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促卵泡生成激素(FSH)放免試劑盒說明書

本文由 南京信帆生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2018-11-24 10:00 820閱讀次數(shù)

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核準(zhǔn)和修改日期:2007年08月20日碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒說明書碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒說明書【藥品名稱】通用名:碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒英文名:Iodine[125I]HumanFollicleStimulatingHormoneRadioimmunoassayKit漢語(yǔ)拼音:Dian[125I]Renculuanpaoshengcheng極suFangshemianyifenxiYaohe【成分】規(guī)格成分100管50管制品狀態(tài)1)FSH標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S6)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)液體2)125I-FSH(紅色)1瓶1瓶?jī)龈善?)兔抗-FSH抗體(藍(lán)色)1瓶1瓶?jī)龈善?)驢抗兔免疫分離劑1瓶(50ml)1瓶(25ml)液體5)FSH質(zhì)控血清2瓶(每瓶1ml)2瓶(每瓶1ml)液體【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清,無(wú)沉淀或絮狀物;凍干組分應(yīng)呈疏松狀,復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物?!痉派湫院怂匕胨テ凇勘酒匪煤怂貫榈鈁125I],其物理半衰期(T1/2)為60天。【臨床意義】促卵泡生成激素(FollicleStimulatingHormone,FSH)是由垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素,其蛋白部分由204個(gè)氨基酸構(gòu)成α和β兩個(gè)亞基,α亞基與LH、TSH和HCG相同,只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu),兩者通過非共價(jià)鍵連接,分子量為32KD。FSH在卵泡發(fā)育過程中的作用包括:促進(jìn)內(nèi)膜細(xì)胞的分化;促進(jìn)顆粒細(xì)胞增生;促進(jìn)卵泡液分泌,使卵泡及其內(nèi)腔增大,同時(shí)伴有整個(gè)卵巢的增大。實(shí)驗(yàn)表明:卵泡發(fā)育的以上幾個(gè)階段都須有FSH的參與,而且只有當(dāng)FSH與LH共同作用時(shí),成熟的卵泡才能分泌雌激素和孕激素。對(duì)男性來(lái)說,F(xiàn)SH的作用是促進(jìn)生精上皮細(xì)胞的發(fā)育和精子的成熟。本藥盒用于血清中FSH含量的測(cè)定,對(duì)診斷男、女不孕癥、性功能減退、青春期延遲、性早熟、子宮內(nèi)膜異位等疾病有非常重要的意義。對(duì)作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避yun藥的臨床藥理研究也有很大價(jià)值?!緶y(cè)定原理】應(yīng)用均相競(jìng)爭(zhēng)原理,標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的FSH和加入的125I-FSH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。125I-FSH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中FSH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離試劑(PR)將結(jié)合部分(B)與游離部分(F)分離后,測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度,并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知FSH標(biāo)準(zhǔn)含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖,即得標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)YZ曲線上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中FSH的含量。【適用儀器】適用于各類γ-放射免疫分析儀?!緲颖疽蟆咳§o脈血分離血清,待測(cè);如不立即測(cè)量,可將樣本密封后,置于2~8℃或-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè),2~8℃保存不應(yīng)超過48小時(shí),-20℃保存不超過1個(gè)月?!居梅ㄓ昧俊?試劑配制、使用方法和保存FSH標(biāo)準(zhǔn)品:液體,直接使用,標(biāo)準(zhǔn)濃度分別為0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。標(biāo)準(zhǔn)2~8℃保存,42天內(nèi)穩(wěn)定;未開蓋的標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存,標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。125I-FSH:凍干品,用蒸餾水溶解,100管10ml溶解,50管5ml溶解。如一次加樣超過100管,兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi),2~8℃保存,標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。兔抗-FSH抗體:凍干品,用蒸餾水溶解,溶解方法見封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過100管時(shí),兩瓶溶解后混合使用??贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。驢抗兔免疫分離劑:液體,直接使用,但加樣前必須搖勻!2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。開封后Z多穩(wěn)定45天。若加樣超過100管,兩瓶混合后搖勻。FSH質(zhì)控血清:使用方法,保存條件,有效期及附值,詳見質(zhì)控血清使用說明書。2測(cè)定步驟取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S0-S6和待測(cè)樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑?。┌ù郎y(cè)樣品要搖勻,并且**平衡到室溫。操作程序表單位:μl管別試劑NSB管S0~S6管待測(cè)樣品管質(zhì)控管FSH標(biāo)準(zhǔn)品300(S0)200待測(cè)樣品200FSH質(zhì)控血清200125I-FSH100100100100兔抗-FSH抗體100100100混勻,任取三管測(cè)總T,36-38℃溫育16~24小時(shí)驢抗兔免疫分離劑500500500500充分搖勻后,室溫放置15分鐘,3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘,吸棄上清,測(cè)各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)(cpm)。3數(shù)據(jù)處理聯(lián)機(jī)處理:由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。手工作圖或計(jì)算器處理:百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×1**%3.2.2logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為logit=ln[(B/B0)/(1-B/B0)]3.2.3手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時(shí)是一條直線)。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是Z后的濃度值。3.2.4計(jì)算器處理:使用有線性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說明書。3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例(僅供參考,不得用于實(shí)際計(jì)算)。濃度單位mIU/ml項(xiàng)目NSB02.55102550100百分結(jié)合率(%)B/TB/B02.24584.877.762.536.421.911.4Log-logit數(shù)據(jù)處理模式主要曲線參數(shù)A=2.82B=-2.41R=-0.9995ED75=5.21=14.8ED25=42.3【參考正常值】正常人血清參考值:男性:2.012mIU/ml(n=60)女性:2.515mIU/ml(n=98)濾泡早期:3.510.0mIU/ml黃體期:3.09.0mIU/ml絕經(jīng)期:14120mIU/ml(n=17)由于地區(qū)及使用儀器不同,所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異,所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實(shí)驗(yàn)室**能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍?!井a(chǎn)品性能指標(biāo)】標(biāo)準(zhǔn)范圍:2.5100mIU/ml靈敏度:<1.0mIU/ml精密度:批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<10%;批間變異系數(shù)(CV)<15%。使用期限:見產(chǎn)品外包裝?!窘伞勘酒穬H供體外診斷用!【注意事項(xiàng)】收到試劑盒后,盡快存放在2~8℃。實(shí)驗(yàn)前全部試劑應(yīng)放置室溫下平衡。吸棄上清液時(shí),注意不得損失沉淀物,否則將明顯影響測(cè)定結(jié)果。不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。藥盒請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性,請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù),放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。【貯藏】2~8℃保存?!居行凇?個(gè)月?!緢?zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》,國(guó)家藥典委員會(huì)編2005年5月,WS1-(R-64)-2004Z。抗體溶解方法:兔抗-FSH抗體:用蒸餾水溶解,100管產(chǎn)品每瓶抗體加ml,50管產(chǎn)品抗體每瓶加ml(如不填寫,50管藥盒用5ml溶解,100管藥盒用10ml溶解,若為液體抗體請(qǐng)直接使用)。

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