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• 人白細胞分化抗原4 elisa kit 操作規(guī)范

  人白細胞分化抗原4（CD4）酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用本公司專業(yè)供應Elisa試劑盒，品質保證，價格優(yōu)惠，可免費提供代測服務，歡迎來電咨詢：15900755943021-55640936目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中白細胞分化抗原4（CD4）含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞分化抗原4（CD4）水平。用純化的人白細胞分化抗原4（CD4）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞分化抗原4（CD4），再與HRP標記的白細胞分化抗原4（CD4）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞分化抗原4（CD4）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人白細胞分化抗原4（CD4）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：27ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為18ng/L，12ng/L，6ng/L，3ng/L，1.5ng/L）。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：0.7ng/L-20ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-10-12 10:00

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• 大鼠白細胞分化抗原4（CD4）說明書

  www.biokanu.com大鼠白細胞分化抗原4（CD4）酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關液體樣本中白細胞分化抗原4（CD4）含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠白細胞分化抗原4（CD4）水平。用純化的大鼠白細胞分化抗原4（CD4）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞分化抗原4（CD4），再與HRP標記的白細胞分化抗原4（CD4）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞分化抗原4（CD4）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠白細胞分化抗原4（CD4）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：27ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為18ng/L，12ng/L，6ng/L，3ng/L，1.5ng/L）。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：0.7ng/L-20ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-22 10:00

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• 白細胞分化抗原

  白細胞分化抗原(leukocytedifferentiationantigen,LDA):是不同譜系的血細胞在正常分化、成熟的不同階段及活化過程中,出現或消失的細胞表面標志,大多是跨膜蛋白或糖蛋白,含膜外區(qū)、跨膜區(qū)、胞漿區(qū)三個部分。白細胞分化抗原種類繁多，分布廣泛，除表達于白細胞之外,還廣泛分布于其他血細胞和非造血細胞如血管內皮細胞、成纖維細胞、上皮細胞、神經內分泌細胞等。根據人白細胞分化抗原胞膜外區(qū)結構特點可分為：免疫球蛋白超家族(IgSF)、細胞因子受體家族、C型凝集素超家族、整合素家族、表皮生長因子家族、補體調節(jié)蛋白結構域、腫瘤壞死因子超家族和腫瘤壞死因子受體超家族等。在早期的研究中,各實驗室一般應用自制的特異性抗體對白細胞分化抗原進行分析和鑒定,因而對同一分化抗原的命名各不相同。后經人類白細胞分化抗原國際協(xié)作組會議決定以分化群(clusterofdifferentiation,CD)代替以往的命名,即應用以單克隆抗體鑒定為主的方法,將來自不同實驗室的單克隆抗體所識別的同一白細胞分化抗原稱之為CD。在許多場合,抗體及其識別的抗原都用同一個CD序號。人CD的序號已從CD1命名至CD247,大致可劃分為13個組。人CD分組(2000年)分組CDT細胞CD1-8、CD27、CD28、CD99、CD99R、CD152-154、CD160、CD226、CD245-247B細胞CD10、CD19-24、CD37-40、CD72-74、CD77、CD79a、CD79b、CD80-84CD86、CD138、CD139、CD179-180髓樣細胞CDw12、CD13-14、CDw17、CD33-35、CD64-65、CD66a-66f、CD68、CD87-89、CD91-92、CDw93、CD101、CD111-112、CD114-115、CD155、CD157、CD163、CD177NK細胞CD16、CD56-57、CD69、CD94、CD96、CD158a-b、CD159a、CD161、CD162R、CD244血小板CD9、CD36、CD41、CD42a-42d、CD51、CD61-62、CD63、CD107a-107b、CD110、CD151黏附分子CD11a-11c、CD15、CD18、CD29、CD31、CD44、CD44R、CD47、CD49a-49f、CD50、CD54、CD58、CD62E、CD62L、CD90、CD102-104、CD156b、CD164-172aCK/趨化性CKRCD25、CD116-w137、CD178、CD183-184、CD195、CDw197、CDw210-213CDw217內皮細胞CD105-106、CD109、CD140a-147、CD201-209非譜系CD26、CD30、CD32、CD43、CD45、CD45RA、CD45RB、CD45RC、CD45ROCD46、CD47R、CD48、CD52-53、CD55、CD59、CD70-71、CD97-98、CD100CD108、CD148、CD150、CD200、CD220-225、CD227-232碳水化合物CD15、CD60a-c、CD75、CD75s、CD173-176樹突細胞CD85干細胞/祖細胞CD133、CD243紅細胞CD233-CD242白細胞分化抗原不僅參與識別抗原、捕捉抗原、促進免疫細胞與抗原或免疫分子間的相互作用,還可介導免疫細胞間、免疫細胞與基質間的黏附作用,在免疫應答的識別、活化及效應階段均發(fā)揮重要作用。1.主要的CD分子:與T細胞識別、粘附、活化有關的CD分子1)CD3分布于T細胞與部分胸腺細胞表面，CD3分子由γ、δ、ε、ζ、η五種肽鏈組成，與T細胞受體TCR組成TCRCD3復合體。CD3分子功能：A.穩(wěn)定TCR的結構，B.傳遞T細胞活化信號，誘導T細胞活化的**信號。2)CD4為單鏈跨膜糖蛋白，屬IgSF成員，胞膜外區(qū)有4個Ig樣結構域，**、第二個結構域與MHCⅡ類分子非多態(tài)區(qū)結合，**個V樣結構域是人類免疫缺陷病毒(HIV)受體，能與HIV的gp120結合。CD4是T細胞TCR-CD3識別抗原的輔助受體，參與信號轉導。3)CD8由α、β鏈構成的異二聚體，屬IgSF成員，α鏈的V樣區(qū)可與MHCⅠ類分子非多態(tài)區(qū)α結合，CD8+T細胞主要是CTL或Tc。CD8分子也是T細胞識別抗原的輔助受體，其α鏈膜外區(qū)能與MHC-Ⅰ類抗原非多態(tài)區(qū)的α3區(qū)結合，可增強TCR與相應抗原肽-MHC分子復合物結合后的信號轉導。4)CD2又稱淋巴細胞功能相關抗原2(lymphocytefunctionassociatedantigen2,LFA-2)或綿羊紅細胞(SRBC)受體，為跨膜單鏈分子，表達于T細胞、胸腺細胞和NK細胞，其配體主要是CD58(LFA-3)。CD2與CD58結合可促進T細胞對抗原的識別功能。5)CD58又稱LFA-3，分布較為廣泛，CD58與CD2結合可促進T細胞的識別功能。6)CD28由二條相同多肽鏈組成的二聚體。幾乎所有的CD4+T細胞和50％的CD8+T細胞表達CD28。轉導T細胞活化的輔助信號，稱為協(xié)同刺激信號或第二信號。配體是B7家族分子，CD28和B7-是Z重要的協(xié)同刺激分子，提供T細胞活化所必需的協(xié)同刺激信號。7)CTLA-4又稱CD152，為同源二聚體表達于活化T細胞，配體亦為B7分子，CTLA-4與B7結合后介導YZ信號，使免疫應答恢復到相對平衡狀態(tài)。8)CD4OL又稱CD154屬TNF超家族成員，是CD40的配體。表達于活化的CD4+T細胞表面，部分CD8+T細胞及γδT細胞，其與CD40結合是B細胞活化必需的信號。參與B細胞識別、粘附、活化有關的CD分子1)CD79α/CD79β分別又稱Igα/Igβ，屬IgSF,二者以二硫鍵連接成異源二聚體，與BCR組成BCR-Igα/Igβ復合體，起穩(wěn)定BCR結構及介導信號轉導作用。表達B細胞表面，屬B細胞特征性表面標志。與mIg相連,組成BCR-Igα/Igβ復合物。作用與CD3類似,具有信號轉導功能。2)CD19屬IgSF成員,B細胞的重要標記(不表達于漿細胞)。是CD19/CD21/CD81信號復合物中一個成分,由540個氨基酸殘基構成單鏈跨膜分子,屬IgSF成員,分布于除漿細胞外的不同發(fā)育階段的B細胞表面，是鑒定B細胞的重要標志之一。也可表達于濾泡樣樹突狀細胞(FDC)。3)CD21分子又稱補體受體2(CR2)或EB病毒受體,板表達于成熟B細胞,是B細胞重要標記,亦表達于濾泡樹突狀細胞、咽部和宮頸的上皮細胞，當CD21與iC3b及C3d相結合其信號與BCR信號聯合，增強了B細胞對抗原的應答，此外尚參與免疫記憶。CD21也是EB病毒受體。4)CD81:分布于B細胞、T細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、NK細胞和嗜酸性粒細胞表面，也是丙型肝炎病毒受體。CD19與CD21、CD81復合物是B細胞活化的輔助受體，CD21通過補體C3b介導與BCR橋聯,使CD19與BCR靠近,CD19促進信號轉導。5)CD40屬腫瘤壞死因子超家族，表達于成熟B細胞、某些上皮細胞、淋巴樣并指細胞、濾泡樹突狀細胞及活化的單核細胞。是誘導B細胞再次應答的必需條件。CD40的配體是CD154，表達在活化的CD4+T細胞、提供B細胞活化的協(xié)同刺激信號。免疫球蛋白FC段受體1)IgGFC受體(IgγR)①FcγRⅠ(CD64)為一跨膜糖蛋白，屬Ig超家族，是IgG高親和力受體。FcγRⅠ主要表達于單核-巨噬細胞表面，中性粒細胞也有低水平表達。FcγR可介導ADCC，清除免疫復合物，促進吞噬細胞對顆粒性抗原的吞噬作用，以及促進吞噬細胞釋放IL-1、IL-6等介質。②FcγRⅡ(CD32):FcγRⅡ分為FcγRⅡ-A、FcγRⅡ-B，分子量為40kDa，為一跨膜糖蛋白，屬Ig超家族，是IgG低親和力受體。FcγRⅡ表達于除紅細胞外的所有其他血細胞?？山閷DCC及調理吞噬，其中FcγRⅡ-B可介導免疫YZ作用。③FcγRⅢ(CD16)為一跨膜糖蛋白,屬Ig超家族。因跨膜區(qū)的不同,人FcγRⅢ分為兩種形式:一種是與磷脂酰肌醇(PI)相連的分子(FcγRⅢ-A);另一種是跨膜受體(FcγRⅢ-B)。FcγRⅢ分布于中性粒細胞、NK細胞、巨噬細胞及激活的T細胞表面,主要介導上述細胞的ADCC作用。2)IgAFc受體(IgαR):FcαR(CD89)為一跨膜糖蛋白,屬Ig超家族,是中等親和力受體。主要表達在單核-巨噬細胞、中性粒細胞等細胞表面。能與IgA結合，介導吞噬細胞的吞噬作用、超氧產生、釋放炎癥介質以及發(fā)揮ADCC。3)IgEFc受體(IgεR):①FcεRⅠ該受體表達于肥大細胞及嗜堿性粒細胞表面,可與IgE單體高親和力結合，參與介導這兩種細胞釋放介質及脫顆粒。②FcεRⅡ(CD23)是IgE低親和力受體,同時,也是B細胞生長因子受體，分布于B細胞、單核細胞、嗜堿性粒細胞等細胞的表面，具有調節(jié)和效應作用。[詳細]

  2018-09-28 10:00

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• 人（human）白細胞分化抗原137L ELISA試劑盒說明書

  人（human）白細胞分化抗原137LELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本：血清一、試劑組成1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶標偶合液EnzymeConjugate12.0ml3、標準品Standard　5x1.0ml4、呈色劑A、SubstrateA6.0ml5、呈色劑B、SubstrateB6.0ml6、終止液StopSolution6.0ml7、濃縮洗滌液（1：20）RinsingBuffer60.0ml8、5倍樣品稀釋液dilution15.0m二、注意事項此試劑為體外檢測試劑，效期內使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。使用前應將盒內各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。保存于2-8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內標示。濃縮洗滌液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘三、操作步驟每孔分別加入已稀釋的樣品、標準品各100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。每孔加入酶標偶合液100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應15分鐘。8．每孔加終止液50ul，于450nm波長讀O.D.值。四、結果判斷儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。檢測值范圍：0160ng/ml敏感度：1.0ng/ml[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• 人可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）ELISA試劑盒

  人可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中人可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）水平。用純化的人可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入可溶性白細胞分化抗原28（sCD28），再與HRP標記的可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人可溶性白細胞分化抗原28（sCD28）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟：1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-10-19 10:00

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• 人白細胞分化抗原40配體試劑盒使用方法

  檢測范圍：48T30ng/L-2000ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中白細胞分化抗原40配體（CD40L）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞分化抗原40配體（CD40L）水平。用純化的人CD40L抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入CD40L，再與HRP標記的CD40L抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CD40L呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人白細胞分化抗原40配體（CD40L）濃度。[詳細]

  2018-10-01 10:00

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• 人白細胞分化抗原14(CDl4)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  人白細胞分化抗原14(CDl4)ELISA試劑盒實驗使用說明書本生一直視質量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。本生試劑盒[詳細]

  2023-10-26 16:25

  應用文章

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• 人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA Kit

  人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA Kit[詳細]

  2015-09-30 00:00

  標準

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• 人白細胞分化抗原40配體（CD40L）試劑盒使用方法

  檢測范圍：48T30ng/L-2000ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中白細胞分化抗原40配體（CD40L）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞分化抗原40配體（CD40L）水平。用純化的人CD40L抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入CD40L，再與HRP標記的CD40L抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CD40L呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人白細胞分化抗原40配體（CD40L）濃度。試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標試劑3ml×1瓶8標準品（2000ng/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×4條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]

  2018-09-19 10:01

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• 犬白細胞分化抗原8(CD8)elisa試劑盒使用說明書

  犬白細胞分化抗原8(CD8)elisa試劑盒使用說明書[詳細]

  2024-10-08 05:26

  應用文章

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• 人基質金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA Kit說明書

  人基質金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-21 00:00

  期刊論文

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• 人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA Kit說明書

  人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-21 00:00

  期刊論文

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• 人葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)ELISA Kit說明書

  人葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-15 00:00

  應用文章

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• 大鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)elisa試劑盒使用說明書

  大鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)elisa試劑盒使用說明書[詳細]

  2024-10-08 05:26

  其它

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• 人基質金屬蛋白酶YZ因子4(TIMP-4)ELISA Kit說明書

  人基質金屬蛋白酶YZ因子4(TIMP-4)ELISA Kit說明書[詳細]

  2024-10-03 20:16

  選購指南

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• 人凝血酶ELISA Kit

  人凝血酶ELISA Kit[詳細]

  2014-08-21 00:00

  安裝說明

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• 大鼠白細胞分化抗原44（CD44）酶聯免疫分析試劑盒使用說明

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1.6ng/L-70ng/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清樣本中白細胞分化抗原44(CD44)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠白細胞分化抗原44(CD44)水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞分化抗原44(CD44)，再與HRP標記的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞分化抗原44(CD44)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠白細胞分化抗原44(CD44)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（120ng/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。[詳細]

  2018-10-03 10:00

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• 人基質金屬蛋白酶YZ因子4(TIMP-4)ELISA Kit質控報告

  人基質金屬蛋白酶YZ因子4(TIMP-4)ELISA Kit質控報告[詳細]

  2014-08-21 00:00

  專利

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• 人ELISA試劑盒,TPA ELISA Kit

  96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原（TPA）ELISA試劑盒相關產品：96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原（TPA）ELISA試劑盒IL-10,小鼠白介素-10Elisa試劑盒磺胺二甲基惡唑,標準品JLJL200712人Elisa試劑盒,人ProteinCElisa試劑盒，HumanProteinCELISA試劑盒CAS號:108-69-0,3,5-二,98%人Elisa試劑盒,人CD30Elisa試劑盒，HumanClusterofdifferentiation30,CD30ELISA試劑盒CAS:893-36-7,鹽酸-L-白氨酰-2-萘胺/L-亮氨酰-2-萘胺鹽酸鹽/L-白氨酰-β-萘胺鹽酸鹽/鹽酸-L-亮氨酰-2-萘胺/L（+）-亮氨酰-2-萘基鹽酸氨/L-Leucyl-2-naphthylamidehydrochloride,BR,98%,1克,避光,-20℃96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原（TPA）ELISA試劑盒Humanbacterialvaginosis,BVELISA試劑盒人（BV）kit說明書,細菌性陰道病Elisa試劑盒CXCR3ELISAKit,大鼠CXC趨化因子受體3Elisa檢測試劑盒蒙花苷,標準品,含量測定,20mg,常溫,避光PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISA試劑盒豬（apo-A1）kit說明書,載脂蛋白A1Elisa試劑盒大鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒HumanhepatitisBvirusXinteractingprotein,HBXIPELISAKit人異常凝血酶原（APT）ELISA試劑盒HumanAbnormalprothrombin,APTELISA試劑盒草烏甲素,標準品,含量測定,50mg,常溫,避光96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原（TPA）ELISA試劑盒GRP1957,營養(yǎng)肉湯,供一般細菌培養(yǎng)、轉種和增菌用,250g小鼠生長激素釋放多肽（GHRP）ELISA試劑盒HumanMotilin,MTLELISAKitCAS號:4767-3-7,2,2-雙（羥甲基）丙酸,98%[詳細]

  2018-10-23 10:31

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• 人黑色素ELISA Kit說明書

  人黑色素ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-21 00:00

  安裝說明

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