多肽的固相合成

　　多肽的合成是氨基酸重復(fù)添加的過程，通常從C端向N端(氨基端)進(jìn)行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的DY個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接，再以該氨基酸N端為合成起點，經(jīng)過脫去氨基保護(hù)基和過量的已活化的第二個氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，接長肽鏈，重復(fù)操作，達(dá)到理想的合成肽鏈長度，將肽鏈從樹脂上裂解下來，分離純化，獲得目標(biāo)多肽。

1、Boc多肽合成法

　　Boc方法是經(jīng)典的多肽固相合成法，以Boc作為氨基酸α-氨基的保護(hù)基，芐醇類作為側(cè)鏈保護(hù)基，Boc的脫除通常采用三氟乙酸(TFA)進(jìn)行。多肽合成時將已用Boc保護(hù)好的N-α-氨基酸共價交聯(lián)到樹脂上，TFA切除Boc保護(hù)基，N端用弱堿中和。

　　肽鏈的延長通過二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)活化、偶聯(lián)進(jìn)行，采用強酸氫氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)將合成的目標(biāo)多肽從樹脂上解離。在Boc多肽合成法中，為了便于下一步的多肽合成，反復(fù)用酸進(jìn)行脫保護(hù)，一些副反應(yīng)被帶入實驗中，例如多肽容易從樹脂上切除下來，氨基酸側(cè)鏈在酸性條件不穩(wěn)定等。

2、Fmoc多肽合成法

　　Carpino和Han以Boc多肽合成法為基礎(chǔ)發(fā)展起來一種多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。

　　Fmoc多肽合成法以Fmoc作為氨基酸α-氨基的保護(hù)基。其優(yōu)勢為在酸性條件下是穩(wěn)定的，不受TFA等試劑的影響，應(yīng)用溫和的堿處理可脫保護(hù)，所以側(cè)鏈可用易于酸脫除的Boc保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)。

　　肽段的ZH切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)從樹脂上定量完成，避免了采用強酸。同時，與Boc法相比，F(xiàn)moc法反應(yīng)條件溫和，副反應(yīng)少，產(chǎn)率高，并且Fmoc基團本身具有特征性紫外吸收，易于監(jiān)測控制反應(yīng)的進(jìn)行。Fmoc法在多肽固相合成領(lǐng)域應(yīng)用越來越廣泛。

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