Iodixanol碘克沙醇是一種非離子親水性化合物，常用作造影劑，比如冠狀動脈造影術(shù)中的造影劑，成人/兒童心血管造影、腦血管造影、外周動脈造影、腹部血管造影、尿路造影以及CT增強檢查等。 

除了用作造影劑，Iodixanol碘克沙醇還可用于病毒純化（如腺病毒分離純化）和外泌體提取純化。

目前常見的病毒純化方法是碘克沙醇密度梯度超速離心法和CsCl密度梯度超速離心法。碘克沙醇是一種造影劑，具有對細胞無毒和代謝惰性等特點，利用不同顆粒之間存在沉降系數(shù)差，在一定離心力作用下，顆粒各自以一定速度沉降，會在密度梯度區(qū)域上形成不同區(qū)帶，從而達到純化的目的。下圖是Adv病毒經(jīng)碘克沙醇密度梯度超速離心純化后的示意圖。

外泌體是含有豐富活性物質(zhì)的細胞分泌的一種微小囊泡，在細胞間通訊中具有重要作用。為了深入研究外泌體的功能和作用機制，需要對其成分進行分離和純化。密度梯度離心法是一種常用的外泌體分離純化方法。

密度梯度離心是根據(jù)外泌體與雜質(zhì)粒子之間的密度差異在超離的基礎(chǔ)上進行改進的分離方法，主要針對一些雜蛋白含量高且通過超離無法得到高純度外泌體的樣本。Iodixanol碘克沙醇是一種常用密度梯度介質(zhì)，具有濃度大時粘度、滲透壓不高，且無毒性等特點。

需要準備好不同濃度梯度的碘克沙醇（40%、20%、10%、5%; w/v），小心依次加入到離心管中，最上層加入待提取的樣本，通過離心使得不同物質(zhì)富集在不同密度介質(zhì)中，收集富集外泌體的介質(zhì)層并進行超離，就可以獲取高純度的外泌體。

具體方法如下：

（密度梯度離心法提取細胞培養(yǎng)上清液中的外泌體）

將細胞培養(yǎng)上清液通過濾膜過濾，去除雜質(zhì)和細胞碎片

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制備不同濃度梯度的碘克沙醇，從管底向上依次加入稀釋好的碘克沙醇溶液(40%、20%、10%、5%)

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將過濾后的上清液（外泌體溶液）加到離心管中梯度的頂部，4℃, 100, 000×g離心18 h

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離心后，可見管內(nèi)形成密度梯度，從下至上分別為高密度物質(zhì)、低密度物質(zhì)、上清液。使用吸管小心地將上清液和低密度物質(zhì)去除，保留高密度物質(zhì)。（高密度物質(zhì)即為外泌體）

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將高密度物質(zhì)溶解在適量的緩沖液中（如PBS），再次進行超速離心（4℃, 100, 000×g）, 去除未分離的雜質(zhì)

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重復以上步驟離心，直至獲得高純度的外泌體

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最后用適量的緩沖液（如PBS）重懸沉淀物，即為純化的外泌體

使用碘克沙醇作為梯度離心介質(zhì)，可以有效分離和純化外泌體。通過對離心純化后物質(zhì)的成分進行分析，可以確定外泌體的純度和濃度。

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