白細(xì)胞分化抗原
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2018-09-28 10:00 1617閱讀次數(shù)
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白細(xì)胞分化抗原(leukocytedifferentiationantigen,LDA):是不同譜系的血細(xì)胞在正常分化、成熟的不同階段及活化過程中,出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)志,大多是跨膜蛋白或糖蛋白,含膜外區(qū)、跨膜區(qū)、胞漿區(qū)三個部分。白細(xì)胞分化抗原種類繁多，分布廣泛，除表達(dá)于白細(xì)胞之外,還廣泛分布于其他血細(xì)胞和非造血細(xì)胞如血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞等。根據(jù)人白細(xì)胞分化抗原胞膜外區(qū)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可分為：免疫球蛋白超家族(IgSF)、細(xì)胞因子受體家族、C型凝集素超家族、整合素家族、表皮生長因子家族、補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白結(jié)構(gòu)域、腫瘤壞死因子超家族和腫瘤壞死因子受體超家族等。在早期的研究中,各實(shí)驗室一般應(yīng)用自制的特異性抗體對白細(xì)胞分化抗原進(jìn)行分析和鑒定,因而對同一分化抗原的命名各不相同。后經(jīng)人類白細(xì)胞分化抗原國際協(xié)作組會議決定以分化群(clusterofdifferentiation,CD)代替以往的命名,即應(yīng)用以單克隆抗體鑒定為主的方法,將來自不同實(shí)驗室的單克隆抗體所識別的同一白細(xì)胞分化抗原稱之為CD。在許多場合,抗體及其識別的抗原都用同一個CD序號。人CD的序號已從CD1命名至CD247,大致可劃分為13個組。人CD分組(2000年)分組CDT細(xì)胞CD1-8、CD27、CD28、CD99、CD99R、CD152-154、CD160、CD226、CD245-247B細(xì)胞CD10、CD19-24、CD37-40、CD72-74、CD77、CD79a、CD79b、CD80-84CD86、CD138、CD139、CD179-180髓樣細(xì)胞CDw12、CD13-14、CDw17、CD33-35、CD64-65、CD66a-66f、CD68、CD87-89、CD91-92、CDw93、CD101、CD111-112、CD114-115、CD155、CD157、CD163、CD177NK細(xì)胞CD16、CD56-57、CD69、CD94、CD96、CD158a-b、CD159a、CD161、CD162R、CD244血小板CD9、CD36、CD41、CD42a-42d、CD51、CD61-62、CD63、CD107a-107b、CD110、CD151黏附分子CD11a-11c、CD15、CD18、CD29、CD31、CD44、CD44R、CD47、CD49a-49f、CD50、CD54、CD58、CD62E、CD62L、CD90、CD102-104、CD156b、CD164-172aCK/趨化性CKRCD25、CD116-w137、CD178、CD183-184、CD195、CDw197、CDw210-213CDw217內(nèi)皮細(xì)胞CD105-106、CD109、CD140a-147、CD201-209非譜系CD26、CD30、CD32、CD43、CD45、CD45RA、CD45RB、CD45RC、CD45ROCD46、CD47R、CD48、CD52-53、CD55、CD59、CD70-71、CD97-98、CD100CD108、CD148、CD150、CD200、CD220-225、CD227-232碳水化合物CD15、CD60a-c、CD75、CD75s、CD173-176樹突細(xì)胞CD85干細(xì)胞/祖細(xì)胞CD133、CD243紅細(xì)胞CD233-CD242白細(xì)胞分化抗原不僅參與識別抗原、捕捉抗原、促進(jìn)免疫細(xì)胞與抗原或免疫分子間的相互作用,還可介導(dǎo)免疫細(xì)胞間、免疫細(xì)胞與基質(zhì)間的黏附作用,在免疫應(yīng)答的識別、活化及效應(yīng)階段均發(fā)揮重要作用。1.主要的CD分子:與T細(xì)胞識別、粘附、活化有關(guān)的CD分子1)CD3分布于T細(xì)胞與部分胸腺細(xì)胞表面，CD3分子由γ、δ、ε、ζ、η五種肽鏈組成，與T細(xì)胞受體TCR組成TCRCD3復(fù)合體。CD3分子功能：A.穩(wěn)定TCR的結(jié)構(gòu)，B.傳遞T細(xì)胞活化信號，誘導(dǎo)T細(xì)胞活化的**信號。2)CD4為單鏈跨膜糖蛋白，屬IgSF成員，胞膜外區(qū)有4個Ig樣結(jié)構(gòu)域，**、第二個結(jié)構(gòu)域與MHCⅡ類分子非多態(tài)區(qū)結(jié)合，**個V樣結(jié)構(gòu)域是人類免疫缺陷病毒(HIV)受體，能與HIV的gp120結(jié)合。CD4是T細(xì)胞TCR-CD3識別抗原的輔助受體，參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。3)CD8由α、β鏈構(gòu)成的異二聚體，屬IgSF成員，α鏈的V樣區(qū)可與MHCⅠ類分子非多態(tài)區(qū)α結(jié)合，CD8+T細(xì)胞主要是CTL或Tc。CD8分子也是T細(xì)胞識別抗原的輔助受體，其α鏈膜外區(qū)能與MHC-Ⅰ類抗原非多態(tài)區(qū)的α3區(qū)結(jié)合，可增強(qiáng)TCR與相應(yīng)抗原肽-MHC分子復(fù)合物結(jié)合后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。4)CD2又稱淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(lymphocytefunctionassociatedantigen2,LFA-2)或綿羊紅細(xì)胞(SRBC)受體，為跨膜單鏈分子，表達(dá)于T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和NK細(xì)胞，其配體主要是CD58(LFA-3)。CD2與CD58結(jié)合可促進(jìn)T細(xì)胞對抗原的識別功能。5)CD58又稱LFA-3，分布較為廣泛，CD58與CD2結(jié)合可促進(jìn)T細(xì)胞的識別功能。6)CD28由二條相同多肽鏈組成的二聚體。幾乎所有的CD4+T細(xì)胞和50％的CD8+T細(xì)胞表達(dá)CD28。轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞活化的輔助信號，稱為協(xié)同刺激信號或第二信號。配體是B7家族分子，CD28和B7-是Z重要的協(xié)同刺激分子，提供T細(xì)胞活化所必需的協(xié)同刺激信號。7)CTLA-4又稱CD152，為同源二聚體表達(dá)于活化T細(xì)胞，配體亦為B7分子，CTLA-4與B7結(jié)合后介導(dǎo)YZ信號，使免疫應(yīng)答恢復(fù)到相對平衡狀態(tài)。8)CD4OL又稱CD154屬TNF超家族成員，是CD40的配體。表達(dá)于活化的CD4+T細(xì)胞表面，部分CD8+T細(xì)胞及γδT細(xì)胞，其與CD40結(jié)合是B細(xì)胞活化必需的信號。參與B細(xì)胞識別、粘附、活化有關(guān)的CD分子1)CD79α/CD79β分別又稱Igα/Igβ，屬IgSF,二者以二硫鍵連接成異源二聚體，與BCR組成BCR-Igα/Igβ復(fù)合體，起穩(wěn)定BCR結(jié)構(gòu)及介導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。表達(dá)B細(xì)胞表面，屬B細(xì)胞特征性表面標(biāo)志。與mIg相連,組成BCR-Igα/Igβ復(fù)合物。作用與CD3類似,具有信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。2)CD19屬IgSF成員,B細(xì)胞的重要標(biāo)記(不表達(dá)于漿細(xì)胞)。是CD19/CD21/CD81信號復(fù)合物中一個成分,由540個氨基酸殘基構(gòu)成單鏈跨膜分子,屬IgSF成員,分布于除漿細(xì)胞外的不同發(fā)育階段的B細(xì)胞表面，是鑒定B細(xì)胞的重要標(biāo)志之一。也可表達(dá)于濾泡樣樹突狀細(xì)胞(FDC)。3)CD21分子又稱補(bǔ)體受體2(CR2)或EB病毒受體,板表達(dá)于成熟B細(xì)胞,是B細(xì)胞重要標(biāo)記,亦表達(dá)于濾泡樹突狀細(xì)胞、咽部和宮頸的上皮細(xì)胞，當(dāng)CD21與iC3b及C3d相結(jié)合其信號與BCR信號聯(lián)合，增強(qiáng)了B細(xì)胞對抗原的應(yīng)答，此外尚參與免疫記憶。CD21也是EB病毒受體。4)CD81:分布于B細(xì)胞、T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞表面，也是丙型肝炎病毒受體。CD19與CD21、CD81復(fù)合物是B細(xì)胞活化的輔助受體，CD21通過補(bǔ)體C3b介導(dǎo)與BCR橋聯(lián),使CD19與BCR靠近,CD19促進(jìn)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。5)CD40屬腫瘤壞死因子超家族，表達(dá)于成熟B細(xì)胞、某些上皮細(xì)胞、淋巴樣并指細(xì)胞、濾泡樹突狀細(xì)胞及活化的單核細(xì)胞。是誘導(dǎo)B細(xì)胞再次應(yīng)答的必需條件。CD40的配體是CD154，表達(dá)在活化的CD4+T細(xì)胞、提供B細(xì)胞活化的協(xié)同刺激信號。免疫球蛋白FC段受體1)IgGFC受體(IgγR)①FcγRⅠ(CD64)為一跨膜糖蛋白，屬Ig超家族，是IgG高親和力受體。FcγRⅠ主要表達(dá)于單核-巨噬細(xì)胞表面，中性粒細(xì)胞也有低水平表達(dá)。FcγR可介導(dǎo)ADCC，清除免疫復(fù)合物，促進(jìn)吞噬細(xì)胞對顆粒性抗原的吞噬作用，以及促進(jìn)吞噬細(xì)胞釋放IL-1、IL-6等介質(zhì)。②FcγRⅡ(CD32):FcγRⅡ分為FcγRⅡ-A、FcγRⅡ-B，分子量為40kDa，為一跨膜糖蛋白，屬Ig超家族，是IgG低親和力受體。FcγRⅡ表達(dá)于除紅細(xì)胞外的所有其他血細(xì)胞。可介導(dǎo)ADCC及調(diào)理吞噬，其中FcγRⅡ-B可介導(dǎo)免疫YZ作用。③FcγRⅢ(CD16)為一跨膜糖蛋白,屬Ig超家族。因跨膜區(qū)的不同,人FcγRⅢ分為兩種形式:一種是與磷脂酰肌醇(PI)相連的分子(FcγRⅢ-A);另一種是跨膜受體(FcγRⅢ-B)。FcγRⅢ分布于中性粒細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及激活的T細(xì)胞表面,主要介導(dǎo)上述細(xì)胞的ADCC作用。2)IgAFc受體(IgαR):FcαR(CD89)為一跨膜糖蛋白,屬Ig超家族,是中等親和力受體。主要表達(dá)在單核-巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等細(xì)胞表面。能與IgA結(jié)合，介導(dǎo)吞噬細(xì)胞的吞噬作用、超氧產(chǎn)生、釋放炎癥介質(zhì)以及發(fā)揮ADCC。3)IgEFc受體(IgεR):①FcεRⅠ該受體表達(dá)于肥大細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞表面,可與IgE單體高親和力結(jié)合，參與介導(dǎo)這兩種細(xì)胞釋放介質(zhì)及脫顆粒。②FcεRⅡ(CD23)是IgE低親和力受體,同時,也是B細(xì)胞生長因子受體，分布于B細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等細(xì)胞的表面，具有調(diào)節(jié)和效應(yīng)作用。
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白細(xì)胞分化抗原- 白細(xì)胞分化抗原(leukocytedifferentiationantigen,LDA):是不同譜系的血細(xì)胞在正常分化、成熟的不同階段及活化過程中,出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)志,大多是跨膜蛋白或糖蛋白,含膜外區(qū)、跨膜區(qū)、胞漿區(qū)三個部分。白細(xì)胞分化抗原種類繁多，分布廣泛，除表達(dá)于白細(xì)胞之外,還廣泛分布于其他血細(xì)胞和非造血細(xì)胞如血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞等。根據(jù)人白細(xì)胞分化抗原胞膜外區(qū)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可分為：免疫球蛋白超家族(IgSF)、細(xì)胞因子受體家族、C型凝集素超家族、整合素家族、表皮生長因子家族、補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白結(jié)構(gòu)域、腫瘤壞死因子超家族和腫瘤壞死因子受體超家族等。在早期的研究中,各實(shí)驗室一般應(yīng)用自制的特異性抗體對白細(xì)胞分化抗原進(jìn)行分析和鑒定,因而對同一分化抗原的命名各不相同。后經(jīng)人類白細(xì)胞分化抗原國際協(xié)作組會議決定以分化群(clusterofdifferentiation,CD)代替以往的命名,即應(yīng)用以單克隆抗體鑒定為主的方法,將來自不同實(shí)驗室的單克隆抗體所識別的同一白細(xì)胞分化抗原稱之為CD。在許多場合,抗體及其識別的抗原都用同一個CD序號。人CD的序號已從CD1命名至CD247,大致可劃分為13個組。人CD分組(2000年)分組CDT細(xì)胞CD1-8、CD27、CD28、CD99、CD99R、CD152-154、CD160、CD226、CD245-247B細(xì)胞CD10、CD19-24、CD37-40、CD72-74、CD77、CD79a、CD79b、CD80-84CD86、CD138、CD139、CD179-180髓樣細(xì)胞CDw12、CD13-14、CDw17、CD33-35、CD64-65、CD66a-66f、CD68、CD87-89、CD91-92、CDw93、CD101、CD111-112、CD114-115、CD155、CD157、CD163、CD177NK細(xì)胞CD16、CD56-57、CD69、CD94、CD96、CD158a-b、CD159a、CD161、CD162R、CD244血小板CD9、CD36、CD41、CD42a-42d、CD51、CD61-62、CD63、CD107a-107b、CD110、CD151黏附分子CD11a-11c、CD15、CD18、CD29、CD31、CD44、CD44R、CD47、CD49a-49f、CD50、CD54、CD58、CD62E、CD62L、CD90、CD102-104、CD156b、CD164-172aCK/趨化性CKRCD25、CD116-w137、CD178、CD183-184、CD195、CDw197、CDw210-213CDw217內(nèi)皮細(xì)胞CD105-106、CD109、CD140a-147、CD201-209非譜系CD26、CD30、CD32、CD43、CD45、CD45RA、CD45RB、CD45RC、CD45ROCD46、CD47R、CD48、CD52-53、CD55、CD59、CD70-71、CD97-98、CD100CD108、CD148、CD150、CD200、CD220-225、CD227-232碳水化合物CD15、CD60a-c、CD75、CD75s、CD173-176樹突細(xì)胞CD85干細(xì)胞/祖細(xì)胞CD133、CD243紅細(xì)胞CD233-CD242白細(xì)胞分化抗原不僅參與識別抗原、捕捉抗原、促進(jìn)免疫細(xì)胞與抗原或免疫分子間的相互作用,還可介導(dǎo)免疫細(xì)胞間、免疫細(xì)胞與基質(zhì)間的黏附作用,在免疫應(yīng)答的識別、活化及效應(yīng)階段均發(fā)揮重要作用。1.主要的CD分子:與T細(xì)胞識別、粘附、活化有關(guān)的CD分子1)CD3分布于T細(xì)胞與部分胸腺細(xì)胞表面，CD3分子由γ、δ、ε、ζ、η五種肽鏈組成，與T細(xì)胞受體TCR組成TCRCD3復(fù)合體。CD3分子功能：A.穩(wěn)定TCR的結(jié)構(gòu)，B.傳遞T細(xì)胞活化信號，誘導(dǎo)T細(xì)胞活化的**信號。2)CD4為單鏈跨膜糖蛋白，屬IgSF成員，胞膜外區(qū)有4個Ig樣結(jié)構(gòu)域，**、第二個結(jié)構(gòu)域與MHCⅡ類分子非多態(tài)區(qū)結(jié)合，**個V樣結(jié)構(gòu)域是人類免疫缺陷病毒(HIV)受體，能與HIV的gp120結(jié)合。CD4是T細(xì)胞TCR-CD3識別抗原的輔助受體，參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。3)CD8由α、β鏈構(gòu)成的異二聚體，屬IgSF成員，α鏈的V樣區(qū)可與MHCⅠ類分子非多態(tài)區(qū)α結(jié)合，CD8+T細(xì)胞主要是CTL或Tc。CD8分子也是T細(xì)胞識別抗原的輔助受體，其α鏈膜外區(qū)能與MHC-Ⅰ類抗原非多態(tài)區(qū)的α3區(qū)結(jié)合，可增強(qiáng)TCR與相應(yīng)抗原肽-MHC分子復(fù)合物結(jié)合后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。4)CD2又稱淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(lymphocytefunctionassociatedantigen2,LFA-2)或綿羊紅細(xì)胞(SRBC)受體，為跨膜單鏈分子，表達(dá)于T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和NK細(xì)胞，其配體主要是CD58(LFA-3)。CD2與CD58結(jié)合可促進(jìn)T細(xì)胞對抗原的識別功能。5)CD58又稱LFA-3，分布較為廣泛，CD58與CD2結(jié)合可促進(jìn)T細(xì)胞的識別功能。6)CD28由二條相同多肽鏈組成的二聚體。幾乎所有的CD4+T細(xì)胞和50％的CD8+T細(xì)胞表達(dá)CD28。轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞活化的輔助信號，稱為協(xié)同刺激信號或第二信號。配體是B7家族分子，CD28和B7-是Z重要的協(xié)同刺激分子，提供T細(xì)胞活化所必需的協(xié)同刺激信號。7)CTLA-4又稱CD152，為同源二聚體表達(dá)于活化T細(xì)胞，配體亦為B7分子，CTLA-4與B7結(jié)合后介導(dǎo)YZ信號，使免疫應(yīng)答恢復(fù)到相對平衡狀態(tài)。8)CD4OL又稱CD154屬TNF超家族成員，是CD40的配體。表達(dá)于活化的CD4+T細(xì)胞表面，部分CD8+T細(xì)胞及γδT細(xì)胞，其與CD40結(jié)合是B細(xì)胞活化必需的信號。參與B細(xì)胞識別、粘附、活化有關(guān)的CD分子1)CD79α/CD79β分別又稱Igα/Igβ，屬IgSF,二者以二硫鍵連接成異源二聚體，與BCR組成BCR-Igα/Igβ復(fù)合體，起穩(wěn)定BCR結(jié)構(gòu)及介導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。表達(dá)B細(xì)胞表面，屬B細(xì)胞特征性表面標(biāo)志。與mIg相連,組成BCR-Igα/Igβ復(fù)合物。作用與CD3類似,具有信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。2)CD19屬IgSF成員,B細(xì)胞的重要標(biāo)記(不表達(dá)于漿細(xì)胞)。是CD19/CD21/CD81信號復(fù)合物中一個成分,由540個氨基酸殘基構(gòu)成單鏈跨膜分子,屬IgSF成員,分布于除漿細(xì)胞外的不同發(fā)育階段的B細(xì)胞表面，是鑒定B細(xì)胞的重要標(biāo)志之一。也可表達(dá)于濾泡樣樹突狀細(xì)胞(FDC)。3)CD21分子又稱補(bǔ)體受體2(CR2)或EB病毒受體,板表達(dá)于成熟B細(xì)胞,是B細(xì)胞重要標(biāo)記,亦表達(dá)于濾泡樹突狀細(xì)胞、咽部和宮頸的上皮細(xì)胞，當(dāng)CD21與iC3b及C3d相結(jié)合其信號與BCR信號聯(lián)合，增強(qiáng)了B細(xì)胞對抗原的應(yīng)答，此外尚參與免疫記憶。CD21也是EB病毒受體。4)CD81:分布于B細(xì)胞、T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞表面，也是丙型肝炎病毒受體。CD19與CD21、CD81復(fù)合物是B細(xì)胞活化的輔助受體，CD21通過補(bǔ)體C3b介導(dǎo)與BCR橋聯(lián),使CD19與BCR靠近,CD19促進(jìn)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。5)CD40屬腫瘤壞死因子超家族，表達(dá)于成熟B細(xì)胞、某些上皮細(xì)胞、淋巴樣并指細(xì)胞、濾泡樹突狀細(xì)胞及活化的單核細(xì)胞。是誘導(dǎo)B細(xì)胞再次應(yīng)答的必需條件。CD40的配體是CD154，表達(dá)在活化的CD4+T細(xì)胞、提供B細(xì)胞活化的協(xié)同刺激信號。免疫球蛋白FC段受體1)IgGFC受體(IgγR)①FcγRⅠ(CD64)為一跨膜糖蛋白，屬Ig超家族，是IgG高親和力受體。FcγRⅠ主要表達(dá)于單核-巨噬細(xì)胞表面，中性粒細(xì)胞也有低水平表達(dá)。FcγR可介導(dǎo)ADCC，清除免疫復(fù)合物，促進(jìn)吞噬細(xì)胞對顆粒性抗原的吞噬作用，以及促進(jìn)吞噬細(xì)胞釋放IL-1、IL-6等介質(zhì)。②FcγRⅡ(CD32):FcγRⅡ分為FcγRⅡ-A、FcγRⅡ-B，分子量為40kDa，為一跨膜糖蛋白，屬Ig超家族，是IgG低親和力受體。FcγRⅡ表達(dá)于除紅細(xì)胞外的所有其他血細(xì)胞?？山閷?dǎo)ADCC及調(diào)理吞噬，其中FcγRⅡ-B可介導(dǎo)免疫YZ作用。③FcγRⅢ(CD16)為一跨膜糖蛋白,屬Ig超家族。因跨膜區(qū)的不同,人FcγRⅢ分為兩種形式:一種是與磷脂酰肌醇(PI)相連的分子(FcγRⅢ-A);另一種是跨膜受體(FcγRⅢ-B)。FcγRⅢ分布于中性粒細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及激活的T細(xì)胞表面,主要介導(dǎo)上述細(xì)胞的ADCC作用。2)IgAFc受體(IgαR):FcαR(CD89)為一跨膜糖蛋白,屬Ig超家族,是中等親和力受體。主要表達(dá)在單核-巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等細(xì)胞表面。能與IgA結(jié)合，介導(dǎo)吞噬細(xì)胞的吞噬作用、超氧產(chǎn)生、釋放炎癥介質(zhì)以及發(fā)揮ADCC。3)IgEFc受體(IgεR):①FcεRⅠ該受體表達(dá)于肥大細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞表面,可與IgE單體高親和力結(jié)合，參與介導(dǎo)這兩種細(xì)胞釋放介質(zhì)及脫顆粒。②FcεRⅡ(CD23)是IgE低親和力受體,同時,也是B細(xì)胞生長因子受體，分布于B細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等細(xì)胞的表面，具有調(diào)節(jié)和效應(yīng)作用。[詳細(xì)]
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2018-09-28 10:00
產(chǎn)品樣冊
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- 大鼠白細(xì)胞分化抗原4（CD4）說明書
- www.biokanu.com大鼠白細(xì)胞分化抗原4（CD4）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞分化抗原4（CD4）含量。實(shí)驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白細(xì)胞分化抗原4（CD4）水平。用純化的大鼠白細(xì)胞分化抗原4（CD4）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞分化抗原4（CD4），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞分化抗原4（CD4）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞分化抗原4（CD4）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠白細(xì)胞分化抗原4（CD4）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：27ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為18ng/L，12ng/L，6ng/L，3ng/L，1.5ng/L）。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：0.7ng/L-20ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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- 人白細(xì)胞分化抗原40配體試劑盒使用方法
- 檢測范圍：48T30ng/L-2000ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞分化抗原40配體（CD40L）含量。實(shí)驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白細(xì)胞分化抗原40配體（CD40L）水平。用純化的人CD40L抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入CD40L，再與HRP標(biāo)記的CD40L抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CD40L呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人白細(xì)胞分化抗原40配體（CD40L）濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人（human）白細(xì)胞分化抗原137L ELISA試劑盒說明書- 人（human）白細(xì)胞分化抗原137LELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清一、試劑組成1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶標(biāo)偶合液EnzymeConjugate12.0ml3、標(biāo)準(zhǔn)品Standard 5x1.0ml4、呈色劑A、SubstrateA6.0ml5、呈色劑B、SubstrateB6.0ml6、終止液StopSolution6.0ml7、濃縮洗滌液（1：20）RinsingBuffer60.0ml8、5倍樣品稀釋液dilution15.0m二、注意事項此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。保存于2-8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘三、操作步驟每孔分別加入已稀釋的樣品、標(biāo)準(zhǔn)品各100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加入酶標(biāo)偶合液100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應(yīng)15分鐘。8．每孔加終止液50ul，于450nm波長讀O.D.值。四、結(jié)果判斷儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。檢測值范圍：0160ng/ml敏感度：1.0ng/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
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- 人白細(xì)胞分化抗原40配體（CD40L）試劑盒使用方法
- 檢測范圍：48T30ng/L-2000ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞分化抗原40配體（CD40L）含量。實(shí)驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白細(xì)胞分化抗原40配體（CD40L）水平。用純化的人CD40L抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入CD40L，再與HRP標(biāo)記的CD40L抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CD40L呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人白細(xì)胞分化抗原40配體（CD40L）濃度。試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標(biāo)試劑3ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（2000ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×4條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
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- 人白細(xì)胞分化抗原4 elisa kit 操作規(guī)范
- 人白細(xì)胞分化抗原4（CD4）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用本公司專業(yè)供應(yīng)Elisa試劑盒，品質(zhì)保證，價格優(yōu)惠，可免費(fèi)提供代測服務(wù)，歡迎來電咨詢：15900755943021-55640936目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞分化抗原4（CD4）含量。實(shí)驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白細(xì)胞分化抗原4（CD4）水平。用純化的人白細(xì)胞分化抗原4（CD4）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞分化抗原4（CD4），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞分化抗原4（CD4）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞分化抗原4（CD4）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人白細(xì)胞分化抗原4（CD4）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：27ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為18ng/L，12ng/L，6ng/L，3ng/L，1.5ng/L）。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：0.7ng/L-20ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]
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2018-10-12 10:00
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- 人可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）ELISA試劑盒
- 人可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中人可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）含量。實(shí)驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）水平。用純化的人可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28），再與HRP標(biāo)記的可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]
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2018-10-19 10:00
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- 大鼠白細(xì)胞分化抗原44（CD44）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1.6ng/L-70ng/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清樣本中白細(xì)胞分化抗原44(CD44)含量。實(shí)驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白細(xì)胞分化抗原44(CD44)水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞分化抗原44(CD44)，再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞分化抗原44(CD44)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠白細(xì)胞分化抗原44(CD44)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（120ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
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- 犬白細(xì)胞分化抗原8(CD8)elisa試劑盒使用說明書
- 犬白細(xì)胞分化抗原8(CD8)elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:26
應(yīng)用文章
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人白細(xì)胞分化抗原14(CDl4)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說明書- 人白細(xì)胞分化抗原14(CDl4)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說明書本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。本生試劑盒[詳細(xì)]
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2023-10-26 16:25
應(yīng)用文章
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- 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)elisa試劑盒使用說明書
- 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:26
其它
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- 白細(xì)胞稀釋液說明書
- 白細(xì)胞稀釋液說明書[詳細(xì)]
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2015-09-02 00:00
安裝說明
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- 急性白血病MDR1與分化抗原關(guān)系及其臨床意義
- 急性白血病MDR1與分化抗原關(guān)系及其臨床意義[詳細(xì)]
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2013-08-21 00:00
產(chǎn)品樣冊
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- 白細(xì)胞裂解液產(chǎn)品說明書
- 主要用途白細(xì)胞裂解液是一種旨在通過使用化學(xué)方法快速充分裂解純化白細(xì)胞，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，通過超速離心，收集所有細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗證明的。其適用于各種白細(xì)胞（動物、人體）等樣品。適用于后續(xù)蛋白鑒定、酶活檢測、免疫反應(yīng)等。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，裂解效果顯著。技術(shù)背景通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑可以防止裂解后細(xì)胞內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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- FH-R135-大鼠外周血白細(xì)胞說明書
- FH-R135-大鼠外周血白細(xì)胞說明書[詳細(xì)]
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2024-05-30 09:33
應(yīng)用文章
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- 白細(xì)胞裂解液產(chǎn)品說明書（中文版）
- 白細(xì)胞裂解液產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2024-09-12 22:18
報價單
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- 紅、白細(xì)胞的Zeta 電位檢測
- 紅、白細(xì)胞的Zeta 電位檢測[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:10
應(yīng)用文章
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- 紅、白細(xì)胞的Zeta電位檢測
- 紅、白細(xì)胞的Zeta電位檢測[詳細(xì)]
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2024-09-17 02:32
應(yīng)用文章
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- 分泌型人類白細(xì)胞抗原G（sHLA-G）
- 分泌型人類白細(xì)胞抗原G（sHLA-G）本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清一、試劑組成1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶標(biāo)偶合液EnzymeConjugate12.0ml3、標(biāo)準(zhǔn)品Standard 5x1.0ml4、呈色劑A、SubstrateA6.0ml5、呈色劑B、SubstrateB6.0ml6、終止液StopSolution6.0ml7、濃縮洗滌液（1：20）RinsingBuffer60.0ml8、5倍樣品稀釋液dilution15.0m二、注意事項1.此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。2.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。3.保存于2-8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。4.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘三、操作步驟1.每孔分別加入已稀釋的樣品、標(biāo)準(zhǔn)品各100ul。2.將板置于37℃溫育30分鐘。3.甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。4.每孔加入酶標(biāo)偶合液100ul。5.將板置于37℃溫育30分鐘。6.甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。7.每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應(yīng)15分鐘。8．每孔加終止液50ul，于450nm波長讀O.D.值。四、結(jié)果判斷儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。檢測值范圍：080ng/ml敏感度：0.5ng/ml[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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- 人白細(xì)胞抗原B27（HLA-B27）試劑盒使用方法
- 檢測范圍：96T0.75pmol/L-20pmol/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)含量。實(shí)驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)水平。用純化的人白細(xì)胞B27(HLA-B27)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)，再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞B27(HLA-B27)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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