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Elisa試劑盒抗原對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作影響
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本文由 上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒供應(yīng)商 整理匯編
2018-11-16 10:02 486閱讀次數(shù)
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在Elisa實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,關(guān)鍵步驟的操作要領(lǐng)需要熟練掌握。在實(shí)驗(yàn)的影響因素中,使用儀器要求、試驗(yàn)的重復(fù)性、樣品的稀釋等,在后面的技術(shù)內(nèi)容中,上海恒遠(yuǎn)生物公司會(huì)為大家逐一介紹。今天我們來(lái)看一看,論Elisa試劑盒抗原對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作影響:Elisa中,包被于固相載體表面的抗原或抗體的來(lái)源和制備方法對(duì)試驗(yàn)結(jié)果都有影響。包被所用的抗原必須是可溶性的,而且要求是優(yōu)質(zhì)和穩(wěn)定的制劑,純度和免疫原性要高。如果不純,由于抗原中所含雜質(zhì)就會(huì)競(jìng)爭(zhēng)固相載體上的有限位置,降低敏感性和特異性。此外還應(yīng)考慮到制備包被抗原不應(yīng)破壞其免疫學(xué)活性。經(jīng)試驗(yàn)證明,適用于其他血清學(xué)試驗(yàn)的抗原并非均適合用于Elisa法。因此,對(duì)某一疾病的診斷,必須通過(guò)實(shí)踐,才能選出適用的優(yōu)質(zhì)抗原。對(duì)大多數(shù)傳染病和寄生蟲(chóng)病的血清學(xué)診斷中所用的抗原并非要求十分嚴(yán)格,一般能用于補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的可溶性抗原均可用于Elisa,例如超聲波抗原、凍融抗原、細(xì)菌的外膜抗原、脂多糖(LPS)、細(xì)菌的外毒素以及用表面活性劑(如SDS)所提取的抗原等,在作Elisa時(shí),必須要有1-2種試劑、要求純化,但用表面活性劑提取的抗原在包被前必須透析除去表面活性劑,否則就不易吸附到固相載體上去。此外,對(duì)某些抗原必須進(jìn)行提純,如病毒的組織培養(yǎng)和雞胚培養(yǎng)物以及病毒接種動(dòng)物的臟器等,它們當(dāng)中存在著許多非抗原的蛋白質(zhì),必須設(shè)法除去,常用梯度超速離心或親和層析法提純,不經(jīng)提純是不能使用的。在用特異性抗體包被固相載體時(shí)也要提純。用抗原或抗體蛋白包被固相載體時(shí)選擇的濃度要適當(dāng)。如濃度太高,則低效價(jià)抗體可能測(cè)不出來(lái),或包被過(guò)量形成多層抗原吸附,故在操作過(guò)程中可能脫落從而降低敏感性和可重復(fù)性。用Z適稀釋度抗原,包被固相載體不僅經(jīng)濟(jì),而且可以克服前帶現(xiàn)象。那么用多大濃度抗原進(jìn)行包被Z為合適呢?可通過(guò)棋盤(pán)滴定法進(jìn)行測(cè)定,但用單項(xiàng)滴定法更為簡(jiǎn)便,其方法是將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板,再用一定稀釋度的陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為Z適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。抗原包被固相載體除濃度外,對(duì)時(shí)間、溫度、PH均有關(guān)系。溫度高(如37℃、45℃、或56℃),包被時(shí)間可縮短,溫度低可延長(zhǎng)包被時(shí)間。但為了方便起見(jiàn),通常采用4℃包被過(guò)一夜,可使抗原吸附得更加完全且均勻。在用聚苯乙烯或聚乙烯微量反應(yīng)板或塑料管作固相載體時(shí),在堿性條件下(如0.1mol/L、PH9.6碳酸鹽緩沖液稀釋抗原)4℃包被過(guò)一夜較為合適。但在某些試驗(yàn)中,如用LPS或毒素蛋白包被時(shí),用PH7.2-7.4PBS稀釋才是滿意的。包被特異蛋白質(zhì)的濃度為1-10ug/ml,而對(duì)某些病原微生物抗原以5-20ug/ml較為合適,但均應(yīng)通過(guò)滴定。血清、血漿或其他體液,均可作為Elisa試驗(yàn)樣品(標(biāo)本)。但應(yīng)注意分離血清時(shí),血液要求放置室溫中凝固收縮,不宜置冰箱(4℃)中凝固,否則會(huì)使大部分IgM和少量IgG喪失活性。關(guān)于人血清在保存過(guò)程中抗體的穩(wěn)定性報(bào)導(dǎo)尚不多。但一般認(rèn)為作Elisa血清**要新鮮,若要貯藏,必須少量分裝保存于低溫冰箱,并防止反復(fù)凍融。血漿可用肝素毛細(xì)管法采血,而血清可用濾紙片法采血。我公司Elisa試劑盒僅供科研使用。產(chǎn)品質(zhì)量過(guò)硬,價(jià)格優(yōu)惠,歡迎廣大客戶電詢我司業(yè)務(wù)員。
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Elisa試劑盒抗原對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作影響
- 在Elisa實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,關(guān)鍵步驟的操作要領(lǐng)需要熟練掌握。在實(shí)驗(yàn)的影響因素中,使用儀器要求、試驗(yàn)的重復(fù)性、樣品的稀釋等,在后面的技術(shù)內(nèi)容中,上海恒遠(yuǎn)生物公司會(huì)為大家逐一介紹。今天我們來(lái)看一看,論Elisa試劑盒抗原對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作影響:Elisa中,包被于固相載體表面的抗原或抗體的來(lái)源和制備方法對(duì)試驗(yàn)結(jié)果都有影響。包被所用的抗原必須是可溶性的,而且要求是優(yōu)質(zhì)和穩(wěn)定的制劑,純度和免疫原性要高。如果不純,由于抗原中所含雜質(zhì)就會(huì)競(jìng)爭(zhēng)固相載體上的有限位置,降低敏感性和特異性。此外還應(yīng)考慮到制備包被抗原不應(yīng)破壞其免疫學(xué)活性。經(jīng)試驗(yàn)證明,適用于其他血清學(xué)試驗(yàn)的抗原并非均適合用于Elisa法。因此,對(duì)某一疾病的診斷,必須通過(guò)實(shí)踐,才能選出適用的優(yōu)質(zhì)抗原。對(duì)大多數(shù)傳染病和寄生蟲(chóng)病的血清學(xué)診斷中所用的抗原并非要求十分嚴(yán)格,一般能用于補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的可溶性抗原均可用于Elisa,例如超聲波抗原、凍融抗原、細(xì)菌的外膜抗原、脂多糖(LPS)、細(xì)菌的外毒素以及用表面活性劑(如SDS)所提取的抗原等,在作Elisa時(shí),必須要有1-2種試劑、要求純化,但用表面活性劑提取的抗原在包被前必須透析除去表面活性劑,否則就不易吸附到固相載體上去。此外,對(duì)某些抗原必須進(jìn)行提純,如病毒的組織培養(yǎng)和雞胚培養(yǎng)物以及病毒接種動(dòng)物的臟器等,它們當(dāng)中存在著許多非抗原的蛋白質(zhì),必須設(shè)法除去,常用梯度超速離心或親和層析法提純,不經(jīng)提純是不能使用的。在用特異性抗體包被固相載體時(shí)也要提純。用抗原或抗體蛋白包被固相載體時(shí)選擇的濃度要適當(dāng)。如濃度太高,則低效價(jià)抗體可能測(cè)不出來(lái),或包被過(guò)量形成多層抗原吸附,故在操作過(guò)程中可能脫落從而降低敏感性和可重復(fù)性。用Z適稀釋度抗原,包被固相載體不僅經(jīng)濟(jì),而且可以克服前帶現(xiàn)象。那么用多大濃度抗原進(jìn)行包被Z為合適呢?可通過(guò)棋盤(pán)滴定法進(jìn)行測(cè)定,但用單項(xiàng)滴定法更為簡(jiǎn)便,其方法是將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板,再用一定稀釋度的陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為Z適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別??乖还滔噍d體除濃度外,對(duì)時(shí)間、溫度、PH均有關(guān)系。溫度高(如37℃、45℃、或56℃),包被時(shí)間可縮短,溫度低可延長(zhǎng)包被時(shí)間。但為了方便起見(jiàn),通常采用4℃包被過(guò)一夜,可使抗原吸附得更加完全且均勻。在用聚苯乙烯或聚乙烯微量反應(yīng)板或塑料管作固相載體時(shí),在堿性條件下(如0.1mol/L、PH9.6碳酸鹽緩沖液稀釋抗原)4℃包被過(guò)一夜較為合適。但在某些試驗(yàn)中,如用LPS或毒素蛋白包被時(shí),用PH7.2-7.4PBS稀釋才是滿意的。包被特異蛋白質(zhì)的濃度為1-10ug/ml,而對(duì)某些病原微生物抗原以5-20ug/ml較為合適,但均應(yīng)通過(guò)滴定。血清、血漿或其他體液,均可作為Elisa試驗(yàn)樣品(標(biāo)本)。但應(yīng)注意分離血清時(shí),血液要求放置室溫中凝固收縮,不宜置冰箱(4℃)中凝固,否則會(huì)使大部分IgM和少量IgG喪失活性。關(guān)于人血清在保存過(guò)程中抗體的穩(wěn)定性報(bào)導(dǎo)尚不多。但一般認(rèn)為作Elisa血清**要新鮮,若要貯藏,必須少量分裝保存于低溫冰箱,并防止反復(fù)凍融。血漿可用肝素毛細(xì)管法采血,而血清可用濾紙片法采血。我公司Elisa試劑盒僅供科研使用。產(chǎn)品質(zhì)量過(guò)硬,價(jià)格優(yōu)惠,歡迎廣大客戶電詢我司業(yè)務(wù)員。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豬瘟病毒抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)方法
- 豬瘟病毒抗原(CSFV-Ag)酶聯(lián)免疫分析試劑盒僅供研究使用實(shí)驗(yàn)原理采用雙抗體夾心法測(cè)定血清或血漿中豬瘟病毒抗原(CSFV-Ag)。用純化的豬瘟病毒抗原(CSFV-Ag)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中瘟病毒抗原(CSFV-Ag)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的瘟病毒抗原(CSFV-Ag)k抗體結(jié)合,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中豬瘟病毒抗原(CSFV-Ag)的存在與否。實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。5.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),參考波長(zhǎng)為630nm6.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月注:以上信息僅供參考,具體參考步驟以隨貨說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。上海華壹生物科技有限公司ShanghaiHuaYiBioTechnologyCo.,Ltd網(wǎng)址:http://www.huayi-bio.com電話:021-24209195,13661674336[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠乙型肝炎e抗原elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
- 實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乙型肝炎e抗原(HBeAg),再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙型肝炎e抗原(HBeAg)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160IU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置對(duì)發(fā)泡能力的影響
- 液體形成泡沫的能力與產(chǎn)生泡沫的方法密切相關(guān)。 TECLIS 泡沫分析儀可用于通過(guò)毛孔玻璃介質(zhì)將氣體鼓入到液體中或通過(guò)液體的機(jī)械攪拌來(lái)產(chǎn)生泡沫。
每次實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置的選擇,如液體體積、攪拌速度、毛孔玻璃介質(zhì)孔隙率、氣體流速、溫度……都會(huì)影響測(cè)量結(jié)果。[詳細(xì)]
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2022-07-19 11:13
應(yīng)用文章
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人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
- 人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。[詳細(xì)]
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2023-08-07 17:21
應(yīng)用文章
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小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
- 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。本生試劑盒[詳細(xì)]
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2023-09-07 10:50
應(yīng)用文章
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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理與操作步驟
- 上海勁馬生物科技有限公司ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理與操作步驟實(shí)驗(yàn)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法操作步驟:具體請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)(詳細(xì)說(shuō)明書(shū)請(qǐng)聯(lián)系我司業(yè)務(wù)人員:021-60517348,13817140470。)注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2024-09-11 18:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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實(shí)驗(yàn)用水對(duì)高錳酸鹽指數(shù)準(zhǔn)確度的影響
- 實(shí)驗(yàn)用水對(duì)高錳酸鹽指數(shù)準(zhǔn)確度的影響[詳細(xì)]
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2014-10-31 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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一些實(shí)驗(yàn)參數(shù)對(duì)TPR 圖譜的影響
- 一些實(shí)驗(yàn)參數(shù)對(duì)TPR 圖譜的影響[詳細(xì)]
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2015-10-19 00:00
期刊論文
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粘壁現(xiàn)象對(duì)噴霧干燥實(shí)驗(yàn)的影響
- 噴霧干燥過(guò)程中,干燥的物料粘附在干燥塔內(nèi)壁上的現(xiàn)象,一般稱(chēng)為粘壁現(xiàn)象。粘壁現(xiàn)象是噴霧干燥實(shí)驗(yàn)中必須考慮的一個(gè)重要問(wèn)題。?[詳細(xì)]
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2022-11-09 10:42
其它
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移液器吸頭質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響
- 雖然有許多刊物寫(xiě)到有關(guān)正確處理方式和良好的移液操作對(duì)結(jié)果質(zhì)量的影響,但吸頭的影響通常較少受到關(guān)注。 本文將介紹該主題,并提供如何選擇良好移液器吸頭,即不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的吸頭的詳細(xì)建議。
當(dāng)你被精密的實(shí)驗(yàn)儀器包圍,移液器看起來(lái)是如此簡(jiǎn)單。 事實(shí)上,在眾多實(shí)驗(yàn)儀器中找到合適的移液器往往是工作中Z困難的部分! 然后,你只需把一個(gè)吸頭裝在移液器底部,并進(jìn)行實(shí)驗(yàn),對(duì)嗎? 而且,Z棒的是,所有你所關(guān)注的都可以供實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)所用。[詳細(xì)]
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2019-03-26 16:47
應(yīng)用文章
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影響ELISA實(shí)驗(yàn)的因素和對(duì)策
- 影響ELISA實(shí)驗(yàn)的因素和對(duì)策[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:28
期刊論文
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48T人組織多肽抗原ELISA 檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)
- 人組織多肽抗原ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿上海信然生物技術(shù)有限公司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)elisa試劑,金標(biāo)試劑,放免試劑盒,科研抗體,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對(duì)試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問(wèn)題,我們無(wú)條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請(qǐng)來(lái)電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機(jī):18939846276,13482524164試驗(yàn)原理: TPA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知TPA濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將TPA和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TPA的濃度呈比例關(guān)系。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人組織多肽抗原ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人組織多肽抗原ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人組織多肽抗原ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的TPA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的TPA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlJNK1/3(c-Junamino-terminalkinase1/3)c-Jun氨基末端激酶1/3抗體0.2mlJab1(c-Junactivationdomain-bindingprotein1)Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185)抗磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體0.2mlJNK1/2/3抗氨基末端激酶1/2/3抗體0.2mlKCNA5(Potassiumvoltage-gatedchannelsubfamilyAmember5)鉀電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體0.2mlKi-67Ki-67Antigen抗體0.2mlKi-67(AntigenidentifiedbymonoclonalantibodyKi67)Ki67抗體0.1mlKif14protein驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體0.2mlKiss-1(Metastasis-suppressorKiSS-1precursor)腫瘤轉(zhuǎn)移YZ基因抗體0.2mlKlf4(Kruppellikefactor4)腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體0.2mlphospho-Klf5/CKLF/Kruppellikefactor5(pSer272)磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體0.2mlKLF6(Kruppel-likefactor6)轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體0.2mlKLF13/RFLAT-1(Kruppellikefactor13)腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子130.2mlKLK1(Kallikrein1)激肽釋放酶1抗體0.2mlκOR(kappaOpioidreceptor)kappa型受體抗體0.2mlKLK3(Kallikrein3)激肽釋放酶3/舒血管素3抗體0.2mlRabbitIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照)0.1mlMouseIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標(biāo)記小鼠IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照)0.1mlGoatIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照)0.1mlKLK4(Kallikrein4)激肽釋放酶4抗體0.2ml[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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阿莫西林分析-鹽純度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響例
- 阿莫西林分析-鹽純度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響例[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:08
應(yīng)用文章
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藥物對(duì)動(dòng)物學(xué)習(xí)和記憶的影響---大鼠穿梭實(shí)驗(yàn)
- 藥物對(duì)動(dòng)物學(xué)習(xí)和記憶的影響---大鼠穿梭實(shí)驗(yàn)[詳細(xì)]
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2024-09-16 02:50
其它
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粘壁現(xiàn)象對(duì)噴霧干燥技術(shù)實(shí)驗(yàn)的影響
- 噴霧干燥過(guò)程中,干燥的物料粘附在干燥塔內(nèi)壁上的現(xiàn)象,一般稱(chēng)為粘壁現(xiàn)象。粘壁現(xiàn)象是噴霧干燥實(shí)驗(yàn)中必須考慮的一個(gè)重要問(wèn)題。 [詳細(xì)]
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2024-09-29 21:32
其它
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大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
- 大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
[詳細(xì)]
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2024-09-12 17:03
應(yīng)用文章
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ELISA抗原競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)sIL-2R含量的操作流程
- ELISA抗原競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)sIL-2R含量的操作流程[詳細(xì)]
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2024-09-29 05:31
選購(gòu)指南
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ELISA試劑盒的基礎(chǔ)抗原和抗體
- ELISA試劑盒的基礎(chǔ)抗原和抗體假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。ELISA試劑盒但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注意亞型問(wèn)題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個(gè)亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問(wèn)題。因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí),反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時(shí),ELISA試劑盒應(yīng)注意可測(cè)范圍的Z高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類(lèi)試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。ELISA試劑盒的原理ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。人維生素A(VA)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝英文名稱(chēng):HumanVitaminA,VAELISAKit規(guī)格:96T/48T人鈣聯(lián)蛋白(CNX)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)英文名稱(chēng):Humancalnexin,CNXELISAKit規(guī)格:96T/48T人繆勒管YZ物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒特價(jià)供應(yīng)英文名稱(chēng):HumanMullerianInhibitingSubstance/Anti-Mullerianhormone,MIS/AMHELISAKit規(guī)格:96T/48T人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝英文名稱(chēng):HumanFetuinA,F(xiàn)ETU-AELISAKit規(guī)格:96T/48T人胎盤(pán)蛋白(PP)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝英文名稱(chēng):Humanplacentalprotein,PPELISAKit規(guī)格:96T/48T人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(anti-RVIgG)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)英文名稱(chēng):Humananti-rubellavirusIgGantibody,anti-RVIgGELISAKit規(guī)格:96T/48T人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒特價(jià)供應(yīng)英文名稱(chēng):Humananti-Epstein-Barrvirusantibody,EBVELISAKit規(guī)格:96T/48T人孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝英文名稱(chēng):Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit規(guī)格:96T/48T人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝英文名稱(chēng):Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit規(guī)格:96T/48T人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(anti-RVIgM)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)英文名稱(chēng):Humananti-rubellavirusIgMantibody,anti-RVIgMELISAKit規(guī)格:96T/48T人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒特價(jià)供應(yīng)英文名稱(chēng):Humanoxytocin,OTELISAKit規(guī)格:96T/48T人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝英文名稱(chēng):HumanEndometriumAntibody,EMAbELISAKit規(guī)格:96T/48T人抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝英文名稱(chēng):Humananti-spermantibody,AsAbELISAKit規(guī)格:96T/48T人皰疹抗體(HG)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)英文名稱(chēng):HumanHerpesGestation,HGELISAKit規(guī)格:96T/48T人胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA試劑盒特價(jià)供應(yīng)英文名稱(chēng):Humanplacentagrowthfactor,PLGFELISAKit規(guī)格:96T/48T人凝血酶(TM)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝英文名稱(chēng):HumanThrombin,TMELISAKit規(guī)格:96T/48T人凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝英文名稱(chēng):HumancoagulationfactorⅦ,F(xiàn)ⅦELISAKit規(guī)格:96T/48T人凝血酶原(PT)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)英文名稱(chēng):HumanProthrombin,PTELISAKit規(guī)格:96T/48T人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒特價(jià)供應(yīng)英文名稱(chēng):HumanC4bindingprotein,C4BPELISAKit規(guī)格:96T/48T人補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝英文名稱(chēng):HumanComplementfragment3c,C3cELISAKit規(guī)格:96T/48T人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝英文名稱(chēng):HumanComplement7,C7ELISAKit規(guī)格:96T/48T人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)英文名稱(chēng):Humanamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISAKit96T規(guī)格:96T/48T人chemerinELISA試劑盒特價(jià)供應(yīng)英文名稱(chēng):HumanchemerinELISAKit規(guī)格:96T/48T[詳細(xì)]
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2018-09-28 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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犬狂犬病毒抗原(RV-Ag)的實(shí)驗(yàn)原理以及試劑盒的組成
- 犬狂犬病毒抗原(RV-Ag)的實(shí)驗(yàn)原理以及試劑盒的組成[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
期刊論文
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