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問(wèn)答社區(qū)

提取DNA,跑完電泳發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)過(guò)多,有沒(méi)辦法在這模板上繼續(xù)去除蛋白質(zhì)?

小白兔子6666 2010-08-19 21:19:53 492  瀏覽
  • 提取出的模板已經(jīng)用TE保存,有沒(méi)辦法在這模板繼續(xù)將蛋白質(zhì)去除?

參與評(píng)論

全部評(píng)論(2條)

  • 宏站 2010-08-20 00:00:00
    保存液再加入部分水后,加入等體積氯仿/異戊醇重新抽提,離心后取上清,用水溶解 溶解后加入3M NaOAc(pH5.2)(1/10體積)(或7.5M AmmAc(1/2體積))和2倍體積的無(wú)水乙醇重沉淀核酸。 —20℃溫育10min。13000rpm,離心20min。 用70%乙醇洗一次,13000rpm,室溫,離心5分鐘。 干燥。 如果覺(jué)得還有蛋白,就再重復(fù)該過(guò)程。

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    評(píng)論

  • 櫻風(fēng)旋律 2010-08-27 00:00:00
    樓上沒(méi)說(shuō)清楚,我補(bǔ)充下,模板原液你可以根據(jù)你的DNA定量的濃度適當(dāng)?shù)募覶E后,假如等體積的24:1的氯仿/異戊醇重新抽提1到2次,抽提手搖的話20分鐘差不多了,然后9000rpm離心10分鐘,取上清等體積異丙醇沉淀或者2倍體積無(wú)水乙醇沉淀,沉淀過(guò)夜(不趕時(shí)間的話),13200rpm離心10min,去上清,70%乙醇洗一次,13200rpm離心5分鐘,烘干,溶解滅活。定量

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    評(píng)論

熱門(mén)問(wèn)答

提取DNA,跑完電泳發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)過(guò)多,有沒(méi)辦法在這模板上繼續(xù)去除蛋白質(zhì)?
提取出的模板已經(jīng)用TE保存,有沒(méi)辦法在這模板繼續(xù)將蛋白質(zhì)去除?
2010-08-19 21:19:53 492 2
提取DNA跑電泳完后DNA條帶好不好怎么看
 
2016-08-21 14:33:55 414 1
蛋白質(zhì)電泳能不能過(guò)夜再跑
 
2012-04-23 15:23:05 703 3
蛋白質(zhì)電泳
我有些混亂,老師講的例子和一些概念沒(méi)理解清楚,所以問(wèn)題有點(diǎn)奇怪 拜托幫幫忙π_π ①一種蛋白質(zhì)電泳,假設(shè)它有4條肽鏈,兩兩配對(duì),電泳會(huì)出現(xiàn)2條帶 ??? 這對(duì)嗎? ②有n種蛋白質(zhì)在,電泳就會(huì)有n條帶 ? ③如果是這樣,電泳是電泳出肽鏈還是蛋白質(zhì)啊-_-||-... 我有些混亂,老師講的例子和一些概念沒(méi)理解清楚,所以問(wèn)題有點(diǎn)奇怪 拜托幫幫忙π_π ①一種蛋白質(zhì)電泳,假設(shè)它有4條肽鏈,兩兩配對(duì),電泳會(huì)出現(xiàn)2條帶 ??? 這對(duì)嗎? ②有n種蛋白質(zhì)在,電泳就會(huì)有n條帶 ? ③如果是這樣,電泳是電泳出肽鏈還是蛋白質(zhì)啊-_-||-_-||-_-||-_-|| 展開(kāi)
2017-09-23 21:16:47 544 1
蛋白質(zhì)電泳
有一混合蛋白質(zhì)溶液,各種蛋白質(zhì)的pI為4.6、5.0、5.3、6.7、7.3,電泳時(shí)欲使其中四 種泳向正極,緩沖液的pH應(yīng)是多少 A.4.0 B.5.0 C.6.0 D.7.0 E.8.0
2012-03-05 16:21:04 397 2
蛋白質(zhì)電泳問(wèn)題
請(qǐng)問(wèn)各位大俠,我的蛋白質(zhì)酶解液(原液)尚且可以通過(guò)SDS-page電泳跑出條帶,可為什么酶解液除鹽再通過(guò)柱層析(用0.02N pH7.0的NaH2PO4和Na2HPO4緩沖液洗脫過(guò)柱)純化后卻跑不出電泳條帶了呢?快畢業(yè)了,請(qǐng)各位救我!!!謝謝大家啊!:~):~):~)大家能說(shuō)說(shuō)樣品中會(huì)... 請(qǐng)問(wèn)各位大俠,我的蛋白質(zhì)酶解液(原液)尚且可以通過(guò)SDS-page電泳跑出條帶,可為什么酶解液除鹽再通過(guò)柱層析(用0.02N pH7.0的NaH2PO4和Na2HPO4緩沖液洗脫過(guò)柱)純化后卻跑不出電泳條帶了呢?快畢業(yè)了,請(qǐng)各位救我!!!謝謝大家啊!:~):~):~)大家能說(shuō)說(shuō)樣品中會(huì)有哪些因素影響SDS_PAGE的嗎?謝謝大家了!痛哭流涕。。, 展開(kāi)
2010-05-14 01:17:27 396 4
蛋白質(zhì)SDS電泳跑不出條帶,求助各位大仙
 
2018-11-17 23:36:13 253 0
電泳時(shí)蛋白質(zhì)上樣量是多少
 
2012-03-05 20:52:17 1350 3
SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳問(wèn)題
剛開(kāi)始跑,在濃縮膠就不在一條線上,有的已經(jīng)移動(dòng)一小節(jié)了有的還沒(méi)開(kāi)始動(dòng),但是跑著跑著大約到分離膠時(shí)就又到一條線了上了,不知道怎么回事。電泳時(shí)感覺(jué)加的樣有散的趨勢(shì),上樣20ul,跑著跑著就連成一條線了,對(duì)結(jié)果有影響沒(méi)?原因?解決辦法!電泳時(shí)條帶歪了... 剛開(kāi)始跑,在濃縮膠就不在一條線上,有的已經(jīng)移動(dòng)一小節(jié)了有的還沒(méi)開(kāi)始動(dòng),但是跑著跑著大約到分離膠時(shí)就又到一條線了上了,不知道怎么回事。電泳時(shí)感覺(jué)加的樣有散的趨勢(shì),上樣20ul,跑著跑著就連成一條線了,對(duì)結(jié)果有影響沒(méi)?原因?解決辦法!電泳時(shí)條帶歪了在Z下面總是亂七八糟的,染色后偏下的地方總是一塊不規(guī)則紫色的,不是帶狀。灌膠時(shí)膠漏了,對(duì)電泳結(jié)果有影響沒(méi),是不是得重配?分離膠或者濃縮膠配好后使用什么方法使其混勻,用玻璃棒攪拌還是振蕩器鎮(zhèn)或其他方法以上是我電泳以來(lái)的所有問(wèn)題,感謝所有回答人員。 展開(kāi)
2016-12-01 22:05:29 418 1
要想電泳雞蛋清中的蛋白質(zhì)怎么提取它
 
2016-06-02 11:27:42 401 1
提取細(xì)菌蛋白質(zhì)
設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)提取大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)盡可能多的蛋白質(zhì),做核磁,要求盡可能不含蛋白質(zhì)外的雜質(zhì),蛋白質(zhì)組盡量完整,不知有沒(méi)有什么方法,希望大家指點(diǎn)?目前試過(guò)雙水相萃取,但效果似乎不是很... 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)提取大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)盡可能多的蛋白質(zhì),做核磁,要求盡可能不含蛋白質(zhì)外的雜質(zhì),蛋白質(zhì)組盡量完整,不知有沒(méi)有什么方法,希望大家指點(diǎn)? 目前試過(guò)雙水相萃取,但效果似乎不是很好 展開(kāi)
2009-04-15 22:36:58 423 3
基因組dna有蛋白質(zhì)和rna污染會(huì)有什么電泳結(jié)果
在做哺乳動(dòng)物組織基因組dna的提取試驗(yàn)中,將提取好的dna跑電泳,若基因組dna有蛋白質(zhì)和rna污染會(huì)有什么電泳結(jié)果
2012-11-14 00:24:26 820 3
提取基因組dna過(guò)程中,如何去除蛋白質(zhì),多糖和脂類(lèi)等生物大分子
 
2017-06-06 09:20:34 890 1
RNA、DNA和蛋白質(zhì)跑電泳所用的染料一樣嗎?如果不一樣的話,各是什么?
 
2011-08-05 00:52:07 511 3
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2006-06-28 20:42:35 553 1
關(guān)于蛋白質(zhì)電泳的問(wèn)題
在ph8.6的緩沖液中進(jìn)行血清醋酸纖維素薄膜電泳,可把血清蛋白質(zhì)分為5條帶,從負(fù)極數(shù)起它們的順序是? .α1、α2、β、A這幾個(gè)排序就可以了。我是連α1、α2是什么都沒(méi)搞懂。。拜托大神了。
2017-11-25 14:11:38 458 1
蛋白質(zhì)電泳結(jié)果圖怎么看?
急!
2012-03-09 00:58:59 681 3
蛋白質(zhì)和dna均可用電泳方法進(jìn)行分離純化
蛋白質(zhì)和DNA均可用電泳方法進(jìn)行分離純化 為什么?
2010-07-09 21:03:39 650 2
請(qǐng)問(wèn)細(xì)胞提取完dna之后還能復(fù)原下次繼續(xù)使用用來(lái)檢測(cè)dna嗎?
 
2018-02-28 01:08:15 375 3

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