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激素六項之孕酮(PRG)ELISA 試劑盒使用說明書
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2018-11-14 10:00 998閱讀次數(shù)
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4孕酮(PRG)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1561)1、前言孕酮是一種類固醇激素,含21個碳原子,在C-3上連有酮基,在C-4與在C-5之間為雙鍵連接。該類固醇激素是一種女性性激素,與雌激素共同在月經(jīng)周期中調(diào)節(jié)附屬的器官,它對于胚細胞著床前的子宮內(nèi)膜增生狀態(tài)和維持孕期是特別重要的。在非孕期婦女懷孕的胎盤成為主要來源。極少數(shù)來源于兩性的腎上腺皮質(zhì)。孕酮在循環(huán)血中主要與皮質(zhì)類固醇結(jié)合蛋白(CBG),性激素結(jié)合蛋白(SHBG)和白蛋白結(jié)合,僅有循環(huán)總濃度的2-10%是游離激素。根據(jù)月經(jīng)循環(huán)周期血孕酮濃度范圍很寬,在卵泡期可以低于1ng/ml(3.2nmol/L),在黃體期達到10-20ng/ml(32-64nmol/L)。在排卵后4-7天達到Z高水平保持4-6天,在月經(jīng)開始前24小時降至排卵前的水平,因為孕酮的升高和降低與卵巢卵泡和黃體的活動相對應(yīng),因此血漿孕酮的測定在臨床上常用來證明排卵和非孕婦女的黃體功能正常。假如排卵沒有發(fā)生,黃體則沒有生成進而孕酮升高的循環(huán)也不能見到,異常的孕酮分泌與經(jīng)前期緊張子宮內(nèi)膜異位癥痛經(jīng)和黃體不全有關(guān)。孕酮濃度不僅個體之間有差異,而且同一個人每天甚至每個小時都會不同,一般的在婦科內(nèi)分泌紊亂或異常妊娠為了恰當?shù)慕忉尣∫蜻B續(xù)測定比單個測定更有意義。在孕期孕酮更多的由胎盤產(chǎn)生,血漿水平在這個時期穩(wěn)定在200ng/ml的水平。2、實驗原理DRG公司的孕酮酶免試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合孕酮分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性孕酮的病人樣本與辣根過氧酶標記的孕酮競爭性的結(jié)合包被板上的抗體。溫育之后,未結(jié)合的酶聯(lián)物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結(jié)合量與樣品中孕酮的濃度成反比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中孕酮的濃度成反比。3、試劑盒成分1)預包被反應(yīng)板,12條X8孔,96孔,微孔中包被了單克隆的抗孕酮抗體。2)標準品系列,7支,1ml,濃度:0;0.3;1.25;2.5;5;15;40ng/ml,轉(zhuǎn)換系數(shù):1ng/ml=3.18nmol/ml,內(nèi)含0.3%的Proclin防腐劑,3)酶聯(lián)結(jié)物,1支,25ml,辣根過氧酶標記的孕酮,內(nèi)含0.3%的Proclin防腐劑。4)底物液,1支,25ml,TMB5)終止液,1支,14ml,內(nèi)含0.5M的H2SO46)濃縮洗滌液(40X),1支,30ml.注:用于樣品稀釋的零標準品應(yīng)視需要而定。4、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存時,其活性在有效期內(nèi)穩(wěn)定,不要使用過期試劑。所有開封了的試劑都必須儲存于2-8℃的環(huán)境下,微孔反應(yīng)板也必須貯存于28℃的環(huán)境下。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。6、試劑準備實驗開始前,將所有的試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。洗滌液:在30ml的濃縮洗滌液中加入1170ml去離子水進行稀釋,稀釋好的洗滌液室溫下可穩(wěn)定存放2周。7、樣本采集和準備此實驗中要使用到血清或血漿(EDTA-,肝素血漿),不要使用溶血、黃疸血或脂血樣品。請注意:含疊氮鈉的樣品不能用于此實驗中。7.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清。未完全凝血前請勿離心,接受了抗凝劑ZL的病人樣品可能需要更長的凝血時間。血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。7.2樣品的儲存實驗開始前,應(yīng)當將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放24個小時。如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣品在實驗前應(yīng)反復倒置幾次。7.3樣品的稀釋在S次實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于Z高標準品中睪酮的濃度,則應(yīng)將此樣品用零標準品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測。在計算濃度時應(yīng)當將此稀釋因子考慮進去。例如:a)按1:10的比例稀釋:10μl的血清+90μl零標準品(充分混合)b)按1:100的比例稀釋:10μl已稀釋好的a)+90μl零標準品(充分混合)8、實驗步驟:1)將所需數(shù)量的板條固定到板架上。2)將標準品、質(zhì)控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應(yīng)的微孔中。3)室溫溫育5分鐘。4)在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。5)充分混勻10秒,在這個步驟完全混勻很重要。6)室溫孵育60分種。7)快速棄去孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用400μL蒸餾水洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。8)在每一微孔中加入200μl底物液。9)室溫孵育15分種。10)加100μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應(yīng)。11)加終止液后10分鐘之內(nèi),用酶標儀在450±10nm處測定OD值。9、結(jié)果計算1)計算每個標準品、質(zhì)控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應(yīng)的濃度值進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應(yīng)的濃度。4)自動計算方法:在IFU上,它用四參數(shù)曲線已自動計算出結(jié)果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結(jié)果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中孕酮濃度高于Z高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應(yīng)當把此稀釋因子考慮進去。10、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。在一明顯正常人群的研究中,我們使用DRG公司的孕酮ELISA試劑盒進行檢測得到如下結(jié)果:正常女性:卵泡期0.2-1.4ng/ml黃體期425ng/ml絕經(jīng)期0.11ng/ml正常男性:0.11ng/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431
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激素六項之孕酮(PRG)ELISA 試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4孕酮(PRG)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1561)1、前言孕酮是一種類固醇激素,含21個碳原子,在C-3上連有酮基,在C-4與在C-5之間為雙鍵連接。該類固醇激素是一種女性性激素,與雌激素共同在月經(jīng)周期中調(diào)節(jié)附屬的器官,它對于胚細胞著床前的子宮內(nèi)膜增生狀態(tài)和維持孕期是特別重要的。在非孕期婦女懷孕的胎盤成為主要來源。極少數(shù)來源于兩性的腎上腺皮質(zhì)。孕酮在循環(huán)血中主要與皮質(zhì)類固醇結(jié)合蛋白(CBG),性激素結(jié)合蛋白(SHBG)和白蛋白結(jié)合,僅有循環(huán)總濃度的2-10%是游離激素。根據(jù)月經(jīng)循環(huán)周期血孕酮濃度范圍很寬,在卵泡期可以低于1ng/ml(3.2nmol/L),在黃體期達到10-20ng/ml(32-64nmol/L)。在排卵后4-7天達到Z高水平保持4-6天,在月經(jīng)開始前24小時降至排卵前的水平,因為孕酮的升高和降低與卵巢卵泡和黃體的活動相對應(yīng),因此血漿孕酮的測定在臨床上常用來證明排卵和非孕婦女的黃體功能正常。假如排卵沒有發(fā)生,黃體則沒有生成進而孕酮升高的循環(huán)也不能見到,異常的孕酮分泌與經(jīng)前期緊張子宮內(nèi)膜異位癥痛經(jīng)和黃體不全有關(guān)。孕酮濃度不僅個體之間有差異,而且同一個人每天甚至每個小時都會不同,一般的在婦科內(nèi)分泌紊亂或異常妊娠為了恰當?shù)慕忉尣∫蜻B續(xù)測定比單個測定更有意義。在孕期孕酮更多的由胎盤產(chǎn)生,血漿水平在這個時期穩(wěn)定在200ng/ml的水平。2、實驗原理DRG公司的孕酮酶免試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合孕酮分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性孕酮的病人樣本與辣根過氧酶標記的孕酮競爭性的結(jié)合包被板上的抗體。溫育之后,未結(jié)合的酶聯(lián)物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結(jié)合量與樣品中孕酮的濃度成反比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中孕酮的濃度成反比。3、試劑盒成分1)預包被反應(yīng)板,12條X8孔,96孔,微孔中包被了單克隆的抗孕酮抗體。2)標準品系列,7支,1ml,濃度:0;0.3;1.25;2.5;5;15;40ng/ml,轉(zhuǎn)換系數(shù):1ng/ml=3.18nmol/ml,內(nèi)含0.3%的Proclin防腐劑,3)酶聯(lián)結(jié)物,1支,25ml,辣根過氧酶標記的孕酮,內(nèi)含0.3%的Proclin防腐劑。4)底物液,1支,25ml,TMB5)終止液,1支,14ml,內(nèi)含0.5M的H2SO46)濃縮洗滌液(40X),1支,30ml.注:用于樣品稀釋的零標準品應(yīng)視需要而定。4、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存時,其活性在有效期內(nèi)穩(wěn)定,不要使用過期試劑。所有開封了的試劑都必須儲存于2-8℃的環(huán)境下,微孔反應(yīng)板也必須貯存于28℃的環(huán)境下。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。6、試劑準備實驗開始前,將所有的試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。洗滌液:在30ml的濃縮洗滌液中加入1170ml去離子水進行稀釋,稀釋好的洗滌液室溫下可穩(wěn)定存放2周。7、樣本采集和準備此實驗中要使用到血清或血漿(EDTA-,肝素血漿),不要使用溶血、黃疸血或脂血樣品。請注意:含疊氮鈉的樣品不能用于此實驗中。7.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清。未完全凝血前請勿離心,接受了抗凝劑ZL的病人樣品可能需要更長的凝血時間。血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。7.2樣品的儲存實驗開始前,應(yīng)當將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放24個小時。如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣品在實驗前應(yīng)反復倒置幾次。7.3樣品的稀釋在S次實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于Z高標準品中睪酮的濃度,則應(yīng)將此樣品用零標準品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測。在計算濃度時應(yīng)當將此稀釋因子考慮進去。例如:a)按1:10的比例稀釋:10μl的血清+90μl零標準品(充分混合)b)按1:100的比例稀釋:10μl已稀釋好的a)+90μl零標準品(充分混合)8、實驗步驟:1)將所需數(shù)量的板條固定到板架上。2)將標準品、質(zhì)控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應(yīng)的微孔中。3)室溫溫育5分鐘。4)在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。5)充分混勻10秒,在這個步驟完全混勻很重要。6)室溫孵育60分種。7)快速棄去孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用400μL蒸餾水洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。8)在每一微孔中加入200μl底物液。9)室溫孵育15分種。10)加100μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應(yīng)。11)加終止液后10分鐘之內(nèi),用酶標儀在450±10nm處測定OD值。9、結(jié)果計算1)計算每個標準品、質(zhì)控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應(yīng)的濃度值進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應(yīng)的濃度。4)自動計算方法:在IFU上,它用四參數(shù)曲線已自動計算出結(jié)果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結(jié)果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中孕酮濃度高于Z高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應(yīng)當把此稀釋因子考慮進去。10、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。在一明顯正常人群的研究中,我們使用DRG公司的孕酮ELISA試劑盒進行檢測得到如下結(jié)果:正常女性:卵泡期0.2-1.4ng/ml黃體期425ng/ml絕經(jīng)期0.11ng/ml正常男性:0.11ng/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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激素六項之 泌乳素(PRL) ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4泌乳素(PRL)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA1291)1、實驗原理DRG公司的泌乳素酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合泌乳素分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性泌乳素的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結(jié)有辣根過氧化物酶的抗泌乳素抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。結(jié)合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中泌乳素的濃度成正相關(guān)。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中泌乳素的濃度成正比。2、試劑盒成分1)微量反應(yīng)板,1塊(96孔),微孔中包被了抗泌乳素的單克隆抗體。2)酶聯(lián)物,11ml,辣根過氧酶標記的泌乳素抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)標準系列,6支(凍干粉),濃度:0;5;20;50;100;200ng/ml轉(zhuǎn)換系數(shù)(1ng/ml=21.1mUI/mL)5)終止液,0.5M的H2SO4,6ml3、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)標準水箱5)蒸餾水6)計時器4、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內(nèi)可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應(yīng)板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在2個月內(nèi)穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。5、樣品的采集1)靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清,避免溶血。注意:此試劑盒只能使用沒用任何添加劑的樣品。2)必須蓋住樣本并在實驗之前于2-8℃下可貯存48小時。樣品需要更長的貯存時間,則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣本在檢測之前必須上下倒置幾次。注意:用于此試劑盒的樣品不能含有任何添加劑。6、試劑的準備參考標準:在凍干的標準品中加入1.0ml雙蒸水。注:配制好了的標準品可在2-8℃下穩(wěn)定存放2個月。想要存放更長時間應(yīng)當將其凍存于-20℃的環(huán)境下。7、一般注意事項1)實驗開始前,將所有試劑和樣本都平衡至室溫,試劑混合時避免起泡。2)實驗一旦開始,所有的步驟應(yīng)完整地進行下去。3)每一樣品的取樣都得使用新的取樣吸頭。4)吸光度與溫育時間和溫度有關(guān),在實驗開始后所有的試劑都應(yīng)準備好,以保證加液時間的一致。5)本試劑盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之間(室溫22℃,顯色10分鐘以內(nèi))。如果ZdaOD值高于您酶標儀的上限或低于1.000,則相應(yīng)的減少或延長顯色反應(yīng)的溫育時間。一般情況下,酶免反應(yīng)的強度與時間和溫度成線性,這使得操作者應(yīng)當適當?shù)恼{(diào)整物理化學環(huán)境。8、實驗步驟1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將黃體生成素標準系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、質(zhì)控和血清樣本分別25μl加入到相應(yīng)的微孔中,每一樣品都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗泌乳素酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內(nèi)的反應(yīng)液。7)用蒸餾水洗板5次。8)在吸水紙上把板拍干。9)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。10)室溫(22℃)溫育10分鐘。11)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。12)10分鐘內(nèi)在450±10nm波長讀吸光度。9、結(jié)果計算1)計算每個標準品、質(zhì)控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應(yīng)的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一條標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應(yīng)的濃度。根據(jù)自己的實際經(jīng)驗或計算機的功能,也可以采用其它的歸納方法進行計算。4)如果樣本的濃度高于Z高濃度的標準品的濃度或者濃度>200ng/ml,則需要進行稀釋,任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應(yīng)的稀釋因子考慮進去。10、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。以下結(jié)果是以一定量正常人群的血液樣本為準得出的實驗結(jié)果:性別平均值(ng/ml)S.D.(ng/ml)5%(ng/ml)95%(ng/ml)男性6.445.500.9420.94女性14.275.882.3925.15靈敏度:Z小檢測出的泌乳素濃度為0.35ng/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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激素六項之睪酮(TES)ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4睪酮(TES)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1559)1、前言DRG公司的睪酮酶免試劑盒可用于人血清和血漿中睪酮的定量檢測。此試劑盒僅供體外診斷用。睪酮(17β-羥基-4-雄烯-3-烷)是一種19C的類固醇激素,它在C-4和C-5間含一個不飽和鍵,C-3位置有一個酮基,C-17的β位上有一個羥基。此類固醇激素的分子量為288.47。睪酮是分泌到血液中Z主要的雄性激素。在男性中,睪酮主要由睪丸的間質(zhì)細胞分泌;在女性中,處于循環(huán)中的睪酮50%來源于外周雄烯二酮的轉(zhuǎn)換,25%來源于卵巢,25%來源于腎上腺。睪酮負責男性第二性征的形成,檢測睪酮濃度有助于評價性腺機能減退的狀態(tài)。在女性中,在很多疾病中睪酮的濃度都很高,如:多毛癥,女子男性化,多囊卵巢癥,卵巢癌,腎上腺癌和腎上腺增生。而在男性中,高水平的睪酮通常與下丘腦垂體疾病、睪丸癌、先天性腎上腺增生和前列腺癌有關(guān)。在患下列疾病的病人體內(nèi),通??砂l(fā)現(xiàn)睪酮水平很低:垂體機能減退癥、克氏綜合征、睪丸女性化綜合征、睪丸切除術(shù)、隱睪病、酶缺陷和一些自身免疫疾病。2、實驗原理DRG公司的睪酮酶免試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合睪酮分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性睪酮的病人樣本與辣根過氧酶標記的睪酮競爭性的結(jié)合包被板上的抗體。溫育之后,未結(jié)合的酶聯(lián)物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結(jié)合量與樣品中睪酮的濃度成反比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中睪酮的濃度成反比。3、試劑盒成份1)預包被反應(yīng)板,12×8孔,包被板上包被了單克隆的鼠抗睪酮抗體。2)標準品系列,共7支,1.0ml/支,濃度:0;0.2;0.5;1;2;6;16ng/ml。轉(zhuǎn)換系數(shù):1ng/ml=3.467nmol/l。3)酶聯(lián)結(jié)物,1支,25ml,內(nèi)含辣根過氧酶標記的睪酮。4)底物/顯色劑,1支,25ml,內(nèi)含TMB。5)終止液,1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。6)濃縮洗滌液(40X),1支,30ml。注意:用于樣品稀釋的零標準品因視需要而定。4、實驗所需材料(但試劑盒不提供)1)標準移液器2)酶標儀3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑盒的儲存與穩(wěn)定性未開啟的試劑在28℃下貯存時,其活性在有效期內(nèi)穩(wěn)定,不要使用過期試劑。所有開封了的試劑都必須儲存于2-8℃的環(huán)境下,微孔反應(yīng)板也必須貯存于28℃的環(huán)境下。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。6、試劑準備洗滌液的準備吸取40×濃度的洗滌液30mL用1170mL的蒸餾水混合定容至1200mL,稀釋好的洗滌液在室溫能保存2周7、樣品在此實驗中將用到血清或血漿(EDTA-,肝素-或檸檬酸血漿),不要使用溶血、黃疸血或脂血樣品。請注意:含有疊氮化鈉的樣本不能使用7.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,室溫下離心獲取血清。血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。7.2樣品的儲存實驗開始前,應(yīng)當將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放5天。如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣品在實驗前應(yīng)反復倒置幾次。7.3樣品的稀釋在S次實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于Z高標準品中睪酮的濃度,則應(yīng)將此樣品用零標準品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測。在計算濃度時應(yīng)當將此稀釋因子考慮進去。例如:a)按1:10的比例稀釋:10μl的血清+90μl零標準品(充分混合)b)按1:100的比例稀釋:10μl已稀釋好的a)+90μl零標準品(充分混合)8、一般注意事項1)所有試劑和樣本在使用之前必須平衡至室溫。所有試劑必須搖勻但不能起泡沫。2)一旦檢測開始,所有的操作步驟必須進行到底不能中斷。3)為了避免交叉放映,每一標準品、質(zhì)控品和樣品的取樣都必須使用新的取樣吸頭。4)吸光度值是由孵育的時間和溫度所決定的。在實驗開始之前,建議準備好所有的藥劑旋開蓋子。5)將所需檢測的微孔板條固定在板架上等。這些準備工作將確保每次的加液步驟所需時間相同,沒有中斷。按一般的規(guī)律,酶免反應(yīng)的強度與時間和溫度成線性比例。9、實驗步驟:1)將所需數(shù)量的板條固定到板架上。2)將標準品、質(zhì)控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應(yīng)的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。4)充分混勻10秒,在這個步驟完全混勻很重要。5)室溫孵育60分種。6)快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用400μL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。7)在每一微孔中加入200μl底物液。8)室溫孵育15分種。9)加100μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應(yīng)。10)加終止液后10分鐘之內(nèi),用酶標儀在450±10nm處測定OD值。10、結(jié)果計算1)計算每個標準品、質(zhì)控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應(yīng)的濃度值進行標繪,作一條標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應(yīng)的濃度。4)自動計算方法:在IFU上,它用四參數(shù)曲線已自動計算出結(jié)果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結(jié)果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中HPL濃度高于Z高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應(yīng)當把此稀釋因子考慮進去。11、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。在一次明顯正常人群的研究中,我們使用DRG公司的睪酮ELISA試劑盒進行檢測得到如下結(jié)果:人群5%95%男性2.0ng/ml6.9ng/ml女性0.26ng/ml1.22ng/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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激素六項之 雌二醇 (E2) ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4雌二醇(E2)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA2693)1、前言說明E2是一種含一個酚A環(huán)的18C類固醇激素。此類固醇激素的分子量為272.4,它是人體中Z有效的雌激素,主要由女性卵巢的格拉芬卵泡和胎盤產(chǎn)生,少量由腎上腺和男性睪丸產(chǎn)生。E2(雌二醇)被分泌到血液中,在血液中有98%的雌二醇會結(jié)合到性激素結(jié)合蛋白上,有的還會結(jié)合到其它血清蛋白上(如血清白蛋白),只有很少一部分以游離形式存在。雌激素的活性會受到雌二醇受體符合物的影響,此符合物可在靶位并在核酸水平上引發(fā)相應(yīng)的反應(yīng)。這些靶位包括:卵泡、子宮、乳房、陰道、尿道、下丘腦、垂體和敏感稍低的肝臟與皮膚。在月經(jīng)周期正常的未懷孕女性體內(nèi),雌二醇的分泌遵循著一種循環(huán)模式,在排卵前有兩個明顯的高峰期。高濃度的雌二醇可在垂體水平發(fā)揮正反饋作用,它會影響垂體促性腺激素的分泌,如卵泡刺激素和黃體生成素,前者是卵泡成熟所必要的,后者是排卵形成所必要的。排卵后,雌二醇水平迅速下降直到黃體細胞被激活,結(jié)果雌二醇水平出現(xiàn)第二次高峰,并在黃體階段達到一平衡述評。在懷孕期間,母體血清雌二醇的水平會極度的增加,并且會超過排卵前的峰值,而且在整個孕期維持在高水平上。血清雌二醇的檢測是評價各種月經(jīng)功能障礙的一個有效指標,例如女性早熟和晚熟,原發(fā)性、續(xù)發(fā)性閉經(jīng)和絕經(jīng)癥。據(jù)報道,女性化綜合征、男子女性型乳房和睪丸癌患者的血清雌二醇水平會升高。在不孕患者體內(nèi),血清雌二醇的檢測有利于監(jiān)測藥物ZL(如克羅米酚檸檬酸鹽、促黃體生成素釋放激素或外源性促性腺激素)后排卵的感應(yīng)情況。在因為體外受精而引起的卵巢過度刺激綜合征患者中,每天監(jiān)測血清雌二醇濃度以便為hCG的管理和卵母細胞的采集提供**時間。2、檢測原理:DRG公司的雌二醇酶免試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合雌二醇分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性雌二醇的病人樣本與辣根過氧酶標記的雌二醇競爭性的結(jié)合包被板上的抗體。溫育之后,未結(jié)合的酶聯(lián)物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結(jié)合量與樣品中雌二醇的濃度成反比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中雌二醇的濃度成反比。3、試劑盒成分:1)包被板,12×8(可拆),96孔,微孔中包被了抗雌二醇的兔單克隆抗體。2)標準品:7支1.0ml/支。分別含量為:0;25;100;250;500;1000;2000pg/ml。(1pg/ml=3.67pmol/L)3)酶聯(lián)結(jié)物:1支,25ml,內(nèi)含辣根過氧化物酶標記的雌二醇。4)底物液:1支,內(nèi)含,14ml,內(nèi)含TMB5)終止液:1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接觸終止液,以免造成刺激皮膚和著燒皮膚。6)洗滌液(40×),1支,30ml注:用于樣品稀釋的零標準品視需要而定。4、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)微量移液器和吸嘴25μl、100μl、200μl。3)坐標紙。4)去離子水。5、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存時,其活性在有效期內(nèi)穩(wěn)定,不要使用過期試劑。所有開封了的試劑都必須儲存于2-8℃的環(huán)境下,微孔反應(yīng)板也必須貯存于28℃的環(huán)境下。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。6、試劑準備實驗開始前,將所有的試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。洗滌液:在30ml的濃縮洗滌液中加入1170ml去離子水進行稀釋,稀釋好的洗滌液室溫下可穩(wěn)定存放2周。7、樣本采集和準備7.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,室溫下離心獲取血清。血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。7.2樣品的儲存實驗開始前,應(yīng)當將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放5天。如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣品在實驗前應(yīng)反復倒置幾次。7.3樣品的稀釋在S次實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于Z高標準品中睪酮的濃度,則應(yīng)將此樣品用零標準品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測。在計算濃度時應(yīng)當將此稀釋因子考慮進去。例如:a)按1:10的比例稀釋:10μl的血清+90μl零標準品(充分混合)b)按1:100的比例稀釋:10μl已稀釋好的a)+90μl零標準品(充分混合)8、實驗步驟:所有的標準品、樣品和質(zhì)控品都做雙份檢測以保證所有的檢測條件都相同。1)將所需數(shù)量的板條固定到板架上。2)將標準品、質(zhì)控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應(yīng)的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。4)充分混勻10秒,在這個步驟完全混勻很重要。5)室溫孵育120分種。6)快速棄去孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用400μL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。7)在每一微孔中加入100μl底物液。8)室溫孵育15分種。9)加50μl終止液到每個檢測孔中終止酶反應(yīng)。10)加終止液后10分鐘之內(nèi),用酶標儀在450±10nm處測定OD值。9、結(jié)果計算:1)計算每個標準品、質(zhì)控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應(yīng)的濃度值進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應(yīng)的濃度。4)自動計算方法:在IFU上,它用四參數(shù)曲線已自動計算出結(jié)果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結(jié)果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中HPL濃度高于Z高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應(yīng)當把此稀釋因子考慮進去。10、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。在一明顯正常人群的研究中,我們使用DRG公司的雌二醇ELISA試劑盒進行檢測得到如下結(jié)果:人群5-95%男性10-36pg/ml女性絕經(jīng)期前絕經(jīng)期后13-191pg/ml11-65pg/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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激素六項之卵泡刺激素(FSH)ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4卵泡刺激素(FSH)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1288)1、應(yīng)用范圍DRG公司的卵泡刺激素酶免試劑盒可用于血清中FSH(卵泡刺激素)的定量檢測。此檢測試劑盒僅供體外診斷用。2、前言說明FSH和LH兩者密切的控制著性腺組織的生長和的繁殖活動,性腺組織通過負反饋的構(gòu)效關(guān)系合成和分泌雄性激素和雌性激素。FSH是垂體前葉嗜堿細胞分泌的一種糖蛋白。下丘腦產(chǎn)生的促性腺激素釋放激素(GnRH)可控制垂體前葉FSH的釋放。和其它糖蛋白一樣,如:LH、TSH和HCG,F(xiàn)SH由兩個亞單位組成,分別為α和β。這種類型的激素其α亞單位在結(jié)構(gòu)上都非常類似,因此每一激素的生物學和免疫學活性主要依賴于其β亞單位的獨特性。在女性中,F(xiàn)SH直接作用于粒細胞的受體而刺激卵泡的生長和成熟;從而增加卵泡類固醇激素的分泌和LH的產(chǎn)生。產(chǎn)生的LH之后結(jié)合到卵泡膜細胞上并刺激類固醇的分泌。在接近卵泡成熟時,卵巢內(nèi)雌二醇的水平就開始增加,于是雌二醇的刺激作用可增加FSH受體的活性和FSH卵泡性結(jié)合。因此,在女性中,F(xiàn)SH、LH和雌二醇密切相連促進卵巢的發(fā)育和成熟。在絕經(jīng)后、閹割和卵巢早衰的情況下,F(xiàn)SH的水平會表現(xiàn)為提高。通過雌激素的調(diào)節(jié)(雌激素表現(xiàn)的是一種負反饋機制),F(xiàn)SH的水平可能會變得規(guī)范化。FSH和LH、FSH和雌激素之間關(guān)系的不正常與神經(jīng)性食欲缺乏癥和多囊卵巢并相關(guān)聯(lián)。當FSH隨機抽樣的濃度超過10mIU/mL時表明患有卵巢衰竭疾病的這一觀點,人們對此存在著明顯的異議。男性中,生精小管的發(fā)育和精子發(fā)生的維持同樣會受到FSH的調(diào)節(jié)。然而和雌激素不一樣,雄性激素并不會降低FSH的水平,因此它僅與血清LH之間表現(xiàn)為負反饋的關(guān)系。因為對FSH還不是完全了解,但人們發(fā)現(xiàn)精子稀少的男性通常FSH水平會提高。如通過放免檢測得到的結(jié)果:睪丸癌一般會降低血清FSH濃度,而提高LH濃度。因此人們推測:LH濃度的明顯增加可能是通過與由睪丸癌分泌的hCG樣物質(zhì)的交叉反應(yīng)所造成的。在原發(fā)性睪丸功能障礙和克氏綜合征男性患者中,我們可發(fā)現(xiàn)高濃度的FSH水平。FSH濃度的提高同樣也出現(xiàn)在饑餓、腎功能衰竭、甲狀腺功能亢進和肝硬化的情況下。3、實驗原理DRG公司的FSH酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實驗(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合FSH分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性FSH的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結(jié)有辣根過氧化物酶的抗FSH抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。結(jié)合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中FSH的濃度成正相關(guān)。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中FSH的濃度成正比。4、試劑盒成分1)微量反應(yīng)板,1塊(96孔),微孔中包被了抗FSH的單克隆抗體。2)酶聯(lián)物,1ml,內(nèi)含抗辣根過氧酶標記的抗FSH抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)標準系列,6支(凍干粉),即:0,5,10,20,50,100mIU/ml,轉(zhuǎn)換系數(shù):1ng/ml=0.34mIU/ml。5)終止液:0.5M的H2SO4,,6ml5、實驗需要器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀(450±10nm)。2)移液器3)吸水紙4)標準水箱5)蒸餾水6、試劑貯存:未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內(nèi)可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應(yīng)板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在6周內(nèi)穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。7、樣品的采集1)靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下用離心機分離血清,避免溶血。2)必須蓋住樣本并在實驗之前于2-8℃下可貯存48小時。樣品需要更長的貯存時間,則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下。解凍的樣本在檢測之前必須上下倒置幾次。注意:用于此試劑盒的樣品不能含有任何添加劑。8、試劑的準備參考標準:在凍干的標準品中加入1.0ml雙蒸水。注意:配制好了的標準品可在2-8℃下穩(wěn)定存放2個月。想要存放更長時間應(yīng)當將其凍存于-20℃的環(huán)境下。9、一般注意事項1)實驗開始前,將所有試劑和樣本都平衡至室溫,試劑混合時避免起泡。2)實驗一旦開始,所有的步驟應(yīng)完整地進行下去。3)每一樣品的取樣都得使用新的取樣吸頭。4)吸光度與溫育時間和溫度有關(guān),在實驗開始后所有的試劑都應(yīng)準備好,以保證加液時間的一致。5)本試劑盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之間(室溫22℃,顯色10分鐘以內(nèi))。如果ZdaOD值高于您酶標儀的上限或低于1.000,則相應(yīng)的減少或延長顯色反應(yīng)的溫育時間。一般情況下,酶免反應(yīng)的強度與時間和溫度成線性,這使得操作者應(yīng)當適當?shù)恼{(diào)整物理化學環(huán)境。10、實驗步驟1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將黃體生成素標準系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、質(zhì)控和血清樣本分別25μl加入到相應(yīng)的微孔中,每一樣品都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗FSH酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內(nèi)的反應(yīng)液。7)用蒸餾水洗板5次。8)在吸水紙上把板拍干。9)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。10)室溫(22℃)溫育10分鐘。11)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。12)10分鐘內(nèi)在450nm波長讀吸光度。11、結(jié)果計算1)計算每個標準品、質(zhì)控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應(yīng)的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應(yīng)的濃度。根據(jù)自己的實際經(jīng)驗或計算機的功能,也可以采用其它的歸納方法進行計算。4)任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應(yīng)的稀釋因子考慮進去。12、參考值我們強烈建議各個實驗市都建立自己的正常值和異常值。以下結(jié)果是以一定量正常人群的血液樣本為準得出的實驗結(jié)果:樣本FSH范圍(mIU/ml)男性2.010女性卵泡期2.010循環(huán)中期7.020黃體期2.0--10絕經(jīng)后女性20100-------------------------------------------------------------------------------靈敏度:Z小檢測卵泡刺激素濃度,1mIU/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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激素六項之黃體生成素(LH)ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4黃體生成素(LH)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1289)1、應(yīng)用范圍DRG公司的LH酶聯(lián)免疫吸附試劑盒可用于血清中黃體生成素(LH)的定量檢測。此檢測試劑盒僅供體外診斷用。2、前言說明在受到下丘腦釋放的黃體生成素釋放激素(LH-RH或者Gn-RH)的影響下,男性和女性的垂體前葉都可以產(chǎn)生LH(黃體生成素)。在男性中,LH也叫做促間質(zhì)細胞激素(ICSH),它是一種分子量大約為30000道爾頓的糖蛋白。它是由兩條不同的氨基酸鏈通過非共價鍵結(jié)合形成的復合物,一條α鏈,一條β鏈。α鏈與在人促甲狀腺激素(TSH)、卵泡刺激素(FSH)和人絨毛膜促性腺激素中找到的α鏈糖蛋白類似。這些激素的不同主要是由于他們β鏈的氨基酸組成不同所造成的,這也使它們產(chǎn)生了不同的免疫學功能。男性中LH的分泌是間歇性的,它的基本功能是刺激間質(zhì)細胞(萊迪希細胞)分泌睪酮。婦女體內(nèi)LH濃度的變化會受到正常月經(jīng)復雜排卵循環(huán)的影響,這也依賴于沿性腺-下丘腦-垂體軸的一系列激素活動。排卵前孕酮和雌二醇水平的降低啟動了每一個月經(jīng)周期。隨著激素水平的降低,下丘腦就增加促性腺激素釋放激素(GnRF)的分泌,它可依次刺激垂體增加FSH的生產(chǎn)和分泌。增加的FSH水平在卵泡階段可刺激一些卵泡的成熟,其中的一個卵泡就會成熟為含卵子的卵泡。隨著卵泡的發(fā)育,雌二醇就開始分泌,剛開始時很慢,但經(jīng)過12或13天的正常循環(huán)后它就開始迅速增加。因為垂體的直接刺激和增加的GnRF和FSH水平,雌二醇的就開始迅速增加,隨之LH就開始釋放了。而這些事件正好組成了排卵前期。在LH達到Z高水平后,排卵作用大約會持續(xù)12到18個小時。排卵后就會形成可分泌孕酮和雌激素(這兩種激素是LH的兩個反饋調(diào)節(jié)物)的黃體。黃體期迅速的緊隨排卵期而來,黃體期明顯表現(xiàn)為高孕酮水平,雌二醇第二增加,低LH和FSH水平。低LH和FSH水平是沿下丘腦-垂體軸雌二醇和孕酮負反饋反應(yīng)的結(jié)果。受孕后,胚胎的發(fā)育可產(chǎn)生hCG,hCG使得黃體繼續(xù)產(chǎn)生孕酮和雌二醇。如果沒有受孕,黃體就會退化,相應(yīng)的孕酮和雌二醇水平就會降低,從而導致了月經(jīng)的形成。隨著這些激素低激素水平的形成,下丘腦就又再次開始一月經(jīng)周期患性腺機能退減的病人,其血清LH的濃度會增加。由于卵巢的發(fā)育不成熟、原發(fā)性的卵巢功能衰竭、多囊卵巢疾病或絕經(jīng)等原因,女性體內(nèi)類固醇激素的分泌會減少,而且在這些情況下,LH的分泌沒有受到調(diào)節(jié)。在男性中,但睪丸發(fā)育不正?;虼嬖跓o睪畸形時,也同樣會失去調(diào)節(jié)激素。在原發(fā)性睪丸衰竭和克氏綜合征患者中,盡管在雄性激素持續(xù)分泌的情況下LH濃度沒有必要提高,但我們也可發(fā)現(xiàn)其體內(nèi)存在著高濃度的LH。在腎衰竭、肝硬化、甲狀腺功能亢進和嚴重饑餓的情況下,LH的濃度也可出現(xiàn)提高。垂體前葉激素的分泌不足也可能導致低LH水平。正如人們所預測的,低LH水平可能導致男性和女性不育。雖然LH的低水平在垂體前葉對GnTH刺激反應(yīng)失效的情況下也會出現(xiàn),但由于下丘腦GnRH分泌的降低,LH的水平就有可能降低。因此低LH水平可表明垂體或下丘腦存在功能障礙,但具體的問題根源必須通過其它實驗確定。在下丘腦、垂體或性腺功能障礙的鑒別診斷中,LH濃度的檢測常與FSH一起進行檢測(以為兩者的功能緊密相連)。此外,激素的水平也可用來確定是否絕經(jīng)、計算排卵時間和監(jiān)測內(nèi)分泌治LX果。3、實驗原理DRG公司的LH酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合LH分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性LH的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結(jié)有辣根過氧化物酶的抗LH抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。辣根過氧化物酶符合物的總量與樣本中LH的濃度成正相關(guān)。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中LH的濃度成正比。4、試劑盒組成:1)微量反應(yīng)板,1塊(96孔),包被了抗LH的單克隆抗體。2)標準系列:6支,凍干,1ml,濃度:0,10,20,40,100,200mIU/ml3)酶聯(lián)物,1支,11ml,辣根過氧酶標記的抗LH抗血清,0.3%的Proclin作為防腐劑。4)底物液,14ml(TMB)5)終止液:1支,0.5MH2SO4,14ml,避免接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。用于樣品稀釋的零標準品應(yīng)視需要而定。5、實驗所需器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀2)極ng確移液器,25;50;100μl.3)蒸餾水4)吸水紙5)計時器6)半對數(shù)紙6、儲存條件未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內(nèi)可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應(yīng)板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在6周內(nèi)穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。7、試劑準備實驗開始前,將所有試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。標準品:在每支凍干粉的標準品中加入1.0ml蒸餾水重新配置標準品。注意:配制好的標準品在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放2個月,要想存放更長的時間則應(yīng)凍存于-20℃的環(huán)境下。8、樣品此實驗將用到血清,請不要使用易溶血、黃疸血和脂血樣品,注意:含疊氮鈉的樣品不可用于此實驗。8.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝固,室溫離心分離血清。未完全凝血前請勿離心,接受了抗凝劑ZL的病人可能需要更長的凝血時間。8.2樣品儲存實驗開始前應(yīng)用蓋子將樣品密封好,2-8℃下可存放48小時。如果將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下則可將其存放更長時間(只可凍融1次)。解凍的樣本在實驗之前必須要上下倒置幾次。8.3樣品的稀釋:在**次實驗中,樣本濃度高于Z高標準品的樣品應(yīng)當在實驗前用零緩沖液進行稀釋。在計算濃度時,應(yīng)當把此稀釋因子考慮進去。例子:a)按1:10稀釋:10μL的血清+90μL的零緩沖液(充分混合)。b)按1:100稀釋:10ul稀釋好的a)+90μL的零緩沖液(充分混合)。9、實驗步驟所有的標準品、樣品和質(zhì)控品都必須做雙份檢測以保證它們的檢測條件都一樣。每次檢測都必須有一條標準曲線。1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將標準品、質(zhì)控和血清樣本分別25μl加入到相應(yīng)的微孔中,每次都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗LH酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內(nèi)的反應(yīng)液。用蒸餾水洗板5次(每孔400ul),在吸水紙上把板拍干以除去殘余液體。注意:洗板步驟是否正確會明顯影響實驗的靈敏度和精密度。7)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。8)室溫(22℃)溫育10分鐘。9)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。10)加終止液后10分鐘內(nèi)在450nm波長讀吸光度。10、結(jié)果計算1)計算每個標準品、質(zhì)控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應(yīng)的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一條標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應(yīng)的濃度。4)自動計算方法:說明書上的結(jié)果是用四參數(shù)計算得到的,其它的歸納方法可能會給出稍微不同的結(jié)果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中LH濃度高于Z高標準品的必須進行進一步的稀釋,任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應(yīng)的稀釋因子考慮進去。11、正常值強烈建議每個實驗室都確定自己的正常值范圍和不正常值范圍。用DRG公司的LHELISA試劑盒對明顯健康人群進行一研究,得到如下結(jié)果:人群LH(mIU/ml)成年女性卵泡和黃體期≤20黃體生成素峰20-200女性絕經(jīng)后20-100男性3-12本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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孕激素/孕酮Elisa試劑盒使用說明書
- 小鼠孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,細胞上清及相關(guān)液體樣本中孕激素/孕酮(PROG)含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠孕激素/孕酮(PROG)水平。用純化的小鼠孕激素/孕酮(PROG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入孕激素/孕酮(PROG),再與HRP標記的孕激素/孕酮(PROG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的孕激素/孕酮(PROG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠孕激素/孕酮(PROG)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:1800pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200pmol/L,800pmol/L,400pmol/L,200pmol/L,100pmol/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:70pmol/L-1500pmol/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
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鱘魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒使用說明書
- 鱘魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理鱘魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中鱘魚孕激素/孕酮(PROG)水平。用純化的鱘魚孕激素/孕酮(PROG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入孕激素/孕酮(PROG),再與HRP標記的孕激素/孕酮(PROG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的孕激素/孕酮(PROG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中鱘魚孕激素/孕酮(PROG)濃度。鱘魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(1600pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。鱘魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。800pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液400pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液200pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液100pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液50pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。鱘魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。鱘魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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雞孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒使用說明書
- 雞孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理雞孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中雞孕激素/孕酮(PROG)水平。用純化的雞孕激素/孕酮(PROG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入孕激素/孕酮(PROG),再與HRP標記的孕激素/孕酮(PROG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的孕激素/孕酮(PROG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞孕激素/孕酮(PROG)濃度。雞孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(4800pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。雞孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2400pmol/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液1200pmol/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液600pmol/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液300pmol/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液150pmol/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。雞孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。雞孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2019-01-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒使用說明書
- 牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中牛孕激素/孕酮(PROG)水平。用純化的牛孕激素/孕酮(PROG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入孕激素/孕酮(PROG),再與HRP標記的孕激素/孕酮(PROG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的孕激素/孕酮(PROG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中牛孕激素/孕酮(PROG)濃度。牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(2400pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。1200pmol/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液600pmol/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液300pmol/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液150pmol/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液75pmol/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2024-10-02 16:58
產(chǎn)品樣冊
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犬孕酮(P)ELISA檢測試劑盒使用說明書下載
- Elisa試劑盒檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被犬孕酮(P)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的犬孕酮(P)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。小鼠Elisa試劑盒,小鼠PGE1Elisa試劑盒,MouseProstaglandinE1,PG-E1ELISA試劑盒HumanCoronavirusesIgGELISA試劑盒人(CoronavirusesIgG)kit說明書,冠狀病毒Elisa試劑盒Humantransforminggrowthfactorα,TGF-αELISA試劑盒人(TGF-α)kit說明書,轉(zhuǎn)化生長因子αElisa試劑盒CAS:9002-07-7,胰蛋白酶(豬胰)/Trypsin(porcinepancreas),BR;1:250,25克,2~8℃CAS:2530-83-8,硅烷偶聯(lián)劑KH560/γ-(2,3環(huán)氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷/γ-縮水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷/3-(2,3-環(huán)氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷/3-縮水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷/γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷/GLYMO,BR,98%,1公斤,RTMouseSolubleClusterofdifferentiation40ligand,sCD40LELISAKit,小鼠elisa試劑盒,小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體試劑盒,(sCD40L)Elisa試劑盒RatInterleukin-2receptor,IL-2RELISAkit,大鼠elisa試劑盒,大鼠白介素2受體試劑盒,(IL-大鼠2R)Elisa試劑盒人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒人甲狀旁腺激素Elisa試劑盒,(PTH)Elisa試劑盒humanParathyroidhormone,PTHELISA試劑盒[詳細]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
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供應(yīng)魚促性腺激素釋放激素ELISA試劑盒使用說明書
- 供應(yīng)魚促性腺激素釋放激素ELISA試劑盒使用說明書[詳細]
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2015-04-15 00:00
應(yīng)用文章
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饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒說明書
- 饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlFⅧ-Ag大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96TFⅢ大鼠凝血因子Ⅲ規(guī)格:48T/96TFⅡ大鼠凝血因子Ⅱ規(guī)格:48T/96TTR大鼠凝血酶受體規(guī)格:48T/96TTAT大鼠凝血酶抗凝血酶復合物規(guī)格:48T/96TGelsolin大鼠凝溶膠蛋白規(guī)格:48T/96TCS大鼠檸檬酸合酶規(guī)格:48T/96TPLAUR/uPAR大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體規(guī)格:48T/96TuPA大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格:48T/96TUK大鼠尿激酶規(guī)格:48T/96TBDNF大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格:48T/96TBNP大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格:48T/96TNGB大鼠腦紅蛋白規(guī)格:48T/96TBGP/Gehrelin大鼠腦腸肽規(guī)格:48T/96Tvisfatin大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素規(guī)格:48T/96Tvaspin大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶YZ劑規(guī)格:48T/96TGC大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素規(guī)格:48T/96TEL大鼠內(nèi)皮脂肪酶規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2024-10-05 07:47
產(chǎn)品樣冊
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孕酮(PROG)Elisa試劑盒
- 小鼠孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,細胞上清及相關(guān)液體樣本中孕激素/孕酮(PROG)含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠孕激素/孕酮(PROG)水平。用純化的小鼠孕激素/孕酮(PROG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入孕激素/孕酮(PROG),再與HRP標記的孕激素/孕酮(PROG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的孕激素/孕酮(PROG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠孕激素/孕酮(PROG)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:1800pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200pmol/L,800pmol/L,400pmol/L,200pmol/L,100pmol/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:70pmol/L-1500pmol/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
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17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒說明書
- 17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlVK1大鼠維生素K1規(guī)格:48T/96TVE大鼠維生素E規(guī)格:48T/96TVD3大鼠維生素D3規(guī)格:48T/96TVD2大鼠維生素D2規(guī)格:48T/96TVD大鼠維生素D規(guī)格:48T/96TVC大鼠維生素C規(guī)格:48T/96TVB6大鼠維生素B6規(guī)格:48T/96TVB12大鼠維生素B12規(guī)格:48T/96TVA大鼠維生素A規(guī)格:48T/96Tomentin大鼠網(wǎng)膜素規(guī)格:48T/96TAGEs大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格:48T/96TDPD大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉規(guī)格:48T/96TDHEA-S大鼠脫氫表雄酮硫酸酯規(guī)格:48T/96THABP大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96THA大鼠透明質(zhì)酸規(guī)格:48T/96TFE大鼠鐵蛋白規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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猴孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒說明書
- 猴孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中猴孕激素/孕酮(PROG)水平。用純化的猴孕激素/孕酮(PROG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入孕激素/孕酮(PROG),再與HRP標記的孕激素/孕酮(PROG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的孕激素/孕酮(PROG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴孕激素/孕酮(PROG)濃度。猴孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(2400pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。猴孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。1200pmol/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液600pmol/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液300pmol/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液150pmol/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液75pmol/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。猴孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照猴孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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褪黑激素ELISA Kit使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用說明書(德國IBL:RE54021)1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用,已經(jīng)被人們認為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達到Z高。褪黑激素特有的波動變化可以反映出一些關(guān)于時間變化的信息,如夜晚的長短。褪黑激素的分泌會受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用,它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報道,褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致,如:失眠、時差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素,之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關(guān)性。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。生物素和非生物素標記的抗原競爭性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達到平衡后,洗板除去游離的生物素抗原,結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標記物和對硝基苯磷酸底物檢測出來。用已知的標準品數(shù)據(jù)做一條標準曲線,將未知樣品的酶活性與標準曲線進行比較就可以定量出未知樣品的量。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存,避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時,試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復使用4次。5、樣品的采集與儲存血清,血漿(EDTA,肝素)按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品,血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?;鞚岬臉悠窇?yīng)當在實驗開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射,避免反復凍融。穩(wěn)定性24小時3個月1年6、試劑盒成分數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克隆)。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素,凍干,內(nèi)含穩(wěn)定劑。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸鹽抗血清,凍干粉,內(nèi)含抗血清(兔,多克?。┖头€(wěn)定劑。1×250ulENZCONJCONC酶聯(lián)物,80倍濃縮,內(nèi)含堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體(羊)、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。1×6×2mlCALA-FLYO標準品A-F,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,提取濃度請見試劑瓶標簽或QC質(zhì)控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,濃度/可接受范圍請見試劑瓶標簽。1×50mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液,10倍濃縮,內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和穩(wěn)定劑。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片,密封于鋁鉑金屬袋中,內(nèi)含對硝基苯硫酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液,即用,內(nèi)含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液,即用,內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱,即用,C18RP,1m3/100mg。另需提取柱可從IBL定夠(編號:KEME761)3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1)移液器,體積:50;500ul2)試管(12×75mm)3)軌道振蕩器(400-600rpm)4)旋渦混合器5)帶儲器的8道移液器6)洗滌瓶,自動或半自動洗板機7)離心機(冷凍離心機更適宜):200-500×g,也可選用多頭抽真空裝置(例如:Mallinekrodt-Baker或Waters)。8)甲醇(HPLC級)9)蒸發(fā)離心機10)可在405nm處讀數(shù)的酶標儀(參考波長600-650nm)11)蒸餾水或去離子水12)吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成3次進行。下列所述體積為檢測32人份時所需要的量。8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性15ml檢測緩沖液150ml雙蒸水1:102-8℃4周標準品和質(zhì)控品2.0ml雙蒸水靜置15min,混合時避免氣泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸餾水靜置15min,混合時避免氣泡臨時配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸餾水靜置15min,混合時避免氣泡70ul酶聯(lián)物5.6ml已稀釋的檢測緩沖液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液10ml未稀釋甲醇100ml蒸餾水10%(v/v)如果溶液的需要量比較大,應(yīng)該將試管內(nèi)的溶液混合.避免反復凍融。8.2樣品的稀釋如果懷疑樣品中的褪黑激素濃度比Z高標準品的高,必須將樣品在提取步驟前用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。8.3樣品、標準品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛≈┌凑沾瞬襟E進行提取,提取量大約為90-1**%。為了避免柱子堵塞,提取樣品前將樣品過濾或離心一下。注意每份樣品、標準品和質(zhì)控品都必須提取,提取必須提前進行。干燥的提取物(甲醇蒸發(fā)后)可在2-8℃或-20℃下儲存24個小時。用甲醇洗提后,提取柱就可以用于下一份樣品的提取或是存放到2-8℃的環(huán)境下。提取柱可以反復使用4次。如果是重復使用,在再次從A.1開始(柱的調(diào)制)。A、標準版本:離心與蒸發(fā)離心步驟1.柱的調(diào)制1將提取柱放到聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇(未稀釋的),200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸餾水,200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。4為了避免柱子變干,請立即提取樣品。2.樣品提取5將提取柱放到相應(yīng)的標記聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)。6向提取柱中加入0.5ml標準品、質(zhì)控品和樣品,200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。3、洗滌7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇(蒸餾水稀釋),500g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。4、提取物的洗脫8將提取柱放到新的標記聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)9向提取柱中加入1ml未稀釋的甲醇,200g離心1min使溶劑通過提取柱。10將提取柱從試管中移出,避免液滴還停留在柱子中。將柱子用于下一份樣品的提取或存放于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復使用四次。5.提取物的蒸發(fā)和重新配置11用蒸發(fā)離心機將甲醇蒸發(fā)掉。12用0.15ml的蒸餾水重新稀釋配置樣品13旋渦混和1分鐘,并立即檢測樣品。B、選擇性版本:用多頭抽真空裝置代替離心機提取步驟仍然按照A1-5進行,柱子不變。用真空和≤5ml/min的流速使溶劑通過柱子。樣品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸發(fā)離心機或氮氣蒸發(fā)干燥溶劑。9、實驗步驟1將提取好的標準品、質(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素抗血清。4蓋板,輕輕震板,2-8℃下溫育14-20小時。5移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的檢測緩沖液洗板3次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時配置好的酶聯(lián)物。7蓋板,室溫(18-25℃)軌道振蕩器上(500rpm)溫育120min。8大約在溫育結(jié)束10分鐘前準備好PNPP底物液。9移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的檢測緩沖液洗板3次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。10如果有8道移液器,請用8道移液器加底物液和終止液,加底物液和終止液的時間間隔應(yīng)當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。11在每一微孔中加入200ul臨時配置好的PNPP底物液。12室溫(18-25℃)軌道振蕩器上(500rpm)溫育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP終止液,輕輕震板以使溶液混合均勻。14加終止液后60min內(nèi)在405nm處讀取OD值。(參考波長:600-650nm)10、結(jié)果計算在半對數(shù)坐標紙上或自動計算的方法,以標準品的OD值(Y軸,線性)對其濃度(X軸,對數(shù))做一條標準曲線。使用三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程可以得到更好的標準曲線。在推算標準曲線時,應(yīng)當充分利用好每一個標準品數(shù)值(明顯逸出的數(shù)值應(yīng)當被忽略,再使用更加合理的數(shù)值代替它)。樣品的濃度可以從標準曲線上直接讀取。從坐標紙上讀取結(jié)果時應(yīng)當把起始的稀釋倍數(shù)考慮進去。將稀釋了的樣品結(jié)果乘以稀釋因子即可得到其相應(yīng)的結(jié)果。樣品中抗體濃度高于Z高標準品的樣品,應(yīng)當按實驗前準備說明所述的方法進行稀釋,并重新檢測。轉(zhuǎn)換系數(shù):褪黑激素(pg/ml)×4.30=pmol/l典型標準曲線(例子:不能用來定量)標準品褪黑激素(pg/ml)平均OD值OD/ODmax(%)A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值實驗結(jié)果不能當作確定ZL結(jié)果的**因素,疾病的判斷還應(yīng)當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。對明顯健康的一組人群進行研究發(fā)現(xiàn),人體內(nèi)的褪黑激素水平有著明顯的生理周期變化,褪黑激素白天的水平很低,而晚上的水平則很高,而且個體之間的差異也很大。此外,褪黑激素的水平也與年齡有關(guān)系,其Z高濃度是在嬰兒(3歲)樣品中發(fā)現(xiàn)的。對6個明顯健康獻血者的褪黑激素生理周期進行研究。褪黑激素大概在白天下午四點Zdi,其平均值是4.6pg/ml;早晨4點達到**,平均值為77.5pg/ml。健康個體之間的褪黑激素Z高值差異很大,建議每個實驗室都確定自己實驗室的正常值范圍。本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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黑線倉鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA 試劑盒使用說明書
- 黑線倉鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA 試劑盒使用說明書[詳細]
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2015-04-03 00:00
操作手冊
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供應(yīng)魚褪黑激素(melatonin)ELISA 試劑盒使用說明書
- 供應(yīng)魚褪黑激素(melatonin)ELISA 試劑盒使用說明書[詳細]
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2015-03-25 00:00
安裝說明
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兔促黃體生成激素(LH)ELISA試劑盒使用說明書
- 兔促黃體生成激素(LH)ELISA試劑盒使用說明書(96T)本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:2.5mIU/ml-80mIU/ml使用目的:本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體生成激素(LH)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中兔促黃體生成激素(LH)水平。用純化的兔促黃體生成激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成激素(LH),再與HRP標記的促黃體生成激素(LH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔促黃體生成激素(LH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(160mIU/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。80mIU/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液40mIU/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液20mIU/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液10mIU/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液5mIU/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊
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