕酮濃度高于Z高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應當把此稀釋因子考慮進去。10、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。在一明顯正常人群的研究中,我們使用DRG公司的孕酮ELISA試劑盒進行檢測得到如下結果:正常女性:卵泡期0.2-1.4ng/ml黃體期425ng/ml絕經期0.11ng/ml正常男性:0.11ng/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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激素六項之 泌乳素(PRL) ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4泌乳素(PRL)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA1291)1、實驗原理DRG公司的泌乳素酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合泌乳素分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性泌乳素的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結有辣根過氧化物酶的抗泌乳素抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結合的酶聯(lián)物。結合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中泌乳素的濃度成正相關。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中泌乳素的濃度成正比。2、試劑盒成分1)微量反應板,1塊(96孔),微孔中包被了抗泌乳素的單克隆抗體。2)酶聯(lián)物,11ml,辣根過氧酶標記的泌乳素抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)標準系列,6支(凍干粉),濃度:0;5;20;50;100;200ng/ml轉換系數(shù)(1ng/ml=21.1mUI/mL)5)終止液,0.5M的H2SO4,6ml3、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)標準水箱5)蒸餾水6)計時器4、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在2個月內穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。5、樣品的采集1)靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清,避免溶血。注意:此試劑盒只能使用沒用任何添加劑的樣品。2)必須蓋住樣本并在實驗之前于2-8℃下可貯存48小時。樣品需要更長的貯存時間,則應將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣本在檢測之前必須上下倒置幾次。注意:用于此試劑盒的樣品不能含有任何添加劑。6、試劑的準備參考標準:在凍干的標準品中加入1.0ml雙蒸水。注:配制好了的標準品可在2-8℃下穩(wěn)定存放2個月。想要存放更長時間應當將其凍存于-20℃的環(huán)境下。7、一般注意事項1)實驗開始前,將所有試劑和樣本都平衡至室溫,試劑混合時避免起泡。2)實驗一旦開始,所有的步驟應完整地進行下去。3)每一樣品的取樣都得使用新的取樣吸頭。4)吸光度與溫育時間和溫度有關,在實驗開始后所有的試劑都應準備好,以保證加液時間的一致。5)本試劑盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之間(室溫22℃,顯色10分鐘以內)。如果ZdaOD值高于您酶標儀的上限或低于1.000,則相應的減少或延長顯色反應的溫育時間。一般情況下,酶免反應的強度與時間和溫度成線性,這使得操作者應當適當?shù)恼{整物理化學環(huán)境。8、實驗步驟1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將黃體生成素標準系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、質控和血清樣本分別25μl加入到相應的微孔中,每一樣品都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗泌乳素酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內的反應液。7)用蒸餾水洗板5次。8)在吸水紙上把板拍干。9)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。10)室溫(22℃)溫育10分鐘。11)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。12)10分鐘內在450±10nm波長讀吸光度。9、結果計算1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一條標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。根據(jù)自己的實際經驗或計算機的功能,也可以采用其它的歸納方法進行計算。4)如果樣本的濃度高于Z高濃度的標準品的濃度或者濃度>200ng/ml,則需要進行稀釋,任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應的稀釋因子考慮進去。10、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。以下結果是以一定量正常人群的血液樣本為準得出的實驗結果:性別平均值(ng/ml)S.D.(ng/ml)5%(ng/ml)95%(ng/ml)男性6.445.500.9420.94女性14.275.882.3925.15靈敏度:Z小檢測出的泌乳素濃度為0.35ng/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
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激素六項之睪酮(TES)ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4睪酮(TES)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1559)1、前言DRG公司的睪酮酶免試劑盒可用于人血清和血漿中睪酮的定量檢測。此試劑盒僅供體外診斷用。睪酮(17β-羥基-4-雄烯-3-烷)是一種19C的類固醇激素,它在C-4和C-5間含一個不飽和鍵,C-3位置有一個酮基,C-17的β位上有一個羥基。此類固醇激素的分子量為288.47。睪酮是分泌到血液中Z主要的雄性激素。在男性中,睪酮主要由睪丸的間質細胞分泌;在女性中,處于循環(huán)中的睪酮50%來源于外周雄烯二酮的轉換,25%來源于卵巢,25%來源于腎上腺。睪酮負責男性第二性征的形成,檢測睪酮濃度有助于評價性腺機能減退的狀態(tài)。在女性中,在很多疾病中睪酮的濃度都很高,如:多毛癥,女子男性化,多囊卵巢癥,卵巢癌,腎上腺癌和腎上腺增生。而在男性中,高水平的睪酮通常與下丘腦垂體疾病、睪丸癌、先天性腎上腺增生和前列腺癌有關。在患下列疾病的病人體內,通??砂l(fā)現(xiàn)睪酮水平很低:垂體機能減退癥、克氏綜合征、睪丸女性化綜合征、睪丸切除術、隱睪病、酶缺陷和一些自身免疫疾病。2、實驗原理DRG公司的睪酮酶免試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合睪酮分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性睪酮的病人樣本與辣根過氧酶標記的睪酮競爭性的結合包被板上的抗體。溫育之后,未結合的酶聯(lián)物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結合量與樣品中睪酮的濃度成反比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中睪酮的濃度成反比。3、試劑盒成份1)預包被反應板,12×8孔,包被板上包被了單克隆的鼠抗睪酮抗體。2)標準品系列,共7支,1.0ml/支,濃度:0;0.2;0.5;1;2;6;16ng/ml。轉換系數(shù):1ng/ml=3.467nmol/l。3)酶聯(lián)結物,1支,25ml,內含辣根過氧酶標記的睪酮。4)底物/顯色劑,1支,25ml,內含TMB。5)終止液,1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。6)濃縮洗滌液(40X),1支,30ml。注意:用于樣品稀釋的零標準品因視需要而定。4、實驗所需材料(但試劑盒不提供)1)標準移液器2)酶標儀3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑盒的儲存與穩(wěn)定性未開啟的試劑在28℃下貯存時,其活性在有效期內穩(wěn)定,不要使用過期試劑。所有開封了的試劑都必須儲存于2-8℃的環(huán)境下,微孔反應板也必須貯存于28℃的環(huán)境下。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。6、試劑準備洗滌液的準備吸取40×濃度的洗滌液30mL用1170mL的蒸餾水混合定容至1200mL,稀釋好的洗滌液在室溫能保存2周7、樣品在此實驗中將用到血清或血漿(EDTA-,肝素-或檸檬酸血漿),不要使用溶血、黃疸血或脂血樣品。請注意:含有疊氮化鈉的樣本不能使用7.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,室溫下離心獲取血清。血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。7.2樣品的儲存實驗開始前,應當將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放5天。如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣品在實驗前應反復倒置幾次。7.3樣品的稀釋在S次實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于Z高標準品中睪酮的濃度,則應將此樣品用零標準品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測。在計算濃度時應當將此稀釋因子考慮進去。例如:a)按1:10的比例稀釋:10μl的血清+90μl零標準品(充分混合)b)按1:100的比例稀釋:10μl已稀釋好的a)+90μl零標準品(充分混合)8、一般注意事項1)所有試劑和樣本在使用之前必須平衡至室溫。所有試劑必須搖勻但不能起泡沫。2)一旦檢測開始,所有的操作步驟必須進行到底不能中斷。3)為了避免交叉放映,每一標準品、質控品和樣品的取樣都必須使用新的取樣吸頭。4)吸光度值是由孵育的時間和溫度所決定的。在實驗開始之前,建議準備好所有的藥劑旋開蓋子。5)將所需檢測的微孔板條固定在板架上等。這些準備工作將確保每次的加液步驟所需時間相同,沒有中斷。按一般的規(guī)律,酶免反應的強度與時間和溫度成線性比例。9、實驗步驟:1)將所需數(shù)量的板條固定到板架上。2)將標準品、質控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。4)充分混勻10秒,在這個步驟完全混勻很重要。5)室溫孵育60分種。6)快速棄取孔內反應物,每孔用400μL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。7)在每一微孔中加入200μl底物液。8)室溫孵育15分種。9)加100μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應。10)加終止液后10分鐘之內,用酶標儀在450±10nm處測定OD值。10、結果計算1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值進行標繪,作一條標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。4)自動計算方法:在IFU上,它用四參數(shù)曲線已自動計算出結果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中HPL濃度高于Z高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應當把此稀釋因子考慮進去。11、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。在一次明顯正常人群的研究中,我們使用DRG公司的睪酮ELISA試劑盒進行檢測得到如下結果:人群5%95%男性2.0ng/ml6.9ng/ml女性0.26ng/ml1.22ng/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
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激素六項之 雌二醇 (E2) ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4雌二醇(E2)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA2693)1、前言說明E2是一種含一個酚A環(huán)的18C類固醇激素。此類固醇激素的分子量為272.4,它是人體中Z有效的雌激素,主要由女性卵巢的格拉芬卵泡和胎盤產生,少量由腎上腺和男性睪丸產生。E2(雌二醇)被分泌到血液中,在血液中有98%的雌二醇會結合到性激素結合蛋白上,有的還會結合到其它血清蛋白上(如血清白蛋白),只有很少一部分以游離形式存在。雌激素的活性會受到雌二醇受體符合物的影響,此符合物可在靶位并在核酸水平上引發(fā)相應的反應。這些靶位包括:卵泡、子宮、乳房、陰道、尿道、下丘腦、垂體和敏感稍低的肝臟與皮膚。在月經周期正常的未懷孕女性體內,雌二醇的分泌遵循著一種循環(huán)模式,在排卵前有兩個明顯的高峰期。高濃度的雌二醇可在垂體水平發(fā)揮正反饋作用,它會影響垂體促性腺激素的分泌,如卵泡刺激素和黃體生成素,前者是卵泡成熟所必要的,后者是排卵形成所必要的。排卵后,雌二醇水平迅速下降直到黃體細胞被激活,結果雌二醇水平出現(xiàn)第二次高峰,并在黃體階段達到一平衡述評。在懷孕期間,母體血清雌二醇的水平會極度的增加,并且會超過排卵前的峰值,而且在整個孕期維持在高水平上。血清雌二醇的檢測是評價各種月經功能障礙的一個有效指標,例如女性早熟和晚熟,原發(fā)性、續(xù)發(fā)性閉經和絕經癥。據(jù)報道,女性化綜合征、男子女性型乳房和睪丸癌患者的血清雌二醇水平會升高。在不孕患者體內,血清雌二醇的檢測有利于監(jiān)測藥物ZL(如克羅米酚檸檬酸鹽、促黃體生成素釋放激素或外源性促性腺激素)后排卵的感應情況。在因為體外受精而引起的卵巢過度刺激綜合征患者中,每天監(jiān)測血清雌二醇濃度以便為hCG的管理和卵母細胞的采集提供**時間。2、檢測原理:DRG公司的雌二醇酶免試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合雌二醇分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性雌二醇的病人樣本與辣根過氧酶標記的雌二醇競爭性的結合包被板上的抗體。溫育之后,未結合的酶聯(lián)物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結合量與樣品中雌二醇的濃度成反比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中雌二醇的濃度成反比。3、試劑盒成分:1)包被板,12×8(可拆),96孔,微孔中包被了抗雌二醇的兔單克隆抗體。2)標準品:7支1.0ml/支。分別含量為:0;25;100;250;500;1000;2000pg/ml。(1pg/ml=3.67pmol/L)3)酶聯(lián)結物:1支,25ml,內含辣根過氧化物酶標記的雌二醇。4)底物液:1支,內含,14ml,內含TMB5)終止液:1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接觸終止液,以免造成刺激皮膚和著燒皮膚。6)洗滌液(40×),1支,30ml注:用于樣品稀釋的零標準品視需要而定。4、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)微量移液器和吸嘴25μl、100μl、200μl。3)坐標紙。4)去離子水。5、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存時,其活性在有效期內穩(wěn)定,不要使用過期試劑。所有開封了的試劑都必須儲存于2-8℃的環(huán)境下,微孔反應板也必須貯存于28℃的環(huán)境下。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。6、試劑準備實驗開始前,將所有的試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。洗滌液:在30ml的濃縮洗滌液中加入1170ml去離子水進行稀釋,稀釋好的洗滌液室溫下可穩(wěn)定存放2周。7、樣本采集和準備7.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,室溫下離心獲取血清。血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。7.2樣品的儲存實驗開始前,應當將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放5天。如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣品在實驗前應反復倒置幾次。7.3樣品的稀釋在S次實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于Z高標準品中睪酮的濃度,則應將此樣品用零標準品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測。在計算濃度時應當將此稀釋因子考慮進去。例如:a)按1:10的比例稀釋:10μl的血清+90μl零標準品(充分混合)b)按1:100的比例稀釋:10μl已稀釋好的a)+90μl零標準品(充分混合)8、實驗步驟:所有的標準品、樣品和質控品都做雙份檢測以保證所有的檢測條件都相同。1)將所需數(shù)量的板條固定到板架上。2)將標準品、質控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。4)充分混勻10秒,在這個步驟完全混勻很重要。5)室溫孵育120分種。6)快速棄去孔內反應物,每孔用400μL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。7)在每一微孔中加入100μl底物液。8)室溫孵育15分種。9)加50μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應。10)加終止液后10分鐘之內,用酶標儀在450±10nm處測定OD值。9、結果計算:1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。4)自動計算方法:在IFU上,它用四參數(shù)曲線已自動計算出結果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中HPL濃度高于Z高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應當把此稀釋因子考慮進去。10、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。在一明顯正常人群的研究中,我們使用DRG公司的雌二醇ELISA試劑盒進行檢測得到如下結果:人群5-95%男性10-36pg/ml女性絕經期前絕經期后13-191pg/ml11-65pg/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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激素六項之黃體生成素(LH)ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4黃體生成素(LH)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1289)1、應用范圍DRG公司的LH酶聯(lián)免疫吸附試劑盒可用于血清中黃體生成素(LH)的定量檢測。此檢測試劑盒僅供體外診斷用。2、前言說明在受到下丘腦釋放的黃體生成素釋放激素(LH-RH或者Gn-RH)的影響下,男性和女性的垂體前葉都可以產生LH(黃體生成素)。在男性中,LH也叫做促間質細胞激素(ICSH),它是一種分子量大約為30000道爾頓的糖蛋白。它是由兩條不同的氨基酸鏈通過非共價鍵結合形成的復合物,一條α鏈,一條β鏈。α鏈與在人促甲狀腺激素(TSH)、卵泡刺激素(FSH)和人絨毛膜促性腺激素中找到的α鏈糖蛋白類似。這些激素的不同主要是由于他們β鏈的氨基酸組成不同所造成的,這也使它們產生了不同的免疫學功能。男性中LH的分泌是間歇性的,它的基本功能是刺激間質細胞(萊迪希細胞)分泌睪酮。婦女體內LH濃度的變化會受到正常月經復雜排卵循環(huán)的影響,這也依賴于沿性腺-下丘腦-垂體軸的一系列激素活動。排卵前孕酮和雌二醇水平的降低啟動了每一個月經周期。隨著激素水平的降低,下丘腦就增加促性腺激素釋放激素(GnRF)的分泌,它可依次刺激垂體增加FSH的生產和分泌。增加的FSH水平在卵泡階段可刺激一些卵泡的成熟,其中的一個卵泡就會成熟為含卵子的卵泡。隨著卵泡的發(fā)育,雌二醇就開始分泌,剛開始時很慢,但經過12或13天的正常循環(huán)后它就開始迅速增加。因為垂體的直接刺激和增加的GnRF和FSH水平,雌二醇的就開始迅速增加,隨之LH就開始釋放了。而這些事件正好組成了排卵前期。在LH達到Z高水平后,排卵作用大約會持續(xù)12到18個小時。排卵后就會形成可分泌孕酮和雌激素(這兩種激素是LH的兩個反饋調節(jié)物)的黃體。黃體期迅速的緊隨排卵期而來,黃體期明顯表現(xiàn)為高孕酮水平,雌二醇第二增加,低LH和FSH水平。低LH和FSH水平是沿下丘腦-垂體軸雌二醇和孕酮負反饋反應的結果。受孕后,胚胎的發(fā)育可產生hCG,hCG使得黃體繼續(xù)產生孕酮和雌二醇。如果沒有受孕,黃體就會退化,相應的孕酮和雌二醇水平就會降低,從而導致了月經的形成。隨著這些激素低激素水平的形成,下丘腦就又再次開始一月經周期患性腺機能退減的病人,其血清LH的濃度會增加。由于卵巢的發(fā)育不成熟、原發(fā)性的卵巢功能衰竭、多囊卵巢疾病或絕經等原因,女性體內類固醇激素的分泌會減少,而且在這些情況下,LH的分泌沒有受到調節(jié)。在男性中,但睪丸發(fā)育不正?;虼嬖跓o睪畸形時,也同樣會失去調節(jié)激素。在原發(fā)性睪丸衰竭和克氏綜合征患者中,盡管在雄性激素持續(xù)分泌的情況下LH濃度沒有必要提高,但我們也可發(fā)現(xiàn)其體內存在著高濃度的LH。在腎衰竭、肝硬化、甲狀腺功能亢進和嚴重饑餓的情況下,LH的濃度也可出現(xiàn)提高。垂體前葉激素的分泌不足也可能導致低LH水平。正如人們所預測的,低LH水平可能導致男性和女性不育。雖然LH的低水平在垂體前葉對GnTH刺激反應失效的情況下也會出現(xiàn),但由于下丘腦GnRH分泌的降低,LH的水平就有可能降低。因此低LH水平可表明垂體或下丘腦存在功能障礙,但具體的問題根源必須通過其它實驗確定。在下丘腦、垂體或性腺功能障礙的鑒別診斷中,LH濃度的檢測常與FSH一起進行檢測(以為兩者的功能緊密相連)。此外,激素的水平也可用來確定是否絕經、計算排卵時間和監(jiān)測內分泌治LX果。3、實驗原理DRG公司的LH酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合LH分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性LH的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結有辣根過氧化物酶的抗LH抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結合的酶聯(lián)物。辣根過氧化物酶符合物的總量與樣本中LH的濃度成正相關。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中LH的濃度成正比。4、試劑盒組成:1)微量反應板,1塊(96孔),包被了抗LH的單克隆抗體。2)標準系列:6支,凍干,1ml,濃度:0,10,20,40,100,200mIU/ml3)酶聯(lián)物,1支,11ml,辣根過氧酶標記的抗LH抗血清,0.3%的Proclin作為防腐劑。4)底物液,14ml(TMB)5)終止液:1支,0.5MH2SO4,14ml,避免接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。用于樣品稀釋的零標準品應視需要而定。5、實驗所需器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀2)極ng確移液器,25;50;100μl.3)蒸餾水4)吸水紙5)計時器6)半對數(shù)紙6、儲存條件未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在6周內穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。7、試劑準備實驗開始前,將所有試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。標準品:在每支凍干粉的標準品中加入1.0ml蒸餾水重新配置標準品。注意:配制好的標準品在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放2個月,要想存放更長的時間則應凍存于-20℃的環(huán)境下。8、樣品此實驗將用到血清,請不要使用易溶血、黃疸血和脂血樣品,注意:含疊氮鈉的樣品不可用于此實驗。8.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝固,室溫離心分離血清。未完全凝血前請勿離心,接受了抗凝劑ZL的病人可能需要更長的凝血時間。8.2樣品儲存實驗開始前應用蓋子將樣品密封好,2-8℃下可存放48小時。如果將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下則可將其存放更長時間(只可凍融1次)。解凍的樣本在實驗之前必須要上下倒置幾次。8.3樣品的稀釋:在**次實驗中,樣本濃度高于Z高標準品的樣品應當在實驗前用零緩沖液進行稀釋。在計算濃度時,應當把此稀釋因子考慮進去。例子:a)按1:10稀釋:10μL的血清+90μL的零緩沖液(充分混合)。b)按1:100稀釋:10ul稀釋好的a)+90μL的零緩沖液(充分混合)。9、實驗步驟所有的標準品、樣品和質控品都必須做雙份檢測以保證它們的檢測條件都一樣。每次檢測都必須有一條標準曲線。1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將標準品、質控和血清樣本分別25μl加入到相應的微孔中,每次都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗LH酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內的反應液。用蒸餾水洗板5次(每孔400ul),在吸水紙上把板拍干以除去殘余液體。注意:洗板步驟是否正確會明顯影響實驗的靈敏度和精密度。7)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。8)室溫(22℃)溫育10分鐘。9)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。10)加終止液后10分鐘內在450nm波長讀吸光度。10、結果計算1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一條標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。4)自動計算方法:說明書上的結果是用四參數(shù)計算得到的,其它的歸納方法可能會給出稍微不同的結果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中LH濃度高于Z高標準品的必須進行進一步的稀釋,任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應的稀釋因子考慮進去。11、正常值強烈建議每個實驗室都確定自己的正常值范圍和不正常值范圍。用DRG公司的LHELISA試劑盒對明顯健康人群進行一研究,得到如下結果:人群LH(mIU/ml)成年女性卵泡和黃體期≤20黃體生成素峰20-200女性絕經后20-100男性3-12本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
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促卵泡生成激素(FSH)放免試劑盒說明書
- 核準和修改日期:2007年08月20日碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒說明書碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒說明書【藥品名稱】通用名:碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒英文名:Iodine[125I]HumanFollicleStimulatingHormoneRadioimmunoassayKit漢語拼音:Dian[125I]Renculuanpaoshengcheng極suFangshemianyifenxiYaohe【成分】規(guī)格成分100管50管制品狀態(tài)1)FSH標準品(S0-S6)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)液體2)125I-FSH(紅色)1瓶1瓶凍干品3)兔抗-FSH抗體(藍色)1瓶1瓶凍干品4)驢抗兔免疫分離劑1瓶(50ml)1瓶(25ml)液體5)FSH質控血清2瓶(每瓶1ml)2瓶(每瓶1ml)液體【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應澄清,無沉淀或絮狀物;凍干組分應呈疏松狀,復溶后應無沉淀或絮狀物?!痉派湫院怂匕胨テ凇勘酒匪煤怂貫榈鈁125I],其物理半衰期(T1/2)為60天?!九R床意義】促卵泡生成激素(FollicleStimulatingHormone,FSH)是由垂體前葉嗜堿性細胞分泌的一種糖蛋白激素,其蛋白部分由204個氨基酸構成α和β兩個亞基,α亞基與LH、TSH和HCG相同,只有β亞基具有特異的結構,兩者通過非共價鍵連接,分子量為32KD。FSH在卵泡發(fā)育過程中的作用包括:促進內膜細胞的分化;促進顆粒細胞增生;促進卵泡液分泌,使卵泡及其內腔增大,同時伴有整個卵巢的增大。實驗表明:卵泡發(fā)育的以上幾個階段都須有FSH的參與,而且只有當FSH與LH共同作用時,成熟的卵泡才能分泌雌激素和孕激素。對男性來說,F(xiàn)SH的作用是促進生精上皮細胞的發(fā)育和精子的成熟。本藥盒用于血清中FSH含量的測定,對診斷男、女不孕癥、性功能減退、青春期延遲、性早熟、子宮內膜異位等疾病有非常重要的意義。對作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避yun藥的臨床藥理研究也有很大價值?!緶y定原理】應用均相競爭原理,標準或樣品中的FSH和加入的125I-FSH共同與一定量的特異性抗體產生競爭性免疫結合反應。125I-FSH與抗體的結合量與標準或樣品中FSH的含量呈一定的函數(shù)關系。用免疫分離試劑(PR)將結合部分(B)與游離部分(F)分離后,測定結合部分的放射性強度,并計算相應結合率B/B0。用已知FSH標準含量與對應結合率作圖,即得標準曲線。從標準YZ曲線上查知對應結合率的待測樣品中FSH的含量?!具m用儀器】適用于各類γ-放射免疫分析儀?!緲颖疽蟆咳§o脈血分離血清,待測;如不立即測量,可將樣本密封后,置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y,2~8℃保存不應超過48小時,-20℃保存不超過1個月?!居梅ㄓ昧俊?試劑配制、使用方法和保存FSH標準品:液體,直接使用,標準濃度分別為0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。標準2~8℃保存,42天內穩(wěn)定;未開蓋的標準品2~8℃保存,標識的有效期內穩(wěn)定。125I-FSH:凍干品,用蒸餾水溶解,100管10ml溶解,50管5ml溶解。如一次加樣超過100管,兩瓶混合后使用。標記物放射性不大于111KBq(3μCi),2~8℃保存,標識的有效期內穩(wěn)定。兔抗-FSH抗體:凍干品,用蒸餾水溶解,溶解方法見封底。同次實驗抗體加樣超過100管時,兩瓶溶解后混合使用??贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內穩(wěn)定。驢抗兔免疫分離劑:液體,直接使用,但加樣前必須搖勻!2~8℃保存,有效期內穩(wěn)定。開封后Z多穩(wěn)定45天。若加樣超過100管,兩瓶混合后搖勻。FSH質控血清:使用方法,保存條件,有效期及附值,詳見質控血清使用說明書。2測定步驟取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S0-S6和待測樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑?。┌ù郎y樣品要搖勻,并且**平衡到室溫。操作程序表單位:μl管別試劑NSB管S0~S6管待測樣品管質控管FSH標準品300(S0)200待測樣品200FSH質控血清200125I-FSH100100100100兔抗-FSH抗體100100100混勻,任取三管測總T,36-38℃溫育16~24小時驢抗兔免疫分離劑500500500500充分搖勻后,室溫放置15分鐘,3500轉/分鐘離心15分鐘,吸棄上清,測各沉淀管的放射性計數(shù)(cpm)。3數(shù)據(jù)處理聯(lián)機處理:由電腦自動處理得出結果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶一定要使用適合的處理軟件進行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。手工作圖或計算器處理:百分結合率計算:設S0管計數(shù)為B0,各標準管或樣品管計數(shù)為B,非特異管計數(shù)為NSB,則百分結合率計算公式為B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×1**%3.2.2logit計算:各標準點或樣品管的logit值計算公式為logit=ln[(B/B0)/(1-B/B0)]3.2.3手工作圖:以標準濃度取log值為橫坐標,對應的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標,對應的B/B0為縱坐標在log-logit坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直線)。根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標紙,查出的數(shù)值應取反對數(shù)才是Z后的濃度值。3.2.4計算器處理:使用有線性擬合功能的計算器,可以比較方便地計算出樣品濃度值,具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。3.3標準曲線舉例(僅供參考,不得用于實際計算)。濃度單位mIU/ml項目NSB02.55102550100百分結合率(%)B/TB/B02.24584.877.762.536.421.911.4Log-logit數(shù)據(jù)處理模式主要曲線參數(shù)A=2.82B=-2.41R=-0.9995ED75=5.21=14.8ED25=42.3【參考正常值】正常人血清參考值:男性:2.012mIU/ml(n=60)女性:2.515mIU/ml(n=98)濾泡早期:3.510.0mIU/ml黃體期:3.09.0mIU/ml絕經期:14120mIU/ml(n=17)由于地區(qū)及使用儀器不同,所測的正常值會存在一定的差異,所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實驗室**能建立符合本實驗室要求的正常值范圍?!井a品性能指標】標準范圍:2.5100mIU/ml靈敏度:<1.0mIU/ml精密度:批內變異系數(shù)(CV)<10%;批間變異系數(shù)(CV)<15%。使用期限:見產品外包裝。【禁忌】本品僅供體外診斷用!【注意事項】收到試劑盒后,盡快存放在2~8℃。實驗前全部試劑應放置室溫下平衡。吸棄上清液時,注意不得損失沉淀物,否則將明顯影響測定結果。不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。藥盒請在有效期內使用。臨床標本均應視為有潛在傳染性,請按傳染病實驗室規(guī)程操作。使用本藥盒應注意放射防護,放射性廢棄物須按放射防護條例規(guī)定處理。使用本品的操作人員應經過專業(yè)技術培訓?!举A藏】2~8℃保存。【有效期】1個月?!緢?zhí)行標準】國家食品藥品監(jiān)督管理局《國家藥品標準》,國家藥典委員會編2005年5月,WS1-(R-64)-2004Z??贵w溶解方法:兔抗-FSH抗體:用蒸餾水溶解,100管產品每瓶抗體加ml,50管產品抗體每瓶加ml(如不填寫,50管藥盒用5ml溶解,100管藥盒用10ml溶解,若為液體抗體請直接使用)。[詳細]
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2018-11-24 10:00
產品樣冊
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鴿子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒使用說明書
- 鴿子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒使用說明書[詳細]
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2015-03-12 00:00
實驗操作
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犬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒使用說明書
- 犬促卵泡素(FSH)試劑盒(ELISA)使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中犬促卵泡素(FSH)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被犬促卵泡素(FSH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的犬促卵泡素(FSH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響Z后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本處理1.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。2.實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。5.若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板8孔×12條8孔×6條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標準品濃度依次為:8、4、2、1、0.5、0mIU/mL2.經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過Zda標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。注意事項嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。不能使用過期產品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結果計算以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍:0.25mIU/mL8mIU/mL。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于0.1mIU/mL。3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性:板內變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產品可能存在一定的質量技術風險。2.Z終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關,請務必準備充足的標本備份。3.不同批次的同一產品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內說明書進行實驗操作,網站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結果。問題解答若實驗效果不好,請及時對顯色結果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:問題可能原因解決方案標準曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物,顏色應迅速顯現(xiàn)來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數(shù)時間讀數(shù)在說明書推薦的讀數(shù)時間內讀數(shù)樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復實驗[詳細]
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2018-11-16 10:01
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人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒使用說明書
- 人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒使用說明書僅供研究使用。檢測范圍:0.5U/L-16U/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中促卵泡素(FSH)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人促卵泡素(FSH)。用純化的人促卵泡素(FSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再與HRP標記的促卵泡素(FSH)抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促卵泡素(FSH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人促卵泡素(FSH)濃度。1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(HRP)活性。人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒使用說明書操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。30倍稀釋后備用配液:將30倍濃洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜重復5次,拍干。30秒后棄去,如此加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒使用說明書計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗。8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒使用說明書保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2024-09-29 07:33
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猴子促卵泡素(FSH)elisa試劑盒使用說明書
- 猴子促卵泡素(FSH)elisa試劑盒使用說明書[詳細]
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2024-10-08 05:24
標準
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豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒說明書
- 豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中豬促卵泡素(FSH)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被豬促卵泡素(FSH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬促卵泡素(FSH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板8孔×12條8孔×6條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標準品濃度依次為:24、12、6、3、1.5、0.75mIU/mL2.經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過Zda標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。[詳細]
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2024-09-15 14:31
產品樣冊
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羊促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒說明書
- 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被促卵泡素(FSH)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促卵泡素(FSH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細]
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2018-09-03 10:00
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雞促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒說明書
- 雞促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞促卵泡素(FSH)水平。用純化的雞促卵泡素(FSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再與HRP標記的促卵泡素(FSH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促卵泡素(FSH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞促卵泡素(FSH)濃度。雞促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標試劑3ml×1瓶8標準品(16U/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×4條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。雞促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。8U/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液4U/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液2U/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液1U/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液0.5U/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:雞促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。雞促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2019-01-02 10:00
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兔子促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書
- 兔子促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書[詳細]
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2024-09-29 05:14
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豚鼠促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書
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2024-09-29 04:23
安裝說明
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小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
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2013-12-09 00:00
標準
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豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
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2024-09-22 19:13
其它
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豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
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2024-09-22 23:44
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大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
- 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 10:46
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