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堿性磷酸酶研究應(yīng)用
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2024-09-29 00:09 952閱讀次數(shù)
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堿性磷酸酶也是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品Z常用的標(biāo)記酶之一。與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)相比,ALP用作標(biāo)記酶的優(yōu)點(diǎn)是,穩(wěn)定性高、靈敏度高,缺點(diǎn)是成本高,標(biāo)記困難?! ≡谘芯恐衂常用的ALP如下: ◇細(xì)菌堿性磷酸酶Bacterialalkalinephosphatase(BAP),來(lái)源:EscherichiacoliC4; ◇Shrimpalkalinephosphatase(SAP),來(lái)源:一種北極蝦(Pandalusborealis); ◇小牛腸堿性磷酸酶CalfIntestinalAlkalinePhosphatase(CIP); ◇胎盤堿性磷酸酶Placentalalkalinephosphatase(PALP)和分泌性堿性磷酸酶thesecretedalkalinephosphatase(SEAP),后者是前者的C末端短缺版與PALP相比,SEAP沒(méi)有PALP的C末端Z后24個(gè)氨基酸(這24個(gè)氨基酸構(gòu)成了與糖基化磷脂酰肌醇靶向錨定的區(qū)域) ALP主要應(yīng)用于分子生物學(xué)和酶免分析中: ★分子生物學(xué)中主要用作核酸的去磷酸化。因?yàn)镈NA通常會(huì)在5'端結(jié)合磷酸基團(tuán),用ALP去磷酸化能防止DNA分子5'端與3'端連接,從而在后續(xù)步驟準(zhǔn)備好之前讓DNA分子YZ處于線性化狀態(tài);同樣,通過(guò)去磷酸化可用作放射標(biāo)記示蹤。通常用作這些目的用的Z多的是Shrimpalkalinephosphatase(SAP),因?yàn)樵诜磻?yīng)完成之后它是Z容易滅活的?! 锩该夥治鲋袘?yīng)用Z多的是ELISA,以競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)小分子抗原為例,抗體先與固相載體結(jié)合,然后讓待測(cè)樣品與事先經(jīng)ALP標(biāo)記過(guò)的該抗原競(jìng)爭(zhēng)地與抗體結(jié)合,洗去未反應(yīng)的過(guò)量ALP-抗原,加入顯色底物。則可以通過(guò)與按梯度濃度變化的標(biāo)準(zhǔn)品繪出的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比從而知道待測(cè)樣品中抗原的濃度。ELISA中用的比較多的是辣根過(guò)氧化物酶(HRP),底物為OPD,深桔黃色,檢測(cè)波長(zhǎng)492nm;TMB,藍(lán)綠色,檢測(cè)波長(zhǎng)450nm堿性磷酸酶,底物為PNPP(對(duì)-消基苯磷酸酯),黃色,檢測(cè)波長(zhǎng)405nm ★目前工業(yè)上一個(gè)普遍的應(yīng)用是作為檢驗(yàn)牛奶的巴斯的滅菌的標(biāo)志:被巴斯德過(guò)高溫滅菌的分子會(huì)被滅活,向其中和未巴斯滅菌的牛奶中加入ALP的底物,2分鐘后未滅菌的樣品應(yīng)該顯黃色,如果待測(cè)樣品(指被巴斯滅菌過(guò)的牛奶)也能呈現(xiàn)相同顏色,則說(shuō)明巴斯滅菌溫度未過(guò)度。當(dāng)然總有例外,因?yàn)橛猩贁?shù)細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生耐熱的ALP。
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堿性磷酸酶研究應(yīng)用
- 堿性磷酸酶也是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品Z常用的標(biāo)記酶之一。與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)相比,ALP用作標(biāo)記酶的優(yōu)點(diǎn)是,穩(wěn)定性高、靈敏度高,缺點(diǎn)是成本高,標(biāo)記困難。 在研究中Z常用的ALP如下: ◇細(xì)菌堿性磷酸酶Bacterialalkalinephosphatase(BAP),來(lái)源:EscherichiacoliC4; ◇Shrimpalkalinephosphatase(SAP),來(lái)源:一種北極蝦(Pandalusborealis); ◇小牛腸堿性磷酸酶CalfIntestinalAlkalinePhosphatase(CIP); ◇胎盤堿性磷酸酶Placentalalkalinephosphatase(PALP)和分泌性堿性磷酸酶thesecretedalkalinephosphatase(SEAP),后者是前者的C末端短缺版與PALP相比,SEAP沒(méi)有PALP的C末端Z后24個(gè)氨基酸(這24個(gè)氨基酸構(gòu)成了與糖基化磷脂酰肌醇靶向錨定的區(qū)域) ALP主要應(yīng)用于分子生物學(xué)和酶免分析中: ★分子生物學(xué)中主要用作核酸的去磷酸化。因?yàn)镈NA通常會(huì)在5'端結(jié)合磷酸基團(tuán),用ALP去磷酸化能防止DNA分子5'端與3'端連接,從而在后續(xù)步驟準(zhǔn)備好之前讓DNA分子YZ處于線性化狀態(tài);同樣,通過(guò)去磷酸化可用作放射標(biāo)記示蹤。通常用作這些目的用的Z多的是Shrimpalkalinephosphatase(SAP),因?yàn)樵诜磻?yīng)完成之后它是Z容易滅活的?! 锩该夥治鲋袘?yīng)用Z多的是ELISA,以競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)小分子抗原為例,抗體先與固相載體結(jié)合,然后讓待測(cè)樣品與事先經(jīng)ALP標(biāo)記過(guò)的該抗原競(jìng)爭(zhēng)地與抗體結(jié)合,洗去未反應(yīng)的過(guò)量ALP-抗原,加入顯色底物。則可以通過(guò)與按梯度濃度變化的標(biāo)準(zhǔn)品繪出的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比從而知道待測(cè)樣品中抗原的濃度。ELISA中用的比較多的是辣根過(guò)氧化物酶(HRP),底物為OPD,深桔黃色,檢測(cè)波長(zhǎng)492nm;TMB,藍(lán)綠色,檢測(cè)波長(zhǎng)450nm堿性磷酸酶,底物為PNPP(對(duì)-消基苯磷酸酯),黃色,檢測(cè)波長(zhǎng)405nm ★目前工業(yè)上一個(gè)普遍的應(yīng)用是作為檢驗(yàn)牛奶的巴斯的滅菌的標(biāo)志:被巴斯德過(guò)高溫滅菌的分子會(huì)被滅活,向其中和未巴斯滅菌的牛奶中加入ALP的底物,2分鐘后未滅菌的樣品應(yīng)該顯黃色,如果待測(cè)樣品(指被巴斯滅菌過(guò)的牛奶)也能呈現(xiàn)相同顏色,則說(shuō)明巴斯滅菌溫度未過(guò)度。當(dāng)然總有例外,因?yàn)橛猩贁?shù)細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生耐熱的ALP。[詳細(xì)]
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2024-09-29 00:09
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堿性磷酸酶底物
- 堿性磷酸酶底物[詳細(xì)]
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2011-07-15 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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堿性磷酸酶[大腸桿菌] 使用說(shuō)明
- 供應(yīng)商:上海經(jīng)科化學(xué)科技有限公司活動(dòng):消費(fèi)積分可換充值卡!中文:堿性磷酸酶[大腸桿菌]英文:Phosphatase(Alkaline)(E.coli)貨號(hào):E-ALPEC規(guī)格:400Units價(jià)格:1728元類別:碳水化合物活性酶簡(jiǎn)介:碳水化合物活性酶,活躍在復(fù)雜的碳水化合物和糖復(fù)合物,酶的活性::GlycosideHydrolases(GHs);Glycosyl-Transferases(GTs);PolysaccharideLyases(PLs);CarbohydrateEsterases(CEs)andCarbohydrate-BindingModules(CBMs)說(shuō)明書(shū):點(diǎn)擊上面“”相關(guān)產(chǎn)品:貨號(hào):E-ABFAN;α-L-阿拉伯呋喃糖酶(構(gòu)巢曲霉);500Units;2400元貨號(hào):E-ABFBO17;α-L-阿拉伯呋喃糖酶B17(卵形類桿菌);2,000Units;2400元貨號(hào):E-ABFBO21;α-L-阿拉伯呋喃糖酶B21(卵形類桿菌);200Units;2400元貨號(hào):E-ABFBO25;α-L-阿拉伯呋喃糖酶B25(卵形類桿菌);200Units;2400元貨號(hào):E-ABFCJ;α-L-阿拉伯呋喃糖酶(纖維弧菌);500Unitsat40oC;2608元貨號(hào):E-ABFCT;α-L-阿拉伯呋喃糖酶(熱纖梭菌);500Unitsat40oC;2608元貨號(hào):E-ABFUM;α-L-阿拉伯呋喃糖酶(玉蜀黍黑粉菌);400Unitsat40oC;2400元貨號(hào):E-ACPEC;酸性磷酸酶(大腸桿菌);400Units;2000元貨號(hào):E-ACSBS;Acetyl-CoA合成酶[枯草桿菌];250Units;3248元貨號(hào):E-ADHEC;乙醇脫氫酶[大腸桿菌];1,000Units;2080元貨號(hào):E-AFAM2;α-L-阿拉伯呋喃糖酶(新特異性青春雙歧桿菌);400Units;2448元貨號(hào):E-AFASE;α-L-阿拉伯呋喃糖酶[黑曲霉];480Units;2320元貨號(hào):E-AGALPS;α-半乳糖苷酶[簡(jiǎn)青霉];2,000Unitsat40oC;2400元貨號(hào):E-AGLAN;α-半乳糖苷酶[黑曲霉];2,000Units;2528元貨號(hào):E-AGLANP;α-半乳糖苷酶[黑曲霉]粉末;3,000Units;2800元貨號(hào):E-AGLGU;α-半乳糖苷酶[瓜爾豆];1,000Units;2528元貨號(hào):E-AGLUTM;α-葡萄糖苷酶[耐熱][海棲熱袍菌];500Unitsat80oC;2480元貨號(hào):E-AGUBS;α-葡萄糖醛酸酶[嗜熱脂肪芽孢桿菌]重組;200Unitsat70oC;2144元[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
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小鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒
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2015-10-14 00:00
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堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)說(shuō)明書(shū)
- 堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)說(shuō)明書(shū)上海喬羽生物提供堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)說(shuō)明書(shū),詳細(xì)為您講述堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)的用途,特點(diǎn),操作步驟,注意事項(xiàng)等詳情,本司專業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,動(dòng)物血清,化學(xué)試劑,生化試劑,染色液,溶液,緩沖液,實(shí)驗(yàn)耗材,生物分子,微生物,蛋白質(zhì),抗生素,培養(yǎng)基,抗體,抗原,其他實(shí)驗(yàn)試劑等,了解更多試劑詳情請(qǐng)來(lái)電聯(lián)系我司銷售人員!中文名:堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)供應(yīng)商:上海喬羽用途:酶化學(xué)法DNA檢測(cè)注意事項(xiàng):主要由0.1MTris-HCl、0.1M氯化鈉、2mM氯化鎂組成,經(jīng)高壓滅菌處理。保存:室溫,12個(gè)月堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)操作步驟:1、按實(shí)驗(yàn)具體要求操作或參考如下步驟操作。2、封閉后漂洗時(shí),用200ml堿性磷酸酶緩沖液(pH7.5)漂洗膜2次,再用200ml堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5),輕微漂洗。3、采用NBT/BICIP法檢測(cè)。堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)注意事項(xiàng):1、如果每次的使用量很小,可以適當(dāng)分裝后再使用。2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。標(biāo)簽:堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5,無(wú)菌)緩沖液堿性磷酸酶緩沖液[詳細(xì)]
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2018-11-09 10:00
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2024-09-22 17:53
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2024-09-22 18:15
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2024-09-17 11:28
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2014-08-21 00:00
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- 實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人堿性磷酸酶(ALP)水平。用純化的人堿性磷酸酶(ALP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入堿性磷酸酶(ALP),再與HRP標(biāo)記的堿性磷酸酶(ALP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的堿性磷酸酶(ALP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人堿性磷酸酶(ALP)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(240U/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。人堿性磷酸酶(ALP)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。120U/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60U/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30U/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15U/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5U/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。人堿性磷酸酶(ALP)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠堿性磷酸酶elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 大鼠堿性磷酸酶elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中堿性磷酸酶(ALP)含量。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。40IU/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20IU/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10IU/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5IU/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5IU/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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骨堿性磷酸酶BAP ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 【產(chǎn)品名稱】通用名稱:骨堿性磷酸酶BAPELISA試劑盒英文名稱:BAPELISAKit【包裝規(guī)格】96人份/盒【預(yù)期用途】骨堿性磷酸酶BAPELISA試劑盒用于定量檢測(cè)人血清中骨特異性堿性磷酸酶(BAP)。作為成骨細(xì)胞活性的指示劑,本試劑盒可作為管理絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松和變形性骨炎的輔助工具。血清骨堿性磷酸酶(BAP)的水平被認(rèn)為反映了成骨細(xì)胞的代謝狀態(tài)(6,7)。骨代謝的極ng確評(píng)定對(duì)于測(cè)定骨代謝疾病的嚴(yán)重程度和ZLLX起著關(guān)鍵性的作用。血清BAP水平的測(cè)定已顯示有助于評(píng)估變形性骨炎、骨軟化癥、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)、腎性骨營(yíng)養(yǎng)不良、骨質(zhì)疏松癥和骨轉(zhuǎn)移患者(6-10)。總堿性磷酸酶測(cè)定已被認(rèn)可應(yīng)用于變形性骨炎的診斷和病人的監(jiān)測(cè)。骨是一個(gè)動(dòng)態(tài)的組織,人的一生始終貫穿著骨的生成和骨的溶解(也叫骨吸收),這個(gè)過(guò)程稱之為骨重建。骨重建過(guò)程是在兩種骨細(xì)胞交互作用完成的復(fù)雜過(guò)程:成骨細(xì)胞影響骨的生成,而破骨細(xì)胞影響骨的吸收(1-3)。骨形成和骨吸收是一個(gè)在正常環(huán)境下緊密耦聯(lián)的相互依賴的過(guò)程(2,4)。這種耦聯(lián)關(guān)系是保持骨骼生化活性不可或缺的部分,從而維持了骨組織的結(jié)構(gòu)、外型及強(qiáng)度(2,3,5)。變形性骨炎是一種常見(jiàn)的骨骼紊亂,表現(xiàn)為正常骨細(xì)胞的局灶性增生。變形性骨炎的發(fā)病率比曾一度認(rèn)為發(fā)病人群在3%-4%的中年患者和10%-15%的老年人要高出許多。這種疾病不影響年輕人。絕大部分變形性骨炎患者無(wú)臨床癥狀,容易漏診,除非在一些不相關(guān)原因的YL檢查時(shí)出現(xiàn)X攝片或血清堿性磷酸酶水平異常時(shí)才發(fā)現(xiàn)的。這種癥狀的患者Z常見(jiàn)的癥狀是疼痛和畸形。資料來(lái)源:北京科瑞美科技有限公司[詳細(xì)]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠堿性磷酸酶(ALP)Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 大鼠堿性磷酸酶(ALP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:96T1IU/L-40IU/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中堿性磷酸酶(ALP)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠堿性磷酸酶(ALP)水平。用純化的大鼠堿性磷酸酶(ALP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入堿性磷酸酶(ALP),再與HRP標(biāo)記的堿性磷酸酶(ALP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的堿性磷酸酶(ALP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠堿性磷酸酶(ALP)濃度。大鼠堿性磷酸酶(ALP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(80IU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。大鼠堿性磷酸酶(ALP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。40IU/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20IU/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10IU/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5IU/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5IU/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。大鼠堿性磷酸酶(ALP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照大鼠堿性磷酸酶(ALP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-23 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒
- 人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-26 05:38
期刊論文
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人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-09-11 18:04
實(shí)驗(yàn)操作
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骨形態(tài)發(fā)生蛋白的研究與應(yīng)用
- 骨形態(tài)發(fā)生蛋白的研究與應(yīng)用[詳細(xì)]
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2011-06-10 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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