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- 孝輝大叔 2017-01-26 00:00:00
- 你是計算凋亡細胞總數還是所有腫瘤細胞總數?還是你的檢測方法 熒光顯微鏡檢測還是流式細胞儀?檢測的是HE切片上 還是細胞爬片 還是細胞懸浮液? 細胞懸浮液通常用流式,其他的都可直接鏡檢。 按理論講,顯微鏡數熒光點就是你所需要的凋亡細胞數了,但細胞總數的話可以再熒光淬滅后做HE染色,然后利用計算灰度的方法讓軟件自動讀數。 流式細胞儀可以自動讀數并統計。
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- werefcd 2017-01-26 00:00:00
- 單位實驗室做過,小編順便推薦一下細胞爬片是從上海晶安生物公司買的,實驗效果不錯. 細胞免疫熒光步驟: 1.細胞爬片;首先是玻片的處理,普通的蓋玻片用砂輪劃成自己要的大小的小方塊,先用洗衣粉洗干凈,用水沖靜烤干,然后泡酸過夜,撈酸后流水洗凈,烤干,置于器皿中高壓滅菌,然后再烤箱中大約8小時烤干備用。 爬片可以在培養(yǎng)皿 六孔板或24孔板中都可,我選擇在培養(yǎng)皿中爬。一為節(jié)約經費(培養(yǎng)皿可以重復利用)二來覺得培養(yǎng)皿口大,操作比較方便。培養(yǎng)皿消毒同上,消毒時記得消兩把鑷子 具體操作是:用胰酶消化好細胞,充分吹打,使之成單細胞懸液(注意:這一點很重要,關系到將來爬出來片子的質量) 取出消毒的培養(yǎng)皿,可以先加少量培養(yǎng)基(以使玻片與培養(yǎng)皿緊密接觸),將玻片小心放入擺放其中,然后將單細胞懸液一滴一滴的滴到玻片上。Z后蓋上培養(yǎng)皿置于37度5%CO2的暖箱中培養(yǎng),根據細胞生長狀況,24小時或更長時間適時取出爬片。 爬片置于37度PBS中洗三次,每次3到5秒鐘,然后在4%多聚甲醛中固定15分鐘,然后再用37度去離子水將甲醛沖干凈,注意手法輕柔,要不然掉片很厲害。同時操作過程中注意玻片的正反面,要不然真的是前功盡棄。 將做好的爬片置于濾紙上晾干,然后用中性樹膠粘在載玻片上。注意一定要等中性樹膠徹底干了之后才能做后續(xù)實驗,要不然玻片會掉下來的,就又是前功盡棄了 做好的細胞爬片可以放在-20保存?zhèn)溆?,具體能保存多長時間不太清楚,當然盡量早用。
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- 細胞爬片后,能做HE染色嗎
- 生物顯微鏡應用于HE染色片觀察
HE染色法又稱蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining),是一種廣泛用于臨床和實驗中的染色方法。將以蘇木精染液和伊紅染液先后將特定的細胞成分上色,由于蘇木精染液為堿性,使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色;伊紅為酸性染料,使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。通過HE的染色,各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來,HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中最基本、使用最廣泛的技術方法,一般搭配生物顯微鏡進行觀察。
近期潮汕職業(yè)技術學院老師需要一臺顯微鏡和相機對HE染色切片進行觀察,且需要拍照以及錄像功能模塊,明美銷售經理推薦生物顯微鏡ML31搭配顯微鏡相機MSX1
生物顯微鏡ML31搭配顯微鏡相機MSX1拍攝的HE染色片
生物顯微鏡ML31是一款采用無限遠光學設計的高倍放大顯微鏡,配備平場消色差物鏡和長壽命LED透射光源,柯勒式照明,可以獲得清晰、平坦、高襯度的成像效果,可以用來觀察植物切片、植物細胞,或者半透明物體以及粉末、細小顆粒等樣品。
顯微數字相機MSX1采用高性能成像芯片,內置MS系列硬件ISP圖像處理芯片,針對顯微鏡拍攝場景特別優(yōu)化,精確還原樣品的精細結構和真實色彩,通過硬件加速,極大提升了相機運行速度,是病理診斷、金相分析和體視觀察等應用領域的理想工具。
如果您對HE染色片顯微鏡感興趣或有疑問,歡迎與我們聯系,期待與您相約!
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- 顯微鏡相機應用于HE染色觀察
顯微鏡相機應用于HE染色觀察
HE染色可看大體病理改變,用染料把堿性和酸性物質直接染成藍色或紅色,顯微鏡下可直接觀察組織或細胞的形態(tài)。在臨床上是診斷惡性腫瘤和腫瘤的很好的方法。生物顯微鏡ML31用于HE染色觀察,具有易用舒適,穩(wěn)定可靠的優(yōu)勢。
近期,明美廣州區(qū)域安裝生物顯微鏡ML31搭配630萬像素顯微鏡相機MS60,用于HE染色片的觀察并能清晰拍照。在顯微鏡下做診斷其實并不容易,這需要大量知識的學習和豐富的經驗積累,而好的顯微鏡能有效提升效率,ML31采用高平場性物鏡,保證10X/22視野數下的平坦清晰成像。
生物顯微鏡ML31采用人機工程學設計,不斷為操作者更加提供好的使用體驗,避免長期使用帶來的疲勞感;另外通過光學系統優(yōu)化升級,使得操作更簡便,減少培訓成本,易上手。
生物顯微鏡ML31采用高透光平場消色差物鏡,成像清晰無場曲,標配明場成像,無限遠光學系統,擴展?jié)摿Υ?,可擴展用于暗場、相差、熒光多功能顯微觀察。
您若對生物顯微鏡感興趣或存在疑問,歡迎與我們聯系,我們將竭誠為您服務!
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來源:https://www.mshot.com/article/1765.html
- 細胞爬片免疫組化染色在培養(yǎng)板內不行么
- 明美倒置熒光顯微鏡HE染色片應用
客戶需要顯微鏡來看HE染色片,通過熒光切片來觀察,HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中Z基本、使用Z廣泛的技術方法??蛻魧晒饬炼纫蟾撸硗獠灰须s散光干擾。
解決方案:
結合客戶需求明美工程師推薦倒置熒光顯微鏡MF53(定制選用窄帶濾片,更換熒光物鏡)倒置熒光顯微鏡采用出色的弱熒光成像,采用轉盤式熒光切換方式,在CTC檢測、FRET、細胞免疫等領域應用廣泛。,另外搭配明美科研級顯微鏡相機MSX2,這款顯微鏡相機采用大靶面高性能的成像芯片,設計USB3.0數據傳輸接口,具有高分辨率、顏色還原準確和高靈敏度的特點,其的色彩表現,是液基細胞分析、免疫組化、骨 髓細胞分析等對顏色要求高的病理診斷的理想工具。此外在明暗場、相襯、偏光、DIC、熒光成像等領域同樣表現出色。
(來源:http://www.mshot.com/kehuanli/20191227.html廣州市明美光電技術有限公司)
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