本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2018-09-27 10:00 771閱讀次數(shù)

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• 酶聯(lián)免疫電泳轉(zhuǎn)移分析法

  該法是分析蛋白質(zhì)的一種新方法，由southernblot衍化而來，后者是由SouthernE.M.所創(chuàng)建，即將在瓊脂糖凝膠中電泳后的DNA，原位吸附于硝酸纖維素膜上，再用放射性同位素如32P等標(biāo)記的單鏈RNA或DNA探針，與板上的核酸分子雜交，從而達(dá)到分析DNA中基因位置和順序的目的。以后Alwine等采用另一種固相化的重氮芐氧甲基薄膜，以共價(jià)鍵方式和電泳后的RNA連接，從而固相化于薄膜上，再用分子探針雜交，分析RNA核酸的結(jié)構(gòu)，由于此法與southernblot相對(duì)，故稱之為northernblot。接著，Towbin等又將在聚丙烯酰胺凝膠上電泳后的蛋白質(zhì)按其原來的圖形，電泳轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，再用酶標(biāo)記的抗蛋白質(zhì)抗體分析蛋白質(zhì)電泳圖譜，現(xiàn)稱之為westernblot，即酶聯(lián)免疫電泳轉(zhuǎn)移分析法或免疫印跡法（immunoblotting，IB）。其基本程序是先將待測(cè)蛋白質(zhì)混合物標(biāo)本點(diǎn)在板狀聚丙烯酰胺凝膠板孔上走一維或二維電泳，使樣品中的單一成分分離出來，然后取硝酸纖維素膜與電泳后的凝膠相貼，在電場(chǎng)方向與板面垂直的條件下，進(jìn)行轉(zhuǎn)移電泳，此時(shí)，蛋白質(zhì)在電場(chǎng)力及印跡紙的自然吸附力的共同作用下，使各個(gè)單一成分進(jìn)入硝酸纖維素膜，并固相化。該膜即可用作蛋白質(zhì)活性分析或免疫反應(yīng)分析。硝酸纖維素膜上未吸附蛋白的活性，可用牛血清白蛋白或非離子型去垢劑滅活。然后與**抗體溫育、洗滌，再與酶標(biāo)第二抗體溫育、洗滌、酶底物顯色，進(jìn)行蛋白質(zhì)活性等分析。IB法的優(yōu)點(diǎn)是，不同的抗原成分在聚丙烯酰胺凝膠上電泳分離，然后轉(zhuǎn)移并固相化于硝酸纖維素膜上，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)時(shí)，不受其他條件的限制，加上酶標(biāo)抗體的放大作用，可以鑒定微量或低效價(jià)的抗體。這樣使SDS（十二烷基硫酸鈉）聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨率與ELISA的高敏感性相結(jié)合，可廣泛用于McAb等的篩選和鑒定等。另外，將新建立的兩項(xiàng)與ELISA有關(guān)的檢測(cè)法簡(jiǎn)介如下：①IgM抗體捕捉酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（IgMantibodycaptureELISA,MAC-ELISA），又稱反向間接ELISA，即利用抗μ鏈特異性抗體包被固相載體，吸附待檢血清中的IgM,再加入特異性抗原與“捕捉”到的相應(yīng)IgM抗體結(jié)合，然后加入酶標(biāo)記抗體及底物進(jìn)行測(cè)定的一種方法，該法的特異性及敏感性均較高，不受血清中IgG等的干擾，可用于各種感染性疾病的早期輔助診斷；②ELISPOT測(cè)定法，用已知抗細(xì)胞因子的抗體包被固相載體，加入待檢效應(yīng)細(xì)胞，溫育一定時(shí)間，洗去細(xì)胞，如細(xì)胞在溫育過程中有相應(yīng)細(xì)胞因子產(chǎn)生，加酶標(biāo)記抗體及底物溶液后則顯色，該法用于效應(yīng)細(xì)胞分泌的單一細(xì)胞因子的測(cè)定。若用已知抗原包被固相載體，也可測(cè)定分泌特異抗體的B細(xì)胞頻數(shù)。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 安培酶聯(lián)免疫分析法

  安培酶聯(lián)免疫分析法安培法是酶聯(lián)免疫分析中另一種常用的電化學(xué)分析技術(shù)。它是將工作電極的電為控制在被測(cè)定物質(zhì)能發(fā)生氧化/還原反應(yīng)的某個(gè)確定電位上，當(dāng)樣品中含有該物質(zhì)時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生可以檢測(cè)的電流，通過電流的大小就可以對(duì)該物質(zhì)的濃度進(jìn)行測(cè)定。由于該方法常應(yīng)用在色譜和流動(dòng)體系的電化學(xué)檢測(cè)器上，所以又稱為控制電位安培檢測(cè)。當(dāng)色譜和流動(dòng)體系中分離流出的化合物經(jīng)過該檢測(cè)器時(shí)，可根據(jù)所產(chǎn)生的電流來判斷吧被測(cè)物質(zhì)流出的時(shí)間，根據(jù)電流峰的大小來判斷化合物的濃度。由于電化學(xué)檢測(cè)器的靈敏度高、死體積小，所以在色譜和流動(dòng)分析中應(yīng)用廣泛。只要具有電話性的物質(zhì)都可以進(jìn)行測(cè)定，如苯酚類、硫醇類、硝基化合物、亞胺類、醌類、吩噻嗪類有機(jī)物，可以根據(jù)所測(cè)定的化合物的電化學(xué)性質(zhì)選擇相應(yīng)的測(cè)定電位。安培法中Z簡(jiǎn)單、Z常用的模式是在恒定的電位下測(cè)定待測(cè)物質(zhì)的氧化還原電流，這種恒電位測(cè)量模式可以避免雙電層充電和表面瞬變效應(yīng)，因而信噪比高，可以達(dá)到很低的測(cè)定下限，還可以根據(jù)需要改變電位的各種參數(shù)，采用不同的電位脈沖檢測(cè)模式如示差脈沖安培法、反向脈沖安培法、三脈沖安培法，或是采用雙電極或多電極檢測(cè)模式，以達(dá)到檢測(cè)低濃度樣品的要求。[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 氣相色譜分析法

  氣相色譜分析法[詳細(xì)]

  2015-12-02 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 電化學(xué)分析法

  電化學(xué)分析法[詳細(xì)]

  2024-09-15 17:54

  期刊論文

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• 色譜分析法基本原理

  色譜分析法基本原理[詳細(xì)]

  2012-01-16 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 白酒氣相色譜分析法

  白酒氣相色譜分析法[詳細(xì)]

  2024-09-16 03:03

  專利

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• 氣相色譜分析法基本知識(shí)

  氣相色譜分析法基本知識(shí)[詳細(xì)]

  2024-09-16 02:25

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 礦井氣氣相色譜分析法

  礦井氣氣相色譜分析法[詳細(xì)]

  2008-08-07 00:00

  期刊論文

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• 食品鈉鉀分析法

  食品鈉鉀分析法[詳細(xì)]

  2024-09-20 22:59

  期刊論文

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• 茶多酚的色譜分析法

  茶多酚的色譜分析法[詳細(xì)]

  2024-09-25 06:56

  應(yīng)用文章

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• 高效液相色譜分析法再述

  GX液相色譜分析法再述[詳細(xì)]

  2007-08-16 00:00

  報(bào)價(jià)單

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• 油中脂肪酸色譜分析法

  油中脂肪酸色譜分析法[詳細(xì)]

  2013-08-15 00:00

  安裝說明

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• 原子發(fā)射光譜分析法的特點(diǎn)

  原子發(fā)射光譜分析法的特點(diǎn)[詳細(xì)]

  2011-07-05 00:00

  安裝說明

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• 人工煤氣組分氣相色譜分析法

  本標(biāo)準(zhǔn)適用于人工煤氣中氫、氧、氮、一氧化碳、二氧化碳、甲烷、乙烯、乙烷、丙烯、丙烷等主要組成的測(cè)定。方法原理用帶有熱導(dǎo)檢測(cè)器的氣相色譜儀，通過幾種柱的組合來分離樣氣的全部常量組分，并在記錄儀上記下各組分的峰面積。在同樣操作條件下，分析已知組分含量的標(biāo)準(zhǔn)氣，把測(cè)得的樣氣峰面積與標(biāo)準(zhǔn)氣峰面積相比較，通過校正因子的修正，計(jì)算各組分的百分含量。[詳細(xì)]

  2018-08-26 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 色譜分析法習(xí)題及答案

  色譜分析法習(xí)題及答案[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:12

  操作手冊(cè)

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• COD行標(biāo)快速分析法

  COD行標(biāo)快速分析法[詳細(xì)]

  2024-09-15 22:05

  專利

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• 液相色譜儀應(yīng)用文章-氨基酸的分析法

  液相色譜儀應(yīng)用文章-氨基酸的分析法[詳細(xì)]

  2009-02-24 00:00

  安裝說明

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• MA391_氨基酸分析法（歐洲藥典8.0）

  MA391_氨基酸分析法（歐洲藥典8.0）[詳細(xì)]

  2016-07-21 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 如何使用氣相色譜分析法進(jìn)行白酒分析

  如何使用氣相色譜分析法進(jìn)行白酒分析[詳細(xì)]

  2015-08-21 00:00

  期刊論文

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• 上轉(zhuǎn)換材料的熒光光譜分析法

  上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料 (Up- conversion phosphors material,UPM) 是一類在長(zhǎng)波長(zhǎng)激發(fā)下發(fā)射短波長(zhǎng)光的材料，其特點(diǎn)是所吸收的光子能量低于發(fā)射的光子能量。由于使用紅外光作為激發(fā)光源，此類材料在防偽標(biāo)記、激光探測(cè)和立體顯示上的用途已經(jīng)廣為人知。Z近幾年來，科學(xué)家們又發(fā)現(xiàn)上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料有不易發(fā)生光漂白和發(fā)光強(qiáng)度高等優(yōu)點(diǎn)，用在生物標(biāo)記中可以大大提高檢測(cè)靈敏度和線性范圍，因此上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料的熒光發(fā) 射光譜是表征其性能的一個(gè)重要指標(biāo)，具有非常重要意義。[詳細(xì)]

  2020-01-03 16:57

  應(yīng)用文章

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