資料庫
細胞活體染色的原理和技術(shù)
-
本文由 上海谷研實業(yè)有限公司 整理匯編
2018-11-26 10:00 2265閱讀次數(shù)
文檔僅可預覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
細胞活體染色的原理和技術(shù)實驗原理活體染色是指對生命有機體的細胞或者組織能著色,但又無毒害的一種染色方法。目的在于顯示生活細胞內(nèi)的某些天然結(jié)構(gòu),同時不會影響細胞的正常生命活動和引起細胞死亡?;铙w染色技術(shù)可以用來研究生活狀態(tài)下的細胞結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)變化。液泡是細胞內(nèi)濃縮產(chǎn)物的主要場所,具有重要的功能。中性紅(neutralred)是液泡的特殊染色劑,只將液泡染成紅色。對于活細胞,細胞質(zhì)和細胞核不會被染色。實驗儀器、材料和試劑1)儀器和用具:顯微鏡、鑷子、小燒杯、吸水紙、載玻片、蓋玻片2)材料:洋蔥鱗莖3)試劑①Ringer溶液:NaCl8.5g、CaCl20.12g、NaHCO30.20g、KCl0.14g、Na2HPO40.01g、葡萄糖2.0g,加蒸餾水至1000mL。②1%和1/3000中性紅溶液:稱取0.5g中性紅溶于50mLRinger溶液,稍加熱使之很快溶解,用濾紙過濾,裝入棕色瓶暗處保存,防止氧化沉淀失去染色能力。臨用前取1%中性紅溶液1mL,加入29mLRinger溶液混勻,裝入棕色瓶備用。③0.85%的生理鹽水。④聯(lián)苯胺溶液:在0.85%的鹽水中加入聯(lián)苯胺至飽和為止,臨用前加入20%H2O2,1滴/2mL。⑤鉬酸銨溶液:稱取0.1g鉬酸銨溶于100mL0.85%生理鹽水。實驗步驟1.植物細胞液泡的活體染色洋蔥內(nèi)表皮:撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮,放在加有一滴1/3000的中性紅染液的載波片上,染色10min,用吸水紙吸去中性紅染液,換上蒸餾水,蓋上蓋玻片,顯微鏡觀察,可見到被染成磚紅色的ZY大液泡。黃豆根尖:1)取一干凈載玻片,滴一滴1/3000中性紅染液;2)用刀片將初生的黃豆根尖(約1-2cm長)切一縱薄片,置染液中,染8分鐘;3)用吸管吸蒸餾水滴在染液周圍,使染液沖淡,吸去再換水使染液近無色;4)用蓋玻片蓋在樣品上,吸去多余水分;5)觀察:在高倍鏡下,先觀察分生區(qū)細胞,尋找染成紅色的圓形液泡,這是初生的幼小液泡;由分生區(qū)向伸長區(qū)觀察,在長方形細胞中尋找染色較淺,體積增大的液泡;在根毛區(qū)尋找體積更大的液泡,有的占據(jù)胞質(zhì)大部分,將細胞核擠至一側(cè)。
登錄或新用戶注冊
請用手機微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機電腦聯(lián)動
更多資料
-
細胞活體染色的原理和技術(shù)
- 細胞活體染色的原理和技術(shù)實驗原理活體染色是指對生命有機體的細胞或者組織能著色,但又無毒害的一種染色方法。目的在于顯示生活細胞內(nèi)的某些天然結(jié)構(gòu),同時不會影響細胞的正常生命活動和引起細胞死亡?;铙w染色技術(shù)可以用來研究生活狀態(tài)下的細胞結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)變化。液泡是細胞內(nèi)濃縮產(chǎn)物的主要場所,具有重要的功能。中性紅(neutralred)是液泡的特殊染色劑,只將液泡染成紅色。對于活細胞,細胞質(zhì)和細胞核不會被染色。實驗儀器、材料和試劑1)儀器和用具:顯微鏡、鑷子、小燒杯、吸水紙、載玻片、蓋玻片2)材料:洋蔥鱗莖3)試劑①Ringer溶液:NaCl8.5g、CaCl20.12g、NaHCO30.20g、KCl0.14g、Na2HPO40.01g、葡萄糖2.0g,加蒸餾水至1000mL。②1%和1/3000中性紅溶液:稱取0.5g中性紅溶于50mLRinger溶液,稍加熱使之很快溶解,用濾紙過濾,裝入棕色瓶暗處保存,防止氧化沉淀失去染色能力。臨用前取1%中性紅溶液1mL,加入29mLRinger溶液混勻,裝入棕色瓶備用。③0.85%的生理鹽水。④聯(lián)苯胺溶液:在0.85%的鹽水中加入聯(lián)苯胺至飽和為止,臨用前加入20%H2O2,1滴/2mL。⑤鉬酸銨溶液:稱取0.1g鉬酸銨溶于100mL0.85%生理鹽水。實驗步驟1.植物細胞液泡的活體染色洋蔥內(nèi)表皮:撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮,放在加有一滴1/3000的中性紅染液的載波片上,染色10min,用吸水紙吸去中性紅染液,換上蒸餾水,蓋上蓋玻片,顯微鏡觀察,可見到被染成磚紅色的ZY大液泡。黃豆根尖:1)取一干凈載玻片,滴一滴1/3000中性紅染液;2)用刀片將初生的黃豆根尖(約1-2cm長)切一縱薄片,置染液中,染8分鐘;3)用吸管吸蒸餾水滴在染液周圍,使染液沖淡,吸去再換水使染液近無色;4)用蓋玻片蓋在樣品上,吸去多余水分;5)觀察:在高倍鏡下,先觀察分生區(qū)細胞,尋找染成紅色的圓形液泡,這是初生的幼小液泡;由分生區(qū)向伸長區(qū)觀察,在長方形細胞中尋找染色較淺,體積增大的液泡;在根毛區(qū)尋找體積更大的液泡,有的占據(jù)胞質(zhì)大部分,將細胞核擠至一側(cè)。[詳細]
-
2018-11-26 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
活體細胞溶酶體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒
- 主要用途活體細胞溶酶體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長波長的熒光染料特異性地聚集在溶酶體,并呈現(xiàn)紅色,用于分析和觀察溶酶體形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種溶酶體(動物、人體、昆蟲等)的形態(tài)觀察、活性探測和定位標記。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定,滯留持久。技術(shù)背景溶酶體(lysosome)是一種普遍存在于真核細胞中的細胞器,含有酸性水解酶,例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等,分解各種細胞殘渣和廢棄物質(zhì),包括過多的或破損的其它細胞器、食物顆粒、吞噬的細菌和病毒等。其大小為0.5至1.5微米,球圓形,溶酶體內(nèi)pH為5.0左右。溶酶體功能異常會引起溶酶體貯積癥(1ysosomalstoragedisorders;LSDs),例如家族性白癡?。═ay-sachsdisease)和龐貝氏癥(Pompe’sdisease)。溶酶體熒光探針LysoTrackerRED,是一種向酸性(acidotropic)探針,含有熒光基團在弱堿上,高度選擇性地染色酸性細胞器溶酶體。探針自由通過細胞膜,選擇性地聚集在溶酶體內(nèi)。它可以對活細胞進行直接染色,在590nm波長可以清晰看到被染成紅色的溶酶體。[詳細]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒
- 活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒[詳細]
-
2024-09-28 00:27
報價單
-
活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 主要用途活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長波長的熒光染料特異性地聚集在線粒體,并呈現(xiàn)紅色,用于分析和觀察線粒體活性與形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種線粒體(動物、人體、昆蟲等)的形態(tài)觀察、活性探測和定位標記。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定,滯留持久。技術(shù)背景線粒體是細胞中重要的細胞器,其主要功能是提供細胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體大量存在于代謝旺盛的細胞中,如動物的心肌,肝,腎等器官和組織的細胞中。大量制備線粒體就是從這些器官組織中提取,或從組織培養(yǎng)細胞中提取。在光學顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細線。線粒體熒光探針MitoTrackerRED,是一種含有硫醇(Thiol)氯甲基基團的熒光染料,自由通過細胞膜,選擇性地聚集在線粒體。它可以對活細胞進行直接染色,在580nm波長可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位,以檢測線粒體活性。[詳細]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
細胞染色方法總結(jié)
- 細胞染色方法總結(jié)[詳細]
-
2024-09-28 21:53
產(chǎn)品樣冊
-
活體生物光學成像技術(shù)的應用
- 作為一項新興的分子、基因表達的分析檢測技術(shù),在體生物光學成像已成功應用于生命科學、生物醫(yī)學、分子生物學和藥物研發(fā)等領域,取得了大量研究成果,主要包括: 在體監(jiān)測腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移、基因ZL中的基因表達、機體的生理病理改變過程以及進行藥物的篩選和評價等。[詳細]
-
2024-09-12 18:32
應用文章
-
活體生物光學成像技術(shù)的應用
- 活體生物光學成像技術(shù)的應用[詳細]
-
2024-09-14 17:07
應用文章
-
制冷技術(shù)和原理
- 制冷技術(shù)和原理[詳細]
-
2011-04-08 00:00
應用文章
-
制冰技術(shù)和原理
- 制冰技術(shù)和原理[詳細]
-
2018-11-13 15:46
產(chǎn)品樣冊
-
無需染色的細胞活力檢測介紹
- 無需染色的細胞活力檢測介紹[詳細]
-
2024-09-11 17:45
課件
-
分加活體細胞懸液
- 分加活體細胞懸液[詳細]
-
2024-09-12 18:50
實驗操作
-
產(chǎn)品應用(44)DAPI 染色的替代方案:成像和活細胞計數(shù)
- DAPI(4', 6-二脒基-2-苯基吲哚),是一種常用于多種成像實驗,如熒光顯微成像,染色體擴散,F(xiàn)ACS和一些細胞檢測中細胞核DNA的染色標記[1-4]。[詳細]
-
2021-02-24 15:42
應用文章
-
CellPress綜述:光學顯微技術(shù)和相干斷層掃描技術(shù)在活體癌癥研究中的應用
- 活體顯微成像(IVM)和光學相干斷層掃描(OCT)是兩種強大的光學成像工具,能夠在活體動物中,觀察亞細胞水平的動態(tài)活動。結(jié)合標記和無標記技術(shù)的,IVM和OCT在臨床前和臨床癌癥成像方面得到非常廣泛的應用,包括腫瘤的解剖學、生理學、腫瘤內(nèi)細胞遷移和腫瘤的分子學動力。這些應用對闡明癌癥生物機制、研究腫瘤的復雜生理、細胞和分子行為起到了極大幫助。同時IVM和OCT技術(shù)也在不斷發(fā)展進步以適用于更多領域。如非線性光學顯微鏡技術(shù)的發(fā)展使得能用無標簽的IVM對癌癥胞外基質(zhì)進行成像。新的光學設計和算法推動了無標簽的OCT技術(shù)的發(fā)展,使得OCT能夠能精確的檢測腫瘤邊緣和脈管系統(tǒng)。同時熒光標簽技術(shù)促使IVM可用于追蹤腫瘤干細胞、觀察腫瘤進展中腫瘤內(nèi)遺傳多樣性、追蹤治療過程中各種免疫細胞的遷移。OCT造影劑提高了OCT的靈敏度,使其能夠?qū)δ[瘤及其周圍的生理、分子表達、細胞行為進行成像。此外在雙模內(nèi)窺鏡中結(jié)合使用IVM和OCT,使得我們能夠?qū)σ恍┣粌?nèi)位置進行更有效更徹底的癌癥篩查,如胃腸道和膀胱,本文意在闡明每種成像技術(shù)的優(yōu)缺點,重點關注過去5年來IVM和OCT在活體癌癥成像領域的重要進展、關鍵技術(shù)的發(fā)展[詳細]
-
2022-05-10 10:54
應用文章
-
活細胞骨架染色--對比LifeAct-GFP和actin-GFP在活細胞骨
- 活細胞骨架染色--對比LifeAct-GFP和actin-GFP在活細胞骨[詳細]
-
2016-06-06 00:00
課件
-
普魯士蘭染色液原理方法(含鐵血黃素染色液)
- 原理方法:普魯士蘭法。臨床應用:適用于組織中含鐵血黃素沉著的鑒別染色。主要應用于顯示和證明組織內(nèi)局部的各種出血性病變。適用范圍:適宜組織石蠟切片染色。產(chǎn)品組成:A試劑(亞鐵氰化染料)2瓶;B試劑(促染劑)2瓶;C試劑(中性紅復染液)2瓶染色方法:1、切片脫蠟處理至蒸餾水充分洗;2、按順序,均勻滴入A液(亞鐵氰化染料)和B液(促染劑)各1~2滴,常溫下染色10~20分鐘;3、蒸餾水充分洗滌;4、滴入C液(1%中性紅復染液)復染2分鐘,蒸餾水洗;5、脫水、透明、封固、鏡檢。結(jié)果參考:含鐵血黃素脂肪呈蘭色,胞核呈紅色。有效期:十二個月。貯存:4℃保存。體會和說明:1、在全部染色操作中,應注意避免用生銹及其它可能造成鐵質(zhì)的普通水洗,而應用蒸餾水洗。2、染色至一定程度時,可鏡檢確定染色時間,如能用已知的陽性片作對照染色較為可靠。3、陳舊標本染色效果不好時,可用0.25%高錳酸鉀液處理切片30~40分鐘,水洗,再用1%草酸液漂白,可激活殘存的鐵離子,則有利于染色,但易出現(xiàn)假陽性,須注意鑒別。4、如含鐵量過多,染色時間應縮短。5、A試劑和B試劑瓶蓋切勿互用,以免試劑變質(zhì)。[詳細]
-
2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
中性紅染色液(活細胞專用)
- 中性紅染色液(活細胞專用)產(chǎn)品簡介:中性紅是一種弱堿性pH指示劑,變色范圍在pH6.4~8.0之間(由紅變黃)。分子式為C15H16N4HCl,分子量為288.78。在中性或微堿性環(huán)境中,植物的活細胞能大量吸收中性紅并向液泡中排泌。由于液泡在一般情況下呈酸性反應,因此,進入液泡的中性紅便解離出大量陽離子而呈現(xiàn)櫻桃紅色,在這種情況下,原生質(zhì)和細胞壁一般不著色。死細胞由于原生質(zhì)變性凝固,細胞液不能維持在液泡內(nèi),用中性紅染色后,不產(chǎn)生液泡著色現(xiàn)象,相反,中性紅的陽離子,卻與帶有一定負電荷的原生質(zhì)及細胞核結(jié)合,而使原生質(zhì)與細胞核染色。中性紅染色液(活細胞用)(NeutralRedstain)呈中性,是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成紅色的染色液,細胞核中的核酸以及溶酶體呈酸性,因此細胞核會被染成紅色。產(chǎn)品組成:編號HLDA0074Storage名稱NeutralRedstain(活細胞用)100ml4℃避光使用說明書1份操作步驟(僅供參考):1、樣品處理:去除細胞培養(yǎng)液,用PBS清洗或生理鹽水清洗1次。2、中性紅染色:棄PBS,加入適量的NeutralRedstain(活細胞用)完全覆蓋細胞,染色2~10min。3、用PBS清洗或生理鹽水清洗1次,立即觀察或拍照。注意事項:1、中性紅染色液長期存放會產(chǎn)生少量沉淀,一般不影響使用。2、S次使用本試劑時建議先取1~2個樣品做預實驗。3、中性紅染色液時,可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間。4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。有效期:12個月有效。[詳細]
-
2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
活體細胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑盒
- 主要用途活體細胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑是一種旨在通過特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來定性或定量測定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對細胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的??梢员挥糜诩毎蛲觥⑿盘杺鬟f、衰老、代謝和營養(yǎng)學等的研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂(Cardiolipin)是線粒體膜上的主要成分之一。它對細胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解,致使心磷脂顯著減少,Z終造成線粒體的嚴重損害。Nonyl-AcrydineOrange(NAO)是一種可自由通過細胞膜的染色劑,特異性地染色線粒體上的心磷脂,并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化,其熒光顯著減弱。[詳細]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
光催化技術(shù)的原理
- 作為一種半導體,光催化材料的能帶是不連續(xù)的,能量由高到低依次為導帶、禁帶、價帶。
半導體光催化材料一般具有較大的禁帶寬度,價帶由一系列填滿電子的軌道所構(gòu)成,導帶由一系列末填充電子的軌道所構(gòu)成。[詳細]
-
2021-12-22 10:09
其它
-
聯(lián)合的PSD-95活體皮層飛秒激光器快速再分配技術(shù)
- 聯(lián)合的PSD-95活體皮層飛秒激光器快速再分配技術(shù)[詳細]
-
2024-09-16 12:18
選購指南
-
HPLC自動進樣器的技術(shù)原理
- HPLC自動進樣器的技術(shù)原理[詳細]
-
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權(quán) , 頁面內(nèi)容不得以任何形式進行復制
參與評論
登錄后參與評論