本文由 東莞市譜標(biāo)實(shí)驗(yàn)器材科技有限公司 整理匯編

2024-09-23 23:59 273閱讀次數(shù)

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更多資料

• 蛋白酶活性的測定方法

  蛋白酶活性的測定方法[詳細(xì)]

  2024-09-23 23:59

  其它

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• 衣原體蛋白酶樣活性因子使用說明書

  人衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF）的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF）水平。用純化的人衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF），再與HRP標(biāo)記的衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人衣原體蛋白酶樣活性因子（CPAF）含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：450pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為300pmol/L，200pmol/L，100pmol/L，50pmol/L，25pmol/L）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：10pmol/L-400pmol/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-10-23 10:31

  產(chǎn)品樣冊

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• 細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測

  主要用途細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放黃色對硝基苯胺，產(chǎn)生吸光峰值的變化，即采用比色法來測定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體、昆蟲等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiringAspartateprotease；CASPASE），或稱半胱天冬蛋白酶，是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的一類蛋白酶家屬。半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家屬中CED-3（CellDeathGeneNumber3；秀麗隱桿線蟲細(xì)胞死亡基因數(shù)3）分支的一種，又稱CPP32（CysteineProteinaseProtein32kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度傳說中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前體為32kd，被切離為17kd和11kd而激活細(xì)胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶YZ劑（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性檢測用來評價(jià)細(xì)胞或組織的凋亡狀況?；谌斯ず铣傻乃碾幕衔锏孜顰c-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰頡氨酰天冬氨酰對硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放有色對硝基苯胺，在分光光度儀（405nm波長）下，測定吸光峰值的變化，來定量測定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 抗酸劑的活性測定

  抗酸劑的活性測定[詳細(xì)]

  2004-02-17 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒說明書

  細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化，即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶（protease）又稱為肽酶（peptidase）或蛋白質(zhì)酶（proteinase），是一類蛋白水解的酶，屬于水解酶（hydrolase）家屬中一員，存在于所有生物體內(nèi)。通過肽鍵的水解，進(jìn)行蛋白質(zhì)的分解代謝，參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補(bǔ)體系統(tǒng)、凋亡、細(xì)胞生長和分化等一系列生理活動(dòng)。蛋白酶基本分成6類，包括絲氨酸（serine）、蘇氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金屬（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等；還可以分成內(nèi)切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。細(xì)菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān)；作為外毒素（exotoxin），也是細(xì)菌致病的毒力（virulence）因子；同時(shí)細(xì)菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等?；诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein），在細(xì)菌蛋白酶的催化水解下，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物，通過其吸收峰值的變化（440nm波長），來定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容裂解液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升終止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升陰性液（ReagentE）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測細(xì)菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107細(xì)胞/毫升）轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品（例如細(xì)菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長440nm，并置零實(shí)驗(yàn)開始前，將反應(yīng)液（ReagentB）置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液（ReagentE）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測，此為背景空對照樣品活性測定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入100微升待測樣品（蛋白總量100微克）（注意：樣品需澄清）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：沉淀物為橘紅色）加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測，此為樣品讀數(shù)計(jì)算樣品活性注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全系統(tǒng)檢測時(shí)，背景測定只需一次樣品須澄清，至關(guān)重要比色測定后，比色皿須清洗徹底建議待測樣本的蛋白濃度為100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義：在37℃下，pH7.5的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細(xì)菌生理生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)檢測試劑盒

  人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-23 19:48

  安裝說明

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• 苯胺-4-羥化酶活性的測定

  苯胺-4-羥化酶活性的測定[詳細(xì)]

  2015-06-09 00:00

  安裝說明

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• 膠質(zhì)酯酶活性的測定

  膠質(zhì)酯酶活性的測定[詳細(xì)]

  2024-09-20 22:44

  產(chǎn)品樣冊

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• 組織鈣蛋白酶（CALPAIN）活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  組織鈣蛋白酶（CALPAIN）活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-01-26 00:00

  選購指南

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• 使用自動(dòng)生石灰活性測定儀的方法

  自動(dòng)生石灰活性測定儀型號(hào)：TD-572■產(chǎn)品介紹自動(dòng)生石灰活性測定儀的工作原理是生石灰與水發(fā)生消化反應(yīng)時(shí)，放出大量的熱量，導(dǎo)致石灰水溶液的溫度快速升高，通過極ng確計(jì)量溶液的溫度變化及溫度變化所需的時(shí)間來表征生石灰活性的大小，自動(dòng)生石灰活性測定儀完全符合現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)DL/T323-2010《干法煙氣脫硫用生石灰的活性測定方法》，并在原有手動(dòng)操作的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)了檢測工作的完全智能化，避免了人為誤差和錯(cuò)誤，大大提升了生石灰活性度的檢測準(zhǔn)確性和極ng確性，為生石灰質(zhì)量的控制提供了強(qiáng)有力的保障?！霎a(chǎn)品特點(diǎn)1、實(shí)現(xiàn)了生石灰活性度檢驗(yàn)的完全數(shù)字化、智能化、高精度、GX率；2、采用7寸觸摸屏，自動(dòng)生成檢測曲線。3、實(shí)現(xiàn)了石灰活性度檢測數(shù)據(jù)的自動(dòng)采集、分析、計(jì)算、存儲(chǔ)；4、檢測結(jié)果隨時(shí)導(dǎo)出功能，便于數(shù)據(jù)備份；5、有效避免了人為操作引起的誤差或錯(cuò)誤?！鲞m用標(biāo)準(zhǔn)DL/T323-2010《干法煙氣脫硫用生石灰的活性測定方法》■技術(shù)參數(shù)攪拌器轉(zhuǎn)速：300±20r/min溫度采樣周期：1S-20S溫度測量范圍：0℃-150℃溫度測量分度值：0.1℃（PT100），0.5℃（熱電偶）工作電源：AC220V50HZ0.5KW外形尺寸：450X250X310mm重量：約15kg[詳細(xì)]

  2018-10-05 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 不同的胞外蛋白酶活性造成腫瘤特異的血清多肽組表達(dá)模式

  不同的胞外蛋白酶活性造成腫瘤特異的血清多肽組表達(dá)模式[詳細(xì)]

  2009-09-04 00:00

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• 洋蔥色素的提取及抗氧化活性的測定

  洋蔥色素的提取及抗氧化活性的測定[詳細(xì)]

  2024-09-20 00:07

  選購指南

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• 活性炭纖維的孔徑分布及比表面積測定

  活性炭纖維的孔徑分布及比表面積測定[詳細(xì)]

  2009-11-16 00:00

  課件

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• 大豆制品中胰蛋白酶YZ劑活性的測定

  大豆制品中胰蛋白酶YZ劑活性的測定GB5009.2242016[詳細(xì)]

  2018-08-23 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 酸性蛋白酶

  酸性蛋白酶[詳細(xì)]

  2014-09-29 00:00

  報(bào)價(jià)單

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• 菠蘿蛋白酶

  菠蘿蛋白酶[詳細(xì)]

  2014-09-29 00:00

  選購指南

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• 使用LCMS-8040 測定尿液中腺苷脫氨酶的活性

  使用LCMS-8040 測定尿液中腺苷脫氨酶的活性[詳細(xì)]

  2014-06-12 00:00

  操作手冊

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• 硫氧還蛋白氧化還原酶活性測定試劑盒說明書

  硫氧還蛋白氧化還原酶（thioredoxinreductase,TrxR）活性測定試劑盒說明書一、測定意義TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶，屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員，與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR具有多種生物學(xué)活性，調(diào)節(jié)機(jī)體氧化還原反應(yīng)和細(xì)胞生長與增殖，與人類某些疾病發(fā)病機(jī)制有關(guān)，可能是干預(yù)ZL的靶點(diǎn)。二、測定原理TrxR催化NADPH將DTNB還原為TNB，通過測定412nm波長處TNB的增加量，即可計(jì)算TrxR活性。三、實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、1ml比色皿、雙蒸水四、試劑組成和配置試劑一×1支，充分溶解于100ml雙蒸水，4℃保存6個(gè)月試劑二×1支，充分溶解于6ml雙蒸水，4℃避光保存3個(gè)月試劑三×2支，臨用前，每支充分溶解于3ml雙蒸水，4℃保存3個(gè)月五、樣品前處理稱約0.1g組織，加入1ml試劑一（生理鹽水），冰上充分研磨，10000rpm4℃離心10min，取上清（如上清不清澈，再離心3min）六、TrxR測定操作按下表操作測定管空白管試劑一0.7ml0.8ml試劑二0.1ml0.1ml樣0.1ml／試劑三0.1ml0.1ml加試劑三后，迅速混勻，于412nm處測定5min內(nèi)吸光值變化，第0s吸光值記為A1，第300s吸光值記為A2七、TrxR活力計(jì)算1、TrxR活力單位定義：在NADPH存在下，每毫克蛋白每分鐘催化1μmolDTNB還原的酶量為1U。2、計(jì)算公式：TrxR（U/mg）=（△A測定管-△A空白管）/2×（V總/V樣）÷Cpr=（△A測定管-△A空白管）×5÷Cpr△A=A2-A1V總：反應(yīng)總體積（ml）V樣：所用樣品體積（ml）Cpr：蛋白濃度（mg/ml）注意事項(xiàng)1、樣品處理等過程須在冰上進(jìn)行，且須在樣品處理當(dāng)天測定該酶活，勻漿液避免反復(fù)凍融2、測定時(shí)，試劑二和試劑三均需放在冰上3、試劑三須現(xiàn)配現(xiàn)用4、測定前須先取1～2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，使得吸光值在5min內(nèi)程線性變化，哺乳動(dòng)物組織及血液制品TrxR活力測定時(shí)，一般須用試劑一（生理鹽水）稀釋5倍左右5、測定過程操作須迅速優(yōu)質(zhì)試劑質(zhì)量放心價(jià)格Zdi為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)訂購熱線021-54100800[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 測定COD的方法

  測定COD的方法[詳細(xì)]

  2024-09-29 14:51

  操作手冊

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• 鈣鎂離子的測定方法

  1．方法提要 鈣離子測定是在PH12~13時(shí)，以鈣-羧酸為指示劑，用EDTA與標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液測定水樣中鈣離子含量。滴定EDTA與溶液中游離的鈣離子反應(yīng)形成絡(luò)合物，溶液顏色變化由紫色變?yōu)榱了{(lán)色時(shí)即為終點(diǎn)。[詳細(xì)]

  2025-01-20 10:51

  應(yīng)用文章

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