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細胞與分化間的相互作用
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2024-10-03 20:16 777閱讀次數(shù)
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細胞與分化間的相互作用細胞間的相互作用是各式各樣的,可以是誘導(dǎo)作用,也可以是YZ作用。就作用方式來說,有的作用需要細胞的直接接觸,另一些所需要的可能是間隔一定距離的化學(xué)物質(zhì)的擴散。①誘導(dǎo)作用。兩棲類胚胎背部的外胚層細胞,在脊索中胚層的作用下,分化為神經(jīng)細胞,以后發(fā)育為神經(jīng)系統(tǒng)。這種中軸器官的誘導(dǎo)作用在脊椎動物具有普遍性,一般認為,脊索中胚層細胞釋放某種物質(zhì),誘導(dǎo)外胚層細胞分化為神經(jīng)組織。②YZ作用。如在蠑螈幼蟲或成體摘除水晶體后,可以從背部的虹彩再生出一個新的。進一步的分析指出,再生水晶體的能力局限在虹彩背部的邊緣層。如把這部分組織移到另一個摘除水晶體的眼睛,不是位于背部,而是使它位于腹部,仍舊可以由它再生出水晶體。細胞分化中基因表達的調(diào)節(jié)控制是一個十分復(fù)雜的過程,在蛋白質(zhì)合成的各個水平,從mRNA的轉(zhuǎn)錄、加工到翻譯,都會有調(diào)控的機制。在DNA水平也存在調(diào)控機制(如基因的丟失、放大、移位重組、修篩以及染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化等)。不同的細胞在其發(fā)育中的基因表達的調(diào)節(jié)控制不同;相同的細胞在其發(fā)育的各階段中,調(diào)節(jié)控制的機制不同。
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細胞與分化間的相互作用
- 細胞與分化間的相互作用細胞間的相互作用是各式各樣的,可以是誘導(dǎo)作用,也可以是YZ作用。就作用方式來說,有的作用需要細胞的直接接觸,另一些所需要的可能是間隔一定距離的化學(xué)物質(zhì)的擴散。①誘導(dǎo)作用。兩棲類胚胎背部的外胚層細胞,在脊索中胚層的作用下,分化為神經(jīng)細胞,以后發(fā)育為神經(jīng)系統(tǒng)。這種中軸器官的誘導(dǎo)作用在脊椎動物具有普遍性,一般認為,脊索中胚層細胞釋放某種物質(zhì),誘導(dǎo)外胚層細胞分化為神經(jīng)組織。②YZ作用。如在蠑螈幼蟲或成體摘除水晶體后,可以從背部的虹彩再生出一個新的。進一步的分析指出,再生水晶體的能力局限在虹彩背部的邊緣層。如把這部分組織移到另一個摘除水晶體的眼睛,不是位于背部,而是使它位于腹部,仍舊可以由它再生出水晶體。細胞分化中基因表達的調(diào)節(jié)控制是一個十分復(fù)雜的過程,在蛋白質(zhì)合成的各個水平,從mRNA的轉(zhuǎn)錄、加工到翻譯,都會有調(diào)控的機制。在DNA水平也存在調(diào)控機制(如基因的丟失、放大、移位重組、修篩以及染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化等)。不同的細胞在其發(fā)育中的基因表達的調(diào)節(jié)控制不同;相同的細胞在其發(fā)育的各階段中,調(diào)節(jié)控制的機制不同。[詳細]
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2024-10-03 20:16
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2024-10-08 03:07
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Insphero 3D懸滴板:研究腫瘤與間質(zhì)細胞的相互作用
- 文章標題:(文章請下載查看)DevelopmentofanInnovative3DCellCultureSystemtoStudyTumour-StromaInteractionsinNon-SmallCellLungCancerCells采用創(chuàng)新的三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng),研究非小細胞肺癌細胞與間質(zhì)細胞的相互作用介紹:使用新穎的三維(3D)共培養(yǎng)模型----InspheroAG研發(fā)的GravityPLUS3D懸滴培養(yǎng)系統(tǒng)(GravityPLUS3Dcellcultureplatform),研究非小細胞肺癌(NSCLC)細胞系和肺成纖維細胞的共培養(yǎng)。使用GravityPLUS3D懸滴培養(yǎng)系統(tǒng)可以研究腫瘤-間質(zhì)間的相互作用,是更接近于體內(nèi)的細胞培養(yǎng)模型。方法:使用多孔懸滴微量培養(yǎng)板(GravityPLUS3Dcellcultureplatform),研究單細胞的3D培養(yǎng)和多細胞的3D共培養(yǎng)。在懸滴培養(yǎng)板中,研究NSCLC細胞系之A549細胞的單獨培養(yǎng)、NSCLC細胞系之Colo699細胞的單獨培養(yǎng)、A549與肺成纖維細胞的共培養(yǎng)、和Colo699與肺成纖維細胞的共培養(yǎng)。腫瘤微球體形成并穩(wěn)定后(培養(yǎng)5天和10天后),使用AnnexinV/PropidiumIodide(膜聯(lián)蛋白V/碘化丙啶)對微球體染色并用流式觀測;腫瘤成纖維細胞微球體形成后用電鏡(SEM)、熒光顯微鏡、半薄切片和免疫組化(IHC)觀測;除了這些常規(guī)組織學(xué)檢測,還用免疫組化的方法檢測鈣粘素、波形蛋白、腫瘤增殖抗原Ki67、纖連蛋白、角蛋白7和平滑肌肌動蛋白(a-SMA)的表達量。結(jié)果:A549單細胞微球體與A549與成纖維細胞培養(yǎng)共培養(yǎng)的微球體相比,生存能力要差一些;而Colo699微球體的生存能力要比Colo699共培養(yǎng)的強。ki67的表達量在單細胞培養(yǎng)和共培養(yǎng)也存在很大的差異。波形蛋白表達量的增加和鈣粘素表達量的減少都能被監(jiān)測到,表明三維培養(yǎng)過程中存在間質(zhì)表型的轉(zhuǎn)變。除此之外,只有成纖維細胞系與A549細胞系共培養(yǎng)的時候,才有表達a-SMA,從而表明一種間質(zhì)狀態(tài)向另一種間質(zhì)狀態(tài)轉(zhuǎn)換。結(jié)論:證明GravityPLUS3D懸滴培養(yǎng)系統(tǒng)(GravityPLUS3Dcellcultureplatform)是研究腫瘤微球體共培養(yǎng)的很有利的工具。而且,這些微球體可以進一步探討腫瘤與間充質(zhì)間的相互作用,可以更好的反映出腫瘤細胞在體內(nèi)微環(huán)境的狀態(tài)。Insphero開發(fā)的GravityPLUS3D懸滴培養(yǎng)系統(tǒng)將會為研發(fā)劑及尋找生物標記物做出一些貢獻。Insphero3D懸滴培養(yǎng)板產(chǎn)品介紹:http://www.qbiotec.com/qxky001-Brand-24075/[詳細]
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2018-11-01 10:00
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細胞間粘附分子試劑檢測說明
- 細胞間粘附分子試劑檢測說明本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍::96T5ng/L-240ng/L使用目的::本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中細胞間粘附分子1(ICAM-1)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)水平。用純化的大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細胞間粘附分子1(ICAM-1),再與HRP標記的細胞間粘附分子1(ICAM-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞間粘附分子1(ICAM-1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(480ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。240ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液120ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液60ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液30ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液15ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)::計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2024-10-03 09:18
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- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠細胞間粘附分子(sICAM-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠sICAM-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的sICAM-1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠sICAM-1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,sICAM-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中sICAM-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):1.2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。標本測定前用標本稀釋液至少作1:100稀釋(取10ul,加標本稀釋液990ul,稀釋100倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.3ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液200ul。在**管中加入4000pg/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)sICAM-1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的sICAM-1檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠sICAM-1。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
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鼓風干燥箱箱體與工作室間的作用
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